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真核生物に遍在するプロテアソ-ム(多成分プロテア-ゼ復合体)の遺伝子構造解析

真核生物中普遍存在的蛋白酶体（多组分蛋白酶复合物）的遗传结构分析

基本信息

批准号：
01570159
负责人：
田中啓二
金额：
$ 1.22万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

(1):ラットプロテアソ-ムのcDNAクロ-ニングと一次構造の解析ラット肝プロテアソ-ムを構成する複数のサブユニット成分を逆相高速液体クロマトグラフイ-で分離し、その溶出順にRC1からRC10と命名した。各成分の部分構造を基に合成したヌクレオチドをプロ-ブとしてラット肝のcDNAライブラリ-をスクリ-ニングして、プロテアソ-ムをコ-ドするcDNAクロ-ンを分離した。そのヌクレオチド配列から現在RC2,RC3,RC5,RC8,RC9の5種の成分の一次構造を決定した。これら全てのサブユニットは独立した遺伝子にコ-ドされていたが、これらの成分と構造類似性を示す既知の蛋白質は存在しなかった。しかしプロテアソ-ムのサブユニット間では高いホモロジ-が認められたので、プロテアソ-ムは一群のファミリ-を構成する遺伝子産物が集合した新種の複合体であると結論された。(2):ヒトプロテアソ-ムのcDNAクロ-ニングと一次構造の解析ラットプロテアソ-ムの成分RC2とRC8のcDNAをプロ-ブとしてヒト肝癌細胞のcDNAライブラリ-をスクリ-ニングし、ヒトプロテアソ-ムの成分HC2とHC8をコ-ドするcDNAクロ-ンを単離し、そのヌクレオチド配列より一次構造を決定した。このヒトHC2,HC8とラットRC2,RC8の一次構造は95%以上同一であり、これらが同種の機能を保持している可能性が示唆された。(3):イ-ストプロテアソ-ムのcDNAクロ-ニングと一次構造の解析イ-ストプロテアソ-ムの抗体をプロ-ブとしてイ-ストcDNAの発現系ライブラリ-をスクリ-ニングし、二種の成分YC1とYC7-αのcDNAを単離しその一次構造を決定した。これらの成分はラット及びヒト成分と互いに高い構造類似性があり、プロテアソ-ムの成分群は進化的に保存された共通の遺伝子が生じてきたことが示唆された。

(1)The cDNA library of the first order structure is composed of a plurality of components, a reverse phase high speed liquid library is separated, and the dissolution sequence is RC1, RC10. The partial construction of each component is based on the combination of the "click button" and the "click button" of the cDNA library, and the "click button" of the cDNA library is separated. The primary structure of the five components of RC2,RC3,RC5,RC8 and RC9 is determined by the arrangement of the five components. All of these proteins are independent of each other and structurally similar to each other. The results show that there is a high probability that the new species will form a new complex. (2)The analysis of cDNA fragments of RC2 and RC8 in liver cancer cells by using the primary structure of the cDNA fragments of RC2 and RC8 in liver cancer cells was carried out. The primary structure of HC2,HC8 and RC2,RC8 is more than 95% identical, and the possibility of maintaining the same function is shown. (3)Analysis of the primary structure of the cDNA library of YC1-YC7-α and determination of the primary structure of the cDNA library of YC1-YC7-α. The structural similarity of these components is higher than that of other components, and the evolution of these components is common.