メイラ-ド反応中間体,3ーデオキシグルコソンの食品および生体における意義

美拉德反应中间体 3-脱氧葡萄糖醛酮在食品和生物体中的意义

• 批准号: 03660129
• 负责人: 早瀬 文孝
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03660129/
• 关键词: 3ーデオキシグルコソン; 細胞毒性; 3ーデオキシフラクト-ス; マクロファ-ジ; メイラ-ド反応; グリケ-ションタンパク質; アルギニン; 糖尿病

本研究はメイラ-ド反応の中間体である3ーデオキシグルコソン(3ーDG)の食品および生体における意義を明らかにする目的で行われた。第一に3ーDGの細胞増殖に対する影響を調べた。HeLaS3,EL4,Chung Liver,FDCP2の各細胞への ^3HーTdRの取り込み量を測定した結果、3ーDGは細胞分裂に影響を与えることが明かとなった。フロ-サイトメトリ-を用いた実験から、3ーDGが細胞増殖サイクルのなかで特にS期に作用し、M期には大きな影響を与えなかった。以上のことから、3ーDGは細胞毒性を有することが明かとなった。第二に3ーDGの定量法を確立するためにHPLCおよびTMS誘導体のGCによって食品中や生体中の3ーDGの検出、定量が可能となった。3ーDGを含まない飼料を与えたラット尿中には3ーDGは検出されなかったが、3ーDGの代謝生成物である3ーデオキシフラクト-ス(3ーDF)が検出され、GCによって定量したところ正常ラット尿中には15μg/ml、実験的糖尿病ラット尿中には28μg/mlの3ーDFが認められた。従って、生体内で3ーDGが生成しているという関接的な証明がなされた。第三に3ーDGの高い反応性から3ーDG修飾タンパク質の化学構造を明らかにする目的でBzArgと3ーDGを反応させ、反応生成物の単離精製をHPLCなどにより行って、NMR、MSなどによって構造解析したところ2ー[δーNーornithyl]ー5[1ー(2,3,4ーtrihydroxybutyl)]ー4ーimidazoloneと同定した。第四にguanidobutyric acidと3ーDGの反応生成物であるimidazoloneをHPLCによって精製し、このハプテンをpolylysineにカップリングさせ抗原を得た。今後、マウスに免疫して抗体を作成する予定である。第五に、3ーDG修飾タンパク質のマクロファ-ジへの応答を調べた。3ーDGをBSAに反応させて調製した3ーDG修飾BSAはマクロファ-ジに特異的に結合し、その結合部位は二つあると推定された。3ーDG修飾BSAのマクロファ-ジに対する結合は、グリケ-ションGSAによって阻害された。

This study は メ イ ラ - ド anti 応 の intermediates で あ る 3 ー デ オ キ シ グ ル コ ソ ン 3 ー (DG) の food お よ び raw body に お け る meaning を Ming ら か に す る purpose line で わ れ た. First, に3 に DG <s:1> cell proliferation に has an effect on する を modulation べた. HeLaS3 EL4, Chung Liver, FDCP2 の each cell へ の ー ^ 3 h TdR の take り 込 を み quantity determination し た results, 3 ー DG は cell division に influence を and え る こ と が Ming か と な っ た. フ ロ - サ イ ト メ ト リ - を use い た be 験 か ら, 3 ー DG が cells raised colonization サ イ ク ル の な か で special stage に S に し, M に は big き な influence を and え な か っ た. The above <s:1> <s:1> と ら ら ら ら ら and 3 <s:1> DG cytotoxicity を include する する とが とが and となった. Second に 3 ー DG の を quantitative method to establish す る た め に HPLC お よ び TMS inductor の GC に よ っ て の や in food body 3 ー DG の 検 out, quantitative が may と な っ た. Contains 3 ー DG を ま な い feed を and え た ラ ッ ト urine に は 3 ー DG は 検 out さ れ な か っ た が, 3 ー DG の metabolic products で あ る 3 ー デ オ キ シ フ ラ ク ト - ス (3 ー DF) が 検 out さ れ, GC に よ っ て quantitative し た と こ ろ normal ラ ッ ト urine に は 15 mu g/ml, be 験 diabetes ラ ッ ト urine に は 28 mu g/ml <s:1> 3 が DFが recognize められた. Youdaoplaceholder0 proof that で3 従って DGが in the body generates <s:1> て ると ると う う う links がなされた. Third に 3 ー DG high の い anti 応 sex か ら 3 ー DG modified タ ン パ ク qualitative の chemical structure を Ming ら か に す る purpose で BzArg と 3 ー DG を anti 応 さ せ, anti 応 products の 単 from refined を HPLC な ど に よ り line っ て, NMR, MS な ど に よ っ て structure し た と こ ろ 2 ー [delta ー N ー ornithyl] ー 5 [1 と (2,3,4, 3-trihydroxybutyl)] と 4, 4-imidazolone と the same as た た. The fourth に guanidobutyric acid と 3 ー DG の anti 応 products で あ る imidazolone を HPLC に よ っ て refined し, こ の ハ プ テ ン を polylysine に カ ッ プ リ ン グ さ せ antigen を た. In the future, て ウスに immune て antibody を is prepared to する determine である. The fifth に, 3 <s:1> DG modifies the タ タ パ パ of the <s:1> substance, the <s:1> ロファ ロファ-ジへ, the 応 responds to the を tone べた. 3 ー DG を BSA に anti 応 さ せ て modulation し た 3 ー DG modified BSA は マ ク ロ フ ァ - ジ に specific に し, そ の combining site は two つ あ る と presumption さ れ た. 3 <s:1> dG-modified BSA <s:1> によって ロファ ロファ-ジに hinders された by する binding によって and グリケ-ショ <s:1> GSAによって.

项目成果

Y.Konishi: "Identification of arginine adduct modified with 3ーdeoxyglucosone" Biosci.Biotech.Biochem.

Y.Konishi：“用 3-脱氧葡萄糖酮修饰的精氨酸加合物的鉴定”Biosci.Biotech.Biochem。

T.Shinoda: "Cytotoxicity of 3ーdeoxyglucosone" Biosci.Biotech.Biochem.

T.Shinoda：“3-脱氧葡萄糖酮的细胞毒性”Biosci.Biotech.Biochem。