癌遺伝子を導入した,トランスジェニックマウスを用いた,造血幹細胞株の樹立

使用导入癌基因的转基因小鼠建立造血干细胞系

• 批准号: 02671127
• 负责人: 小川 啓恭
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02671127/
• 关键词: トランスジェニックマウス; Abelson ウイルス; 骨髄幹細胞

我々は,研究室で独自に樹立した,abelsonウイルスの温度感受性株(tsーabl)を,マウス受精卵に注入することによって,骨髄幹細胞株の樹立を目ざしている。国立神経センタ-の花岡氏との共同研究で,tsーablのtransgenic mouseへの導入を試みたが,マウスの尾のSouthern blot解析の結果,マウスへの遺伝子導入効率は,極めて低かった。つまり,導入遺伝子である,tsーablが,マウスのembryogenesisに悪影響を与えていることが推測された。そこで,マウスの胎生期におけるtsーablの発現を最小限に抑えるために,inducible promoterである,ヒトmetallothionein promoterの下流に,tsーablを連結した組み換え体を合成した。さらに,薬剤による導入細胞の選別を可能にするために,Neo遺伝子をタンデムにつないだ。これをマウス受精卵に導入して,現在そのtransgenic mouseを得ようとしているところである。また,ヒト慢性骨髄性白血病の腫瘍細胞は,骨髄幹細胞レベルで,腫瘍化していることが知られている。そして,Philadelphia染色体は,慢性骨髄性白血病患者の90%以上の例で認められ,この染色体異常によって生じる,bcrーabl融合遺伝子は,慢性骨髄性白血病の病因に深く関係している。ablはbcrとの融合遺伝子の形になって,始めて,骨髄幹細胞で,有効にその癌遺伝子としての活性を示すようになる可能性もある。そこで,我々は,bcrーtsーablという融合遺伝子の形にし,さらにmetallothionein promoterをつけた,組み換え体を合成した。現在,これをmouseの受精卵に注入しようとしている。

In our laboratory, we have established a temperature-sensitive stem cell line by ourselves,abelson, and injection of fertilized eggs. The results of Southern blot analysis showed that the rate of gene transfer was very low.つまり,导入遗伝子である,tsーablが,マウスのembryogenesisに悪影响を与えていることが推测された。In addition, the development of its fetal period is limited to the minimum,inducible promoter, metallothionein promoter downstream,ts abl linked to the formation of the body. In addition, the selection of cells introduced into the cell may be related to the selection of Neo genes. This is a transgenic mouse. The tumor cells of chronic osteoblastic leukemia (CKL) are the stem cells of CKL. Philadelphia chromosome abnormalities are recognized in more than 90% of patients with chronic osteopathic leukemia. Chromosomal abnormalities are associated with the development of bcr-abl fusion genes, which are deeply related to the etiology of chronic osteopathic leukemia. Abl is a fusion gene of bcr, which can be expressed in bone marrow stem cells. In addition, we can also combine the metallothionein promoter, metallothionein promoter, metallothionein promoter and metallothionein promoter. Now, the mouse is injected with fertilized eggs.