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単一心筋細胞のNaーCa交換電流の性質について

单心肌细胞Na-Ca交换电流特性的研究

基本信息

批准号：
02670045
负责人：
木村純子
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Yamagata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02670045/
关键词：
心筋パッチクランプ NaーCa交換膜電流 Na Ca 膜輸送ピンポン型

项目摘要

まず、前年度行ったNaーCa交換の交換様式がピンポン型か、同時型かを更に調べる為、酵素反応速度論の生成物阻害法の理論に沿って、細胞内CaとNaが競合拮抗するか否かを調べる実験を試みた。細胞内液(電極内液)のNa濃度を一定(20mM)に固定し、細胞内Ca濃度を変化させた時、各々のCa濃度で、細胞内Naと細胞外Caによる外向き交換電流の大きさを測定して調べようとした。細胞内Caを80nMから300nMまで徐々に上げても、交換電流に対する細胞内Caの抑制効果は見られなかった。それ以上のCa濃度にすると細胞は拘縮を起こした。この拘縮を克服するため様々な方法を試みた。例えば、細胞外液をグルコ-スで高張にするとか、収縮を抑えるBDM(butanedione monoxim)を灌流する、あるいはCN等の代謝阻害剤を灌流する等である。これらの方法は細胞の拘縮を抑制したが、同時にNaーCa交換電流も抑制した。従って細胞内でCaとNaがNaーCa交換担体の結合部位で競合拮抗するかどうかは、結論を出すことができなかった。次に、ニュ-ヨ-クのコロンビア大学から招待され薬理学教室でGeaーNy Tseng博士と二ヶ月共同実験を行った。ここでの実験で、細胞外液のClイオンを少なくすると、Ca電流やK電流が可逆的に小さくなることがイヌの心室筋及びプルキンエ細胞で解った。なぜ小さくなるかの検討は、滞在期間が切れたためできなかったが、今後の課題である。第三にNaーCa交換電流にカルモジュリンの関与があるかどうか調べるため、カルモジュリン阻害剤のwー7を作用させた所、100uMのwー7がほぼ完全にNaーCa交換電流を抑制することが解った。現在、wー7と電流値の濃度反応曲線を調べる実験が進行中である。

The exchange model of Na ~ Ca exchange in the previous year is different from that in the previous year. The model of Ca ~ Na exchange in the previous year is different from that in the previous year. The model of Na ~ Ca exchange in the previous year is different from that in the previous year. The When Na concentration in intracellular solution (electrode solution) was fixed (20mM), Ca concentration in intracellular solution was changed, Ca concentration in intracellular solution was changed, and outward exchange current of Na and extracellular Ca was measured. Intracellular Ca from 80nM to 300nM is inhibited by the presence of an exchange current. The above Ca concentration caused the cell contraction. The method to overcome this restriction is to try it out. For example, the extracellular fluid is high tension, contraction, inhibition, BDM(butanedione monoxim), perfusion, CN and other metabolic barriers. This method inhibits cell contraction and Na ~+ exchange current. The binding site of Ca ~(2 +) Na ~(2 +) Ca ~(2 +) exchange carrier in the cell is antagonistic to each other, and the conclusion is that the binding site of Ca ~(2 +) Na ~(2 +) is antagonistic to each other. Dr. Gea-Ny Tseng and Dr. Gea-Ny Tseng worked together in February. This is the first time that a cell has been isolated from a human body.なぜ小さくなるかの検讨は、滞在期间が切れたためできなかったが、今后の课题である。The third phase is Na ~ Ca exchange current suppression. At present, w-7 and current value concentration inverse curve are adjusted.