ヒト細胞の放射線誘発突然変異の遺伝子座特異性

人类细胞辐射诱导突变的位点特异性

• 批准号: 02680169
• 负责人: 巽 紘一
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02680169/
• 关键词: 2,8ジハイドロキシアデニン結石症; ジアミノプリン抵抗性; RFLP; 6チオグアニン抵抗性; APRT; 核分裂中性子; γ線; 異型接合性喪失(LOH)

2,8ジハイドロキシアデニン(DHA)を成分とする尿路結石を主症状とする劣性遺伝病が常染色体16番長腕上に遺伝子が存在するアデニンフォスフォリボシルトランスフェラ-ゼ(APRT)欠損に因る。そこで患者の親から樹立されたリンパ芽球様細胞株(LCL)を材料にaprt+/ー→ー/ーの突然変異ジアミノブリン抵抗性(DAP^r)を指標として定量的に検出する素を開発した。 ^<137>Csγ線照射によって同時に測定したHPRT座位上の変異であるチオグアニン抵抗性(TG^r)に比べ、約10倍の効率でDAP^r変異が誘発された。近畿大学原子炉(UTRーKINKI)の核分裂中性子とγ線の混合放射線によるDAP^r誘発もTG^r誘発の7〜10倍高い効率であったが,RBEは2以下で他の生物学的終結点や従前の報告とは異っているので次年度での繰返し実験による確認が必要である。ヘテロ保因者由来LCLがRFLPについてもヘテロの二重異型接合体であることをSphIで見出しこのヘテロ接合状態の喪失を指標に(LOH)放射線誘発突然変異の特徴を解析した。サザンブロット解析で自発DAP^rクロ-ンでは22/26(85%) ^<137>Csγ線2Gy(7倍上昇)では64/69(93%)でLOHを伴っており,大きなゲノム変化がDAP^rの成因と考えられた。これに対し紫外線10J/n^2(2倍上昇)では17/13(55%)MNNG1.2μs/ml(20倍上昇)では13/43(30.2%)であった。これまで我々がHPRT座位でTG^rクロ-ンのDNA解析から自発変異で29% ^<137>Csγ線で47%に何らかの大きなゲノム変化(欠失)を観察していることから,常染色体上のAPRT座位の場合には,相同染色体のheritable変異がlocalized change(点突然変異と極めて小さい欠失)である限り,大きなゲノム変化を伴う変異体が生存して回収される確率の高いことが,自発変異粗度,電離放射線誘発頻度でDAP^rがTG^rより約10倍高い理由であることが示唆された。

The main symptom of urinary calculi is due to DHA component 2, 8, and the presence of abnormal genes on the wrist of autosome 16. In this case, the patient's parent cell line (LCL) is an aprt+/→/→ mutant cell line resistance (DAP^r) indicator and quantitative marker. Cs-gamma <137>irradiation was used to determine the variation in HPRT locus, and the variation in TG resistance was about 10 times higher than that in DAP resistance. 7 ~ 10 times higher efficiency of nuclear fission induced by gamma rays in UTR KINKI,RBE 2 or less is the end point of other biology, and it is necessary to confirm the return of gamma rays in the next year. Analysis of characteristics of sudden change in radiation-induced gene expression by LCL, RFLP and loss of conjugation index (LOH). The analysis of the self-generated DAP^r was 22/26(85%) ^<137>Csγ ray 2Gy(7-fold increase) was 64/69(93%), LOH was accompanied by a large increase in DAP^r. For UV 10J/n^2(2-fold increase), 17/13(55%) MNNG 1.2 μs/ml(20-fold increase), 13/43(30.2%). DNA analysis of HPRT loci showed that 29% of HPRT <137>loci were self-variant, 47% of HPRT loci were variant, and 47% of HPRT loci were variant.(Point sudden change to extreme, small loss)

项目成果

Arita,I.et al.: "Evidence for spontaneous conversion of Mex^ー to Mex^+ in human lymphoblastoid cells" Carcinogenesis. 11. 1733-1738 (1990)

Arita, I. 等人：“人淋巴母细胞中 Mex^ー 自发转化为 Mex^+ 的证据”致癌作用。11. 1733-1738 (1990)

巽 紘一: "ヒト培養細胞および染色体診断マニュアル" 講談社 サイエンティフィック, 182 (1990)

辰巳浩一：《人类培养细胞和染色体诊断手册》讲谈社科学，182（1990）

Kurihara,T.et al.: "Two types of DNA ligase I activity in lymphoblastoid cells from patients with Bloom's syndrome" Japan Journal of Cancer Research. 82. 51-57 (1991)

Kurihara,T.et al.：“布卢姆综合征患者的淋巴母细胞中的两种 DNA 连接酶 I 活性”日本癌症研究杂志。

Tachibana,A et al.: "Molecular changes in UVーinduced and γーrayーinduced mutations in human lymphoblastoid cells" Mutation Research. 230. 159-166 (1990)

Tachibana, A 等人：“人类淋巴母细胞中紫外线诱导和 γ 射线诱导突变的分子变化”突变研究 230. 159-166 (1990)。