ペプチジルアルギニンデイミナ-ゼのエストロゲンによる誘導とその生理的意義

雌激素诱导肽基精氨酸脱亚胺酶及其生理意义

• 批准号: 01560086
• 负责人: 高原 英成
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Ibaraki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01560086/
• 关键词: ペプチジルアルギニンデイミナ-ゼ; エストロゲン; マウス子宮; 免疫組織化学; 卵巣摘出マウス

ペプチジルアルギニンデイミナ-ゼ(以下PADaseと略記)はCa^<2+>の存在下で蛋白質のArg残基を脱イミノレCit残基に変換する蛋白質修飾酵素である。PADaseは脊椎動物界に広く分布しているがその生理機能は不明である。最近筆者らは、マウスの子宮においてPADase活性が性周期に伴い変価することを見出した。これは子宮内PADase活性が性ホルモンによって制御されていることを示唆する。本研究では卵巣摘出マウスを用い各種ホルモンによるPADaseの誘導的生成について検討した。10〜14週齢のマウスより卵巣を摘出し10〜14日後各種の性ホルモンを投与した。卵巣摘出マウスの子宮は微弱な活性しか示さないが、エストロゲン投与により活性が高まりその増加量はエストロゲン活性の強い順、即ち17β-エストラジオ-ル、エストロン、エストリオ-ルの順に高かった。またエストラジオ-ル安息香酸エステルは生体中で分解され難いためか上記のものに比べより強い誘導能を示した。またプロゲステロンは効果がなく、エストロゲンと併用した場合はエストロゲンの効果を著しく低下させた。エストラジオ-ル安息香酸の投与量と投与後各時間におけるPADase活性の変化について調べた結果、1匹当り(約20g体重)0.25μgから明確な誘導が認められ、25μgで最大となった。また時間変化は25μg投与において7.5hrで上昇が認められ30〜45hrで最大に達し、60〜75hrで緩やかに減少した。つぎにこれら活性変化とPADase量との関係を明らかにするためにマウスPADase特異抗体によるWestern-Blotによる解析を行った。その結果エストロゲンによる活性増加は酵素量の増加によることが判った。またこの変化が子宮組織内の何れの部位で起っているかを免疫組織化学により検討したところ、内腔上皮および腺上皮においてのみ変化が認められた。これらの結果は、正常マウス子宮におけるPADaseの性周期変化および局在性を再現していることから、子宮内PADaseがエストロゲンの制御下にあることが証明された。

ペ プ チ ジ ル ア ル ギ ニ ン デ イ ミ ナ - ゼ (hereinafter PADase と jot) は Ca ^ 2 + < > の で proteins in the presence of の Arg residues を off イ ミ ノ レ Cit residues に variations in す る protein modification enzyme で あ る. PADase in the vertebrate kingdom に broad く distribution <s:1> て るがそ るがそ <s:1> physiological functions く unknown である. Recently the author ら は, マ ウ ス の uterus に お い て PADase active が に sexual cycle with い - 価 す る こ と を shows し た. こ れ は uterus PADase が sexually active ホ ル モ ン に よ っ て suppression さ れ て い る こ と を in stopping す る. In this study, で ウスを oocytes were extracted and ウスを ウスを was produced by <s:1> various ホ モ モ <e:1> によるPADase <s:1> to investigate た. At 10 to 14 weeks, 齢 齢 ウスよ ウスよ ウスよ ウスよ ovulates を were retrieved. 10 to 14 days later, various <s:1> sexual ホ, モ, を and を were administered. Egg 巣 pick out マ ウ ス の は weak な uterine activity し か shown さ な い が, エ ス ト ロ ゲ ン cast with に よ り high active が ま り そ の rights added amount は エ ス ト ロ ゲ ン active の い shun, namely ち 17 beta エ ス ト ラ ジ オ ル, エ ス ト ロ ン, エ ス ト リ オ - ル の shun に high か っ た. ま た エ ス ト ラ ジ オ - ル benzoic acid エ ス テ ル は で decomposition in living body さ れ difficult い た め か written の も の に than べ よ り strong い can induce を shown し た. ま た プ ロ ゲ ス テ ロ ン は unseen fruit が な く, エ ス ト ロ ゲ ン と and し た occasions は エ ス ト ロ ゲ ン の unseen fruit を the し く low さ せ た. エ ス ト ラ ジ オ - ル benzoic acid の と cast and cast and quantity each time after に お け る の PADase activity - the に つ い て adjustable べ た result, 1 horse when り (about 20 g weight) 0.25 mu g か ら clear な induced が recognize め ら れ, 25 mu g で biggest と な っ た. ま た time variations change は 25 mu g cast with に お い て 7.5 hr で が recognize め ら れ 30 ~ 45 hr で biggest に し, 60 ~ 75 hr で slow や か に reduce し た. つ ぎ に こ れ ら activity - the と PADase quantity と の masato を and Ming ら か に す る た め に マ ウ ス PADase specific antibodies に よ る Western Blot - に よ る parsing line を っ た. The そ <s:1> result shows that the エストロゲ による による による activity increases, the <s:1> enzyme amount <e:1> increases, and the による った とが is judged as った. ま た こ の variations change が uterine tissues の what れ back で の っ て い る か を immunohistochemical に よ り beg し 検 た と こ ろ, inner cavity epithelium お よ び glandular epithelium に お い て の み variations change が recognize め ら れ た. こ れ ら の results は, normal マ ウ ス uterus に お け る PADase の sexual cycle - the お よ び bureau in the sexual を reappearance し て い る こ と か ら, intrauterine PADase が エ ス ト ロ ゲ ン の under the system of imperial に あ る こ と が prove さ れ た.

项目成果

Hidenari TAKAHARA: "Expression of Peptidylarginine Deiminase in the Uterine Epithelial Cells is Dependent on Estrogen" The Journal of Biological Chemistry.

Hidenari TAKAHARA：“子宫上皮细胞中肽基精氨酸脱亚胺酶的表达依赖于雌激素”《生物化学杂志》。