ヒト胎児肝に特異的に存在するグルタチオンS-トランスフェラ-ゼに関する研究

人胎肝中特有的谷胱甘肽S-转移酶的研究

• 批准号: 01571191
• 负责人: 北田 光一
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01571191/
• 关键词: ヒト胎児肝; グルタチオンS-トランスフェラ-ゼ; グルタチオン

ヒト胎児肝細胞質に存在する酸性グルタチオンS-トランスファラ-ゼ(酸性GST)分子種の精製およびその性質の検討を重点的に行ない以下の結果を得た。1.両親の承諾を得て北海道大学医学部病理学教室および川鉄病院から提供された胎児肝を用いた。ヘキシルグルタテチオンカラムクロマトグラフィ-とFPLCによるクロマトフォ-カシングまたはMonoSカラムクロマトグラフィ-を組み合わせることにより再現性よく電気泳動的に均一な標品を得ることに成功した。2.精製した酸性GSTの見かけの等電点は4.8-4.9であり、その単量体の分子量は23,000と算出された。3.クロルジニトロベンゼン(CDNB)またはエタクリン酸を基質とした際の胎児肝細胞質GST活性に対する抗体の影響から、本酵素は両基質のGSH抱合反応に関与する主たる酵素であることが推察された。4.酸性GSTに対する抗体を作製し、胎児肝の存在量を免疫定量した結果、その存在量は2.5-4.0μg/g肝(n=4)と算出された。一方、成人肝細胞質(n=7)にはほとんど存在しなかった。5.精製標品はジクロルニトロベンゼン、CDNB、エタクリン酸等を基質とした。6.ヒト胎盤およびラット胎盤由来のGST分子種の抗体は共に本精製酵素を認識したが、ラット肝由来の分子種であるGST(1-1)、(2-2)、(3-3)および(4-4)の抗体は交叉反応を示さなかった。7.本GST分子種のN-端末アミノ酸配列は20残基までの判明した範囲内でヒト胎盤由来のGSTのそれと一致した。以上の結果より、本研究で精製したヒト胎児肝の酸性GST分子種はPiクラスに分類されるものと考えられた。ヒト胎盤由来のGST分子種との相異については結論が得られなかったが、すでにヒト胎児肝酸性GSTのcDNAクロ-ニングを開始しており、現在その構造を解析中である。また、本分子種が発癌時に発現するか否かについても検討中である。

The following results were obtained from the study of the purification and properties of acidic GST molecular species in fetal liver cytoplasm. 1. The Department of Pathology, Faculty of Medicine, Hokkaido University, and Sichuan Railway Hospital are committed to providing information on the use of fetal liver. The first step is to create a new environment, and the second step is to create a new environment. 2. The isoelectric point of purified acidic GST is 4.8-4.9, and the molecular weight of pure GST is 23,000. 3. CDNB (CDNB) is an enzyme that detects the effect of antibody on the activity of GST in fetal liver cytosol and GSH fusion in fetal liver cytosol. 4. The antibody to acidic GST was produced and the amount of fetal liver present was calculated as 2.5-4.0μg/g liver (n=4). A square, adult liver cytoplasm (n=7), 5. The refined standard products are made of bases such asン, CDNB, andンacid. 6. Antibodies to GST molecular species derived from placenta and liver are cross-linked to GST(1-1), GST (2-2), GST (3-3) and GST (4-4). 7. The N-terminal amino acid sequence of the GST molecule was identified at residue 20. The results of this study were as follows: 1. The molecular species of GST in fetal liver were classified into two groups: one group and the other group. The molecular species of GST from placenta are different, and the structure of GST from fetal liver is analyzed. This sub-species is found in the middle of cancer.

项目成果

M.KITADA,T.SHIMADA.M.KASHIWADA,K.ITAHASHI,K.SATO AND T.KAMATAKI: "PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF ACIDIC FORMS OF GLUTATHIONE S-TRANSFERASE IN HUMAN FETAL LIVERS"

M.KITADA、T.SHIMADA.M.KASHIWADA、K.ITAHASHI、K.SATO 和 T.Kamataki：“人类胎肝中酸性形式谷胱甘肽 S 转移酶的纯化和表征”