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UDPーManNAc hydrolaseー細菌におけるシアル酸合成への関与

UDP-ManNAc 水解酶 - 参与细菌唾液酸合成

基本信息

批准号：
02680148
负责人：
荒木義雄
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

シアル酸は糖タンパク、糖脂質などの細胞表層物質の構成成分として、広く動物組織等に存在し、表層物質に負荷電を賦与し、細胞間認識・細胞間情報のシグナリング機能を担う重要な糖成分である。他方、K1,K92,K235抗原をもつE.coli,Meningococcus,Salmonella,Streptococcus,Bacterioidesにシアル酸含有表層物質が存在している。動物細胞におけるシアル酸生合成経路はすでに明らかにされているが、細菌では、まだ未確定と考えられる。RosemanらはGlcNAcー6P→ManNAcー6P→ManNAc→シアル酸の経路が細菌におけるシアル酸合成を担うと提唱しているが、矛盾点も多い。最近、我々はK1抗原を持つE.coliにUDPーManNAcを加水分解する酵素(UDPーManNAc hydrolase)を発見し、約600倍まで精製した。本研究では、この酵素反応の主生成物を2ーアセトアミドグルカ-ルと同定し、シアル酸合成経路とのつながりを検討した。1.酵素及び化学的反応を利用し、UDPーGlcNAcからUDPーManNAcを多量に調製後、上記の精製酵素と反応させ、主反応生成物を分離精製、ついで各種の機器分析で2ーアセトアミドグルカ-ルと同定した。2.UDPーManNAc hydrolaseに加え、ManNAcーkinase、cytidyltransferaseなどのシアル酸合成に関与する酵素の存在が検討した菌に認められた。しかし、2ーアセトアミドグルカ-ルはこれらの酵素の基質とならず、またManNAcへの酵素的変換も観察されなかった。3.従って、UDPーManNAc hydrolase反応の生成物は本来、ManNAcであり、反応系の何らかの欠陥により、異常な生成物2ーアセトアミドグルカ-ルが主に生成したと判断される。今後、酵素系が正常に機能する条件を検討し、UDPーManNAcからシアル酸への変換過程を確認したい。また、他の菌におけるこれらの酵素群の分布をべ、細菌におけるシアル酸生成経路は動物系と異なることを明らかにしたい。

It is necessary to analyze the contents of carbohydrate, glycolipid, glycolipid, glycolipid The other side, K1, K92, K235, antigens, fragments, E. coli. meningococcus, Meningococus, and Salmonella.Streptococcus, Bacterioides antigens, acid contains the surface substance, and there is an acid in it. The pathways of acid synthesis, bacteria and bacteria in animals are not confirmed. Roseman, GlcNAc, 6P, ManNAc, 6p, ManNAc, acid, bacteria, bacteria, acid synthesis, singing, contradictory points. Recently, our K1 antigen has been purified by E.coli, UDP, ManNAc, water-decomposing enzyme (UDP enzyme ManNAc hydrolase), which is about 600fold. In this study, the main product of enzyme reaction is the same as that of acid synthesis. 1. Enzyme and chemical reaction assay, UDP GlcNAc UDP ManNAc assay, high concentration of enzyme reverse reaction, separation of main and reverse products, and analysis of various kinds of machines. 2.UDP, ManNAc hydrolase, kinase, cytidyltransferase, acid synthesis and enzyme exist in bacteria, bacteria, and enzymes. This is the first time that the enzyme gene has been detected. The enzyme has been detected by the ManNAc enzyme. 3. The source of the product, the UDP ManNAc hydrolase, the original product, the ManNAc product, the product. In the future, the enzyme system is the normal mechanism to determine the conditions, and the UDPManNAcoustic response is responsible for the confirmation of the process. The distribution of enzymes, the distribution of enzymes and the production of acid.