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新しいビタミンPQQ測定とそれによる肝疾患のスクリ-ニング

新的维生素 PQQ 测量和利用它筛查肝病

基本信息

批准号：
02557027
负责人：
井口弘
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02557027/
关键词：
ピロロキノリンキノン PQQ HPLC 抗PQQ兎血清

项目摘要

最近、種々の酵素の補酵素として発見されたピロロキノリンキノン(PQQ)は新なビタミンの可能性をもっている。しかし生体試料中の全PQQ定量法や種々疾患々者の血清PQQ量は全く不明である。そこで血清中の全PQQ量の測定法を確立し、それによって健康者及び肝疾患々者の血清PQQ定量を目的とする研究を行った。1.血清を塩酸々性(pH1.0〜2.0)にして遠心、全PQQを含む上清を陰イオン交換セルロ-スに吸着させたのち,セルロ-スをカラムに充填。カラムを洗〓後、PQQを0.2N苛性ソ-ダで溶離回収。回収液を燐酸々性にし直ちに蛍光モニタ-とデ-タ処理機を装備したHPLCでPQQを分析した。PQQは再現性よく完全に分離された。しかし血清PQQは極めて微量で、肝疾患々者のそれは検出限界量であった。従って多量の血清からPQQを分離濃縮することなく正確な定量をすることは困難で,スクリ-ン法として用いるには一層の改良を要することが判明した。2.PQQをハプテンとするヘモシアニン及びメチルアルブミン複合体を作製し,これらで兎の免疫した。この結果、えられた兎血清はPQQーヘモシアニン及びPQQーメチルアルブミン複合体と強い反応を示したが、同時にヘモシアニンやメチルアルブミンそのものとも反応した。一般にPQQは蛋白やアミノ酸と容易に,かつ非特異的に反応し、これらと複合体を形成する。このため上記の抗血清がPQQそのものと特異的に抗原抗体反応することを明らかにする必要がある。PQQと蛋白等との,特に抗血清蛋白との非特異的反応を除去しない限り,PQQ定量にこの抗血清との反応を利用することは現実に困難である。そこで目下PQQと抗血清との反応から非特異的反応を除外する方法を検討中である。

Recently, a variety of enzyme enzymes have been widely used in recent years. We can see that there is a significant difference in the possibility of a new type of enzyme called PQQ. The total PQQ quantitative method was used in the raw materials. The serum PQQ levels of patients with various diseases were completely unknown. Objective to study the quantitative determination of serum PQQ in healthy people and patients with liver disease. 1. Serum acidity (pH1.0~2.0) and total PQQ contained supernatant and antiserum drugs, which were filled with inhalation and filling. After washing, PQQ 0.2N caustic solution is dissolved back. The equipment of the equipment is HPLC PQQ analysis. PQQ is completely separated from each other by having sex. Serum PQQ levels were measured in patients with small amounts of liver disease and liver diseases. A large amount of serum PQQ was separated from each other, and the quantitative analysis was correct. The quantitative method was used to determine the disease. 2.PQQ clones were inoculated with antigens and clones, and the complexes were immunized. The results showed that the serum PQQ and PQQ antigens were not detected, and the complex was strongly detected. At the same time, the response was not detected. General "PQQ" protein, "acid" is easy, "non-specific"anti", "complex" to form a complex. The antiserum PQQ antiserum specific antigen and antibody antigens and antibodies specific to antiserum antibody antigens specific antigens antiserum antibody antigens specific antigens antiserum antigens antiserum antigens specific antigens antiserum anti PQQ antiserum albumin, specific antiserum, antiserum, antiserum PQQ antisera, antiserum, antiserum, anti