生殖毒性評価・後代検定技術としての生殖細胞系列の完全連続培養技術の開発

生殖毒性评价及子代检测技术等完整种系连续培养技术的开发

• 批准号: 13876059
• 负责人: 佐藤 英明
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13876059/
• 关键词: ヒアルロン酸; ヒアルロン酸合成酵素遺伝子; ヒアルロン酸結合タンパク質; CD44; ギャップジャンクション; MAPキナーゼ; Fas; Fasリガンド; 卵子形成; HAS2; HAS3; fas欠損マウス; アポトーシス

1)卵子の退行抑制、成熟促進、血管増殖に係わるヒアルロン酸合成酵素遺伝子やヒアルロン酸結合タンパク質の解析を行い、HAS1、HAS2を卵丘細胞に、HAS3を卵母細胞に同定するとともにその構造を決定した。また、HAS2の発現調節領域の構造を決定した。ヒアルロン酸・CD44のシグナルがギャップジャンクション蛋白質Cx43のチロシンリン酸化を誘導し、ギャップジャンクションを閉鎖させるカスケードを明らかにした。ギャップジャンクションの閉鎖がどのように卵成熱を誘起するかについていくつかの仮説をたて解析を進めている。2)卵子・卵丘細胞におけるCD44の分布を明らかにした。3)HAS2遺伝子の転写調節領域に卵胞刺激ホルモンに応答する領域があると予想し、解析し、構造を決定した。4)Fas・Fasリガンドシステムが卵胞で発現し、卵子の死滅を誘導することをマウスとブタですでに明らかにした。さらに透明帯にFas・Fasリガンドシステムの発現を抑制する効果があることを明らかにし、このような透明帯の機能を担う分子の同定に努力し、ヒアルロン酸であることを明らかにした。5)始原生殖細胞におけるIgf2rのインプリンティングのプロファイルと調節系を明らかにした。6)cAMPの減数分裂再開始抑制が受精能・発生能の上昇に係わることを明にした。7)マウス体細胞に胚性幹細胞の細胞質を導入し、多分化能をもつ細胞に分化させることに成功した。

1) egg の regression inhibition, mature に promoting, blood vessels, raised colonization わ る ヒ ア ル ロ ン acid synthesis enzyme heritage 伝 son や ヒ ア ル ロ ン acid combined with タ ン パ ク qualitative analytical line を い の, HAS1, HAS2 を eggs high cell に, HAS3 を oocytes に with fixed す る と と も に そ の tectonic を decided し た. Youdaoplaceholder0, HAS2 <s:1> occurrence regulation domain <s:1> structure を determines <s:1> た. ヒ ア ル ロ ン acid, CD44 の シ グ ナ ル が ギ ャ ッ プ ジ ャ ン ク シ ョ ン Cx43 protein の チ ロ シ ン リ ン acidification induced を し, ギ ャ ッ プ ジ ャ ン ク シ ョ ン を atresia さ せ る カ ス ケ ー ド を Ming ら か に し た. ギ ャ ッ プ ジ ャ ン ク シ ョ ン の atresia が ど の よ う に eggs into hot を induced す る か に つ い て い く つ か の 仮 said を た て parsing を into め て い る. 2) Oocytes · cumulus cells におけるCD44 <s:1> distribution を bright ら に に た た 3) HAS2 posthumous son 伝 の planning, regulating field に follicle stimulating ホ ル モ ン に 応 answer す る field が あ る と to think し, parse し, tectonic を decided し た. 4) Fas, Fas リ ガ ン ド シ ス テ ム が follicle で 発 し, egg の die out を induced す る こ と を マ ウ ス と ブ タ で す で に Ming ら か に し た. さ ら に transparent 帯 に Fas, Fas リ ガ ン ド シ ス テ ム の 発 now を inhibit す る unseen fruit が あ る こ と を Ming ら か に し, こ の よ う な transparent 帯 の function を bear の う molecules with に し hard, ヒ ア ル ロ ン acid で あ る こ と を Ming ら か に し た. 5) beginning of primordial germ cell に お け る Igf2r の イ ン プ リ ン テ ィ ン グ の プ ロ フ ァ イ ル と adjust を and Ming ら か に し た. 6)cAMP <s:1> meiosis begins to inhibit が fertilization energy and development energy <s:1> increase に system わる とを Ming に た た. 7) ウス somatic cells に embryonic stem cells <s:1> cytoplasm を were introduced into に and pluripotent を に とに the に cells were successfully differentiated させる とに とに.

项目成果

佐藤 英明: "Progesterone activation of parthenogenones and their potential for development in mouse oocytes."Animal Frontier Sciences- Life science update in animal science-. 61-68 (2003)

Hideaki Sato：“黄体酮激活单性生殖细胞及其在小鼠卵母细胞中的发育潜力。”动物前沿科学 - 动物科学中的生命科学更新 - 61-68 (2003)。

佐藤 英明: "Parthenogenetic activation and subsequent development of rat oocytes in vitro"Mol.Reprod.Dev. 61. 120-125 (2001)

Hideaki Sato：“体外大鼠卵母细胞的孤雌生殖激活和后续发育”Mol.Reprod.Dev. 61. 120-125 (2001)

佐藤英明: "Establishment of an in vitro production system for unclear transfer embryos reconstituted with cultured cells in pigs"J.Reprod.Dev. 47(Suppl.1). 41-45 (2001)

Hideaki Sato：“用猪培养细胞重建不清楚的移植胚胎的体外生产系统的建立”J.Reprod.Dev 47（Suppl.1）。

佐藤英明: "Vitrification of large quantities of immature bovine oocytes using nylon mesh"Cryobiology. 42. 139-144 (2001)

Hideaki Sato：“使用尼龙网对大量未成熟牛卵母细胞进行玻璃化冷冻”，Cryobiology 42. 139-144 (2001)。

佐藤 英明: "Characteristics of infertility in female hypothyroid (hyt) mice"Reproduction. 122. 695-700 (2001)

Hideaki Sato：“雌性甲状腺功能减退 (hyt) 小鼠不育的特征”复制品。 122. 695-700 (2001)