スクアレンなどの高級炭化水素の微生物生産と菌体外への分泌

角鲨烯等高级碳氢化合物的微生物生产和细胞外分泌

• 批准号: 01550767
• 负责人: 小川 隆平
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Sojo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 1990
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01550767/
• 关键词: エルゴステロ-ル; スクアレン; Fusarium SP; ニコチン酸耐性; Sgualene hydroxylase

Fusarium sp.No.5ー128Bは菌体内にエルゴステロ-ルを多量に生成し、かつ菌体外へ分泌蓄積する能力をもっている。本研究は、このFusarium sp.を用いて、高級炭化水素の1つであるスクアレンを菌体内に多量生成させると共に、菌体外に分泌蓄積するような能力をもった変異株に育種改良することを目的とした。本年度は、上記目的を達成させるため、育種改良を行った。以下得られた結果を述べる。1.スクアレン生成能の増大を期待して、エルゴステロ-ル要求変異株やカビサイジン耐性増強変異株の誘導分離を試み、また2.エルゴステロ-ル生成能の増大を期待して、カビサイジン感受性変異株やニコチン酸耐性株(NA^r)を分離したが、期待通りではなかった。唯、NA^r株として得たNA201株は親株の約50倍に当たる0.3%のスクアレン含量を示した。NA耐性度は、pHに大きく影響をうけ、pH5以下の条件下で、親株のNA耐性度と差が表れた。またNA201株はコロニ-や胞子の形状、色素生成などが大きく相異した形態変異株であった。NA201株の培養諸条件の最適化を試み、グルコ-ス3g/l含有天然培地、培養温度28℃、300ml張込み/500mlフラスコ(Kd=24×10^<-3>moleO_2/l・hr・atm)での回転振とう機(7cn、180rpm)培養の場合に、親株の約250倍に相当する3%のスクアレン含量が得られた。また、このときのエルゴステロ-ル含量は、親株の約1/10以下に減少していた。C^<14>ー酢酸を倍地に添加して、その代謝経路を追跡した結果、NA201株では、不ケン化画分に取り込まれた放射能の約85%がスクアレン画分に、約9%がエルゴステロ-ル画分に検出され、親株では、不ケン化画分に取り込まれた放射能の約1%がスクアレン画分に、約91%がエルゴステロ-ル画分に検出された。このことによりNA201株は、Squalene hydroxylaseの活性が、変異によってかなり弱められたものと考察した。

Fusarium sp.No.5 "128B" bacteria were produced in vivo and secreted in vitro, and the ability to secrete them in vitro. In this study, Fusarium sp. In this paper, we use high-carbon water and high-carbon water to produce a large number of bacteria in vivo, and the bacteria can secrete and accumulate the capacity of bacteria in vitro. the purpose of this study is to breed the improved strains. The annual records of this year have been completed, and the breeding of improved products has been completed. The following is a summary of the results. 1. The ability to generate energy is expected to increase, and it is required that the tolerance of the plant should be strengthened. The ability to generate acid tolerant strains (Na ^ r) was isolated and expected to be isolated. However, the content of NA201 plant was about 50 times higher than that of na ^ r plant, which was 0.3% higher than that of the control group. NA tolerance test, pH tolerance test, NA tolerance test under pH5 condition, NA tolerance difference table. The shape, pigmentation and morphology of NA201 plants were similar to those of other plants. The condition of NA201 plant culture is that the natural culture site, incubation temperature 28 ℃, 300ml temperature