豚ILー2依存性細胞の株化とその性状についてーとくにILー2レセプタ-について

关于猪IL-2依赖性细胞系的建立及其性质，特别是IL-2受体。

• 批准号: 02660326
• 负责人: 井上 武
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02660326/
• 关键词: 豚; ILー2レセプタ-; 蛍生分光光度計; digoxigenin; mRNA

豚リンパ球のILー2レセプタ-を免疫学的におよびそのmRANをdot blot hybridization法で検索が可能性かを検討し以下の成績を得たので報告する.1)豚リンパ球のILーレセプタ-の免疫学的検索法:まず市販抗ヒトILーレセプタ-蛍光標識単クロ-ン抗体と蛍光分光光度計の利用可能性を検討した.初めに,自家製の抗豚IgM蛍光標識抗体で蛍光染色リンパ球の蛍光強度測定をした.励起,蛍光波長はそれぞれ495nm,526nmが至適であった.また,細胞数は2×10^6個で容量1mlを1cm角のセルにいれるのがが蛍光強度の測定には適切である.また,抗ヒトILー2レセプタ-単クロ-ン抗体がCTLLー2細胞,豚ILー2依存性長期継代細胞に利用出来た.従って本法で豚ILー2レセプタ-の測定が可能と思われる.以後蛍光標識抗ヒトILー2レセプタ-単クロ-ン抗体で染色し,蛍光顕微鏡と蛍光分光光度計で計測した.ILー2レセプタ-陽性細胞の総蛍光強度は脾臓,腸リンパ節,パイエル板細胞について比較すると,パイエル板細胞>脾臓細胞>腸リンパ節細胞であった.2)豚リンパ球のILー2レセプタ-mRNAの検出:非放射性検出法の検討とヒトプロ-ブcDNAの利用の可能性を検討した.非放射性標識物質としてdigoxigeninを用い,dot blot hybridizationを行ったところ,9.4×10^5コピ-まで検出可能であった.また,ヒトプロ-ブは豚継代リンパ球由来のmRNAと反応することも明らかになった.これらの成績にもとずきdigoxigeninを標識したヒトILー2レセプタ-cDNAをプロ-ブとして培養2日の豚リンパ球由来のmRNAとのdot blot hybridizationを行うこととした.その結果,ILー2レセプタ-mRNA量はパイエル板細胞>脾臓細胞>腸リンパ節細胞であった.今後,これらの方法でのさらにデ-タの集積を行うとともに,長期継代細胞の種類を増し,豚ILー2レセプタ-の性状解析,単クロ-ン抗体の作成を試みる.

The immunology of the dolphin, the IL, the dot blot hybridization, the possibility, the possibility, the IL, the immunology, the possibility. For the first time, our own anti-dolphin IgM light-labeled antibody light staining was used to determine the light intensity of the ball. When excited, the wavelength of light is 495 nm, 526 nm, and so on. The number of cells is 2 × 10 ^ 6. The capacity of 1ml

项目成果

井上 武: "豚のILー2レセプタ-の検索法について" 日本獣医学会誌.

Takeshi Inoue：“如何在猪中寻找 IL-2 受体”日本兽医协会杂志。