非免疫系抗腫瘍性因子の構造と機能

非免疫系统抗肿瘤因子的结构和功能

• 批准号: 03151055
• 负责人: 今西 二郎
• 金额: $ 12.16万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03151055/
• 关键词: 非免疫系; 抗腫瘍性因子; TDF; コンドロモジュリン; グリオスタチン; NBCF; TRF; GMF

本年度の計画は、非免疫系抗腫瘍性因子をほぼ純品にまで精製することでった。この点に関しては概ね目標は達成できたと思われる。すなわち、軟骨細胞の増殖と分化を制御するコンドロモジュリンー1(ChMー1)、センチニクバエ蛹化時に起きる自己組織の崩壊機構に関連するタンパク質性因子、新生期脳由来抗癌因子、グリア細胞成長因子、グリア細胞増殖抑制因子(GGIF)の一つであるグリオスタチンなどは高度精製が可能となり、一部については遺伝子のクロ-ニングにも成功した。また、ウサギ血清中に存在する増殖抑制因子、腫瘍変性因子についても精製が進み、アミノ酸配列も近い将来決定されるところまで来ている。この中で、ChMー1は2kgのウシ胎児軟骨を出発材料として、アセトン分画、SephacrylSー200カラム・クロマト、ヘパリン・アフィニティ-・クロマト、逆相HPLCなどにより、完全精製することに成功した。ChMー1は、25kdの糖タンパク質で、N末端の28残基とリジルエンドペプチダ-ゼ消化断片の21残基のアミノ酸配列を基にしてウシ胎児骨端軟骨cDNAライブラリ-からChMー1前駆体cDNAをクロ-ニングした。その結果、mRNAは1.7kbであることがわかった。ChMー1前駆体は335残基のアミノ酸からなり、そのC末端部分の121残基が成熟型に相当することも明らかになった。グリオスタチンについては、神経線維腫抽出物を、ブル-トヨパ-ル、DEAEセファセル、ブチルトヨパ-ル、ハイドロキシルアパタイト、MonoQカラムで精製した結果、SDSーPAGEで分子量50kdの単一バンドとして得られた。ゲル濾過法で100kdであったことから、通常ホモダイマ-構造を取っているものと思われた。このようにいくつかの因子について精製はうまくいった。一方、生物学的作用の発現機構については、血管内皮細胞に対する作用、いくつかのシグナル伝達系などについて解析を行ってきた。

This year's plan is to refine the pure anti-tumor factors of non-immune systems. The goal is to achieve the goal. Chondrocyte proliferation and differentiation control: Chondrocyte 1(ChM1), Chondrocyte initiation, tissue breakdown mechanism, qualitative factors, neoplastic anti-cancer factors, cell growth factors, cell growth inhibitory factors (GGIF) A part of the success story. There are growth inhibition factors and tumor differentiation factors in serum, which can be used to improve the quality of serum and determine the future of serum. In this paper, ChM-1 was successfully purified from 2kg fetal cartilage by HPLC, Sephacryl S-200 and reverse phase HPLC. ChM-1 is a 25kd carbohydrate fragment, and the 28 residues at the N-terminal end of ChM-1 are aligned with the 21 residues of ChM-1 cDNA.その结果、mRNAは1.7kbであることがわかった。ChM-1 precursor contains residues 335 and 121 in the C-terminal portion of the mature form. The results of purification by MonoQ, SDS PAGE, molecular weight of 50 kd, and molecular weight of 50kd were obtained. The filter method is 100kd, and the structure is usually selected. This is the reason why we are so careful. A method, biological role of the development mechanism, vascular endothelial cells related to the role of the system, the analysis of the process

项目成果

N,Miwa: "Neuroblastoma cells differentiated with a glial factor decrease ther susceptibility to a growth-inhibitory glycoprotein secreted from mouse brain at the terminal stage of ontogeny" Neurochem.Res.16. 170-171 (1991)

N,Miwa：“用神经胶质因子分化的神经母细胞瘤细胞降低了对个体发育末期小鼠大脑分泌的生长抑制糖蛋白的敏感性”Neurochem.Res.16。

S.Waxman: "The status of differentiation therapy of cancer Vol.II" Raven Press, 451 (1991)

S.Waxman：“癌症分化治疗的现状，第 II 卷”Raven Press，451 (1991)

S.Kurata: "Participation of hemocyte proteinase in dissociation of the fat body on pupation of sarcophage peregrina (flesh fly)" Insect Biochem.20(5). 461-465 (1990)

S.Kurata：“血细胞蛋白酶参与石噬游隼（肉蝇）化蛹时脂肪体的解离”Insect Biochem.20(5)。

M.Noda: "Purification and characterization of human fibroblast derived differentiation inducing factor for human monoblastic leukemia cells indentical to interleukin-6" Auticancer Res.11. 961-968 (1991)

M.Noda：“与白细胞介素 6 相同的人单核细胞白血病细胞的人成纤维细胞衍生分化诱导因子的纯化和表征”Auticancer Res.11。

S.Kurata: "Participation of a 200-kDa hemocyte membrane protein in the dissociation of the fat body at the metamorphosis of sarcophaga" Dev.Biol.146. 179-185 (1991)

S.Kurata：“200 kDa 血细胞膜蛋白参与石棺变态过程中脂肪体的解离”Dev.Biol.146。