Cキナ-ゼ阻害薬の無傷細胞系における作用特異性に関する研究

C-激酶抑制剂在完整细胞系中作用特异性的研究

基本信息

  • 批准号:
    02670096
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.34万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1990
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1990 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

強力なCキナ-ゼ活性化物質として知られるTPAは初代培養マウス表皮細胞において、オルニチン脱炭酸酵素(ODC)の誘導、PGE_2の生成、EGFの受容体への結合阻害を引きおこすことが知られている。TPAのこれらの作用に対するCキナ-ゼ阻害薬(Hー7,staurosporine,sphingosine)の効果を検討したところ,TPAによるODC誘導はHー7により濃度依存的に抑制されたが、TPAによるEGF結合阻害作用には拮抗しなかった。一方、sphingosineはTPAによるODC誘導にも、EGF結合阻害作用にも拮抗した。一方、staurosporineはTPAによるODC誘導を高濃度では抑制したが低濃度(実際にCキナ-ゼを阻害する濃度)では抑制しなかった。TPAによるPGE_2生成促進作用は、Hー7により強く抑制されたが、stauroーsporineでは抑制されなかった。次に無傷表皮細胞におけるTPAによる内因性蛋白のリン酸化を二次元電気泳動法を用い検討したところ,TPAによりリン酸化が促進される蛋白8つと、逆にTPAにより脱リン酸化が促進される3つの蛋白が見い出された。それらの内5つの蛋白は細胞質分画にのみ認められ、1つの蛋白は膜分画(核を含む)のみに認められ、残りの5つの蛋白は細胞質と膜分画の両方に認められた。これらの蛋白はいずれもセリン残基がリン酸化されており、TPA以外のCキナ-ゼ活性化物質(mezerein,RPA,合成ジアルグリセロ-ル)によってもリン酸化が促進されたことからCキナ-ゼによるリン酸化と考えられた。TPAによる内因性蛋白のリン酸化に及ぼす各種阻害薬の効果を検討したところ、リン酸化を受ける内因性基質蛋白により阻害薬の阻害効果が異なり且つ同一の基質蛋白についてもリン酸化を阻害する阻害薬と阻害しない阻害薬が認められ、各阻害薬に見られた細胞反応に対する阻害効果の特異性の少なくとも一部はこれら阻害薬の内因性蛋白のリン酸化阻害作用の特異性にもとづくものであることが示唆された。
TPA, a potent C-activating substance, is known to induce the production of PGE2, the induction of decarboxylase (ODC), and the inhibition of EGF receptor binding in primary cultured epidermal cells. The effect of TPA on ODC induced inhibition of H7,staurosporine,sphingosine was investigated. The effect of TPA on ODC induced inhibition of H7,staurosporine, sphingosine was antagonized by EGF. One side, sphingosine, antagonized the ODC induction and EGF inhibition. One side, staurosporine TPA induced high concentrations of ODC, but inhibited low concentrations of ODC. TPA promotes PGE_2 production, and H_7 strongly inhibits PGE_2 production. In addition,TPA can promote the development of endogenous protein in non-injured epidermal cells by using two-dimensional electrokinetic method, and TPA can promote the development of endogenous protein 8. 5. Protein and membrane separation (nuclear and membrane) 5. Protein and membrane separation In this case, it is necessary to prepare the active substance (mezerein,RPA) for the first time. TPA is an endogenous protein that inhibits the acidification of proteins, and the inhibition of the acidification of proteins. Each inhibitor has its own specificity for the inhibitory effect of the endogenous protein.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Aizu,E.: "Differential effects of various skin tumorーpromoting agents on prostaglandin E_2 release from primary cultures of mouse epidermal cells" Eur.J.Pharmacol.182. 19-28 (1990)
Aizu,E.:“各种皮肤肿瘤促进剂对小鼠表皮细胞原代培养物中前列腺素 E_2 释放的不同影响”Eur.J.Pharmacol.19-28 (1990)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Nishikawa,K.: "Rapid alteration of endogenous protein phosphorylation levels induced by tumor promoters in primary cultured mouse epidermal cells" J.Biol.Chem.
Nishikawa,K.:“原代培养的小鼠表皮细胞中肿瘤启动子诱导的内源蛋白磷酸化水平的快速改变”J.Biol.Chem。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
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    0
  • 作者:
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知道了