グリオ-マ由来マクロファ-ジ遊走因子の作用機序解明とその臨床的応用

胶质瘤源性巨噬细胞迁移因子作用机制的阐明及其临床应用

• 批准号: 03670687
• 负责人: 倉津 純一
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03670687/
• 关键词: Macrophage; Glioma; Chemotaxis; Monoclonal antibody

既に私達はグリオ-マ細胞の培養上清から単球遊走因子(Monocyte chemoattactic protein:MCPー1)を分離精製し、その性状について検討してきた。今回、私達はMCPー1に対するモノクロ-ナル抗体を作成しその特異性について検討した。BALB/cマウスに3回に分けて免疫し、脾細胞と骨髄腫細胞と細胞融合を行い、得られたハイブリド-マの培養上清中の抗体活性を測定した。得られた抗体は5種類でいずれもサブクラスはIgG1であった。免疫沈降反応を行うとこれらの抗体に共通の単一のバンドが得られ、好中球遊走因子であるNAPー1や正常ウサギIgGとは交叉性は認められなかった。また他のサイトカインとの交叉性についてELISAにて検討すると、これら5種類のモノクロ-ナル抗体はMCPー1以外のサイトカインとの交叉は認められなかった。またこれらの抗体はMCPー1のもつ生物活性つまり単球遊走活性を著明に抑制したが、抗体によりその程度に違いが見られた。ヒトグリオ-マ細胞U105MGを蛍光抗体法にて染色するとすべての抗体によって染色され、特に細胞内の核周囲に局触して陽性所見を示す蛍光が見られた。現在、これらの抗体をもちいてグリオ-マの手術時摘出組織におけるMCPー1の局在、更にELISA法によりグリオ-マ患者の髄液や嚢胞内容などの臨床サンプルにおけるMCPー1の定量化にむけて進行中である。またMCPー1のDNA probeを用いてノザ-ンブロット法にてヒトグリオ-マ細胞株におけるMCPー1mRNAの発現を検討すると、55%の細胞株で強い発現がみられた。現在、手術時摘出グルオ-マ組織にて検討中である。

Monocyte chemoaggressive protein (MCP-1) was isolated and purified from culture supernatants of the cells. In this paper, we try to find out the specificity of MCP-1 antibody. BALB/c assay of antibody activity in culture supernatant of spleen cells The five types of antibodies were identified. The immune sedimentation reaction is common to all antibodies, but it's also common to all antibodies, and it's common to all antibodies. The cross-reactivity of the antibody is detected by ELISA, and the cross-reactivity of the antibody is detected by ELISA. This antibody is not specific to MCP-1 and its biological activity is not specific to MCP1. U105MG cells were stained with antibodies, and the perinuclear region of the cells was stained with antibodies. Now, this antibody is in the process of being removed from the tissue at the time of surgery, and the MCP-1 is in the process of being quantified by ELISA, which is in the process of being removed from the tissue at the time of surgery. The expression of MCP-1mRNA was detected in 55% of the cell lines using the DNA probe. Now, when the surgery to pick out the

项目成果

吉村 禎造: "Production and Characterization of Mouse Monoclonal Antibodies Against Human Monocyte Chemoattractant Proteinー1" The Journal of Immunology. 147. 2229-2233 (1991)

Teizo Yoshimura：“针对人单核细胞趋化蛋白 1 的小鼠单克隆抗体的生产和表征”《免疫学杂志》147. 2229-2233 (1991)。

倉津 純一: "悪性グリオ-マ細胞由来の単球遊走因子に対するモノクロナ-ル抗体の作製" Neuroimmunological Research. 4. 176-180 (1991)

Junichi Kuratsu：“针对源自恶性神经胶质瘤细胞的单核细胞趋化因子的单克隆抗体的制备”神经免疫学研究。4. 176-180 (1991)。