Bacteroides属LPSの免疫生物活性発現機序に関する研究

拟杆菌脂多糖免疫生物学活性表达机制研究

• 批准号: 03670855
• 负责人: 梅本 俊夫
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kanagawa Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03670855/
• 关键词: Bacteroides; LPS; リピドA; 化学構造; リンパ球への結合性; KDOーリン酸

今年度の研究ではLPSの免疫生物活性を担っているリピドA部分の構造について検討した。 リピドAの単離はLPSを5%酢酸で100℃2時間処理後クロロホルム/メタノール(3:1)抽出により行った。構造解析の為の脱O-アシル化は弱ヒドラジン分解で、アミド結合脂肪酸の切断は強ヒドラジン分解で行い、全メチル化は箱守法により行った。リピドA画分および得られた誘導体の分析はFab-MSにより行った。その結果、Porphyromonas(Bacteroides) gingivalisのリピドA中の構成脂肪酸は、3-OHisoC17:0が主で、他にC16:0,iso C15:0および3-OHC16:0が検出された。またグルコサミンとリン酸はそれぞれ17%と3.1%含まれていた。リピドA画分のFab-MSにおいてはグルコサミンジサッカライドおよびモノサッカライドが検出され、それぞれに異る脂肪酸との結合の可能性が示唆された。リピドAの骨格構造を調べるためにLPSを脱O-アシル化後弱酸加水分解を行ってFab-MSで調べたところ、3、3'位のアミノ基に3-OHisoC17:0が結合したグルコサミンジサッカライドに相当するm/z878[M+H]+およびm/z900[M+Na]+が検出された。さらにメチル化した誘導体をGLC/MSにより分析した結果、β(1-6)グルコサミンジサッカライドが検出された。今回の実験条件でリピドAの単離が可能であつたことから従来不明であったBacteroides属のリピドA構造の一部を明らかにすることが出来た。現在得られた結果から推定できるP.gingivalisのリピドAの構造は、構成脂肪酸の種類とリン酸の結合位置が腸内細菌型のLPSと異ってはいるものの、特に細胞への結合様式に影響を与えるものとは考えられない。事実、C3H/HeJマウスの脾細胞に対するB-LPSとE-LPSの結合性をフローサイトメーターを用いて比較したところ、同様の結合性を示すことが明らかになった。

This year, we will study the immune bioactivity of LPS. This year, we will do some research on the immune bioactivity of this year. Please do not leave the LPS. The oxalic acid should be removed from the room at 100 ℃ at 2: 00. After that, please draw out the emergency room (3:1). The analytical method is to deoxidize the chemical reaction, the weak temperature is to decompose, the fatty acid is combined to cut off the chemical decomposition, and the whole chemical reaction box is used to comply with the law. This is the first time you need to analyze the Fab-MS. The results showed that the fatty acids in Porphyromonas (Bacteroides) gingivalis lipid A, 3-OHisoC17:0, 3-OHisoC17:0, and iso C15 were isolated from iso C15, 0, 3-OHC16:0. I don't know what to say. I don't know. I don't know. Please tell me that the possibility of the combination of Fab-MS and fatty acids indicates that there is an increase in the number of fatty acids. The LPS was deoxidized and then decomposed in water with weak acid. The combination of 3, 3 'position of Fab-MS and base 3-OHisoC17:0 was equivalent to the temperature of m

项目成果

Kumada H.,Haishima Y.Kondo S.,Uememoto T.,Hisatsune K.,: "Occurrence of 2-Keto-3-Deoxyoctonate(KDO) and KDO phosphate in Lipopolysaccharide of Bacteroides species" Current Microbiology. 26. (1993)

Kumada H.、Haishima Y.Kondo S.、Uememoto T.、Hisatsune K.，：“拟杆菌属脂多糖中 2-Keto-3-Deoxyoctonate (KDO) 和 KDO 磷酸盐的出现”《当代微生物学》。

Kumada H.,Kondo S.,Umemoto T.,Hisatsune K.,: "Chemical structure of the KDO region of lipopolysaccharide isolated from Porphyromonas(Bacteroides) gingivalis" FEMS Microbiology Letters. (1993)

Kumada H.、Kondo S.、Umemoto T.、Hisatsune K.，：“从牙龈卟啉单胞菌（拟杆菌）中分离出的脂多糖 KDO 区域的化学结构”FEMS 微生物学快报。