癌細胞の増殖機序と情報伝達系の解析-蛋白リン酸化酵素を中心に-

解析癌细胞的增殖机制和信息转导系统-聚焦蛋白激酶-

• 批准号: 63570557
• 负责人: 桜田 恵右
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63570557/
• 关键词: 増殖; 分化; プロテインキナーゼ; EJ-ras遺伝子; リン酸化蛋白質; 白血病細胞; ヒト培養白血病細胞

(目的)細胞の癌化には癌遺伝子の活性化および遺伝子産物の質的、量的異常の関与が明らかにされている。遺伝子産物の多くはプロティンキナーゼ(以下PK)活性を示すが、癌細胞の増殖、分化における各種PKの相互の関連や発現機序には不明の点が多い。われわれは癌細胞のモデルとしての白血病細胞につきPKの相互関連、発現様式や内在性基質を解析することを目的とした。(対象と方法)(1)対象は症例の白血病細胞、ヒト培養白血病細胞(HL-60、K562、MT-1など)とEJ-H-ras導入マウス線維芽細胞とそのflat ravertant RIの増殖期のものを用いた。(2)方法;各種PK活性測定はNishizuka's Kuoらの方法に準じ、蛋白質定量はBrandford法によった。リン酸化蛋白はKatohらの方法に準じ、オートラジオグラムで検討した。(結果と考察)(1)症例の白血病細胞、培養細胞、EJ-ras/NIHおよびRI細胞のPK活性はPK-C(Cキナーゼ)が主たるPKであり、次いでチロシンPK(T-PK)であったが、A-PK、G-PK、カルモデュリン-PKは極めて低値であった。ATL由来のMT-1ではいずれのPKも検出し難かった。(2)MT-1以外の各種細胞はPK-C阻害剤および阻害因子により、増殖は抑制され、DNA合成も阻害された。更にHL-60などでは、T-PK阻害剤により増殖は抑制されたが、PK-C活性は保持されていた。従って細胞の増殖や分化ではPK-CとT-PKは異なった発現様式にあることが示唆された。(3)内在性基質蛋白では、PK-Cにより80K、40K、36K、33Kなどがリン酸化され、EJ-ras/NIHでは40K、36Kが特徴的であった。T-PKでは110Kのリン酸化がみられ、PK-CとT-PKでは細胞増殖での基質蛋白の異なることも示唆された。(4)以上より、白血病細胞の増殖、分化にはPK-CおよびT-PKが密接に関連し、PK-CとT-PKとは細胞種や分化度により発現様式が異なることが示唆され、更に検討中である。

(Objective) The relationship between abnormal quality and quantity of products of <s:1> 伝 carcinogenesis に 伝 cancer progeny 伝 activation および progeny 伝 and が, ら ら にされて る る る る. Heritage of the latter's 伝 content more than の く は プ ロ テ ィ ン キ ナ ー ゼ を (PK) activity in す が, differentiation, cancerous cells の raised colonization に お け る various PK の mutual の masato even や 発 now machine sequence に は unknown の が い more. わ れ わ れ は cancer の モ デ ル と し て の leukemia cells に つ き PK の masato each other even, 発 presently others や internality matrix analytical す を る こ と を purpose と し た. (like と seaborne method) (1) two cases like は seaborne の leukemia cells, ヒ ト develop leukemia cells (HL - 60, K562, MT - 1 な ど) と EJ - H - the ras import マ ウ ス line d bud cells と そ の flat ravertant RI の raised colonization period の も の を with い た. (2) Method; Various PK activity determination <s:1> Nishizuka's Kuoら <s:1> methods に quasi-じ and protein quantification <s:1> Brandford method によった. The リ <s:1> acidified protein Katohら <s:1> method に is accurate for じ, and the <s:1> グラムで検 トラジ グラムで検 グラムで検 グラムで検 is suitable for グラムで検 た. と investigation (results) cases (1) A の leukemia cells, cultured cells, EJ - ras/NIH お よ び RI は PK の PK activity - C (C キ ナ ー ゼ) が main た る PK で あ り, い で チ ロ シ ン PK (T - PK) で あ っ た が, A - PK, G - PK, カ ル モ デ ュ リ ン - PK は extremely め て low numerical で あ っ た. The origin of ATL: <s:1> MT-1で ずれ ずれ <s:1> PK 検 out of <s:1> difficult った った. (2) MT - 1 outside の cells は PK - C resistance against tonic お よ び resistance against factor に よ り, raised colonization は inhibit さ れ, DNA synthesis も resistance against さ れ た. More にHL-60な <s:1> で で た, T-PK inhibitor によ <s:1> proliferation <s:1> inhibition されたが, PK-C activity <s:1> maintenance されて た た. Youdaoplaceholder0 cell <s:1> proliferation や differentiation で 従って PK-CとT-PK なった differentiation なった occurrence pattern にある にある とが indication された された (3) the internality matrix proteins で は, PK - C に よ り 80 k, 40 k, 36, 33 k k な ど が リ ン acidification さ れ, EJ - ras/NIH で は 40 k, 36 k が 徴 で あ っ た. T - PK で は 110 k の リ ン acidification が み ら れ, PK - C と T - PK で は cells raised colonization で の matrix proteins の different な る こ と も in stopping さ れ た. (4) above よ り, differentiation of leukemia cells の raised colonization, に は PK - C お よ び T - PK が contact に masato し, PK - C と T - PK と kind や は cell differentiation degrees に よ り 発 different showing others type が な る こ と が in stopping さ れ, more に 検 beg in で あ る.

项目成果

桜田恵右 他: 医学のあゆみ.

樱田圭介等人：医学史。

Keisuke,Sakurada.,et al.: "Calcium Signal and Cell Response(Yagi,K.and Miyazaki,T.eds.)" Japan Sci Soc Press,Tokyo/Springer-verlag,Berlin, 179-186 (1988)

Keisuke, Sakurada.,et al.:“钙信号和细胞反应（Yagi,K.and Miyazaki,T.eds.）”Japan Sci Soc Press,Tokyo/Springer-verlag,Berlin, 179-186 (1988)

田中雅則 他: 医学のあゆみ.

Masanori Tanaka 等人：医学史。

Keisuke,Sakurada.,et al.: Japanese Journal of Medicine. 28(2). (1989)

Keisuke，Sakurada.，et al.：日本医学杂志。

Keisuke,Sakurada.,et al.: Cancer Res.

Keisuke, Sakurada.,et al.：癌症研究。