圧受容器反射脳内機構の解析ー新しい組織化学的手法の応用

压力感受器反射脑机制分析——新组织化学方法的应用

• 批准号: 03671101
• 负责人: 久保 孝夫
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Showa Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03671101/
• 关键词: 圧受容器反射; 孤束核; 延髄腹外側部; グルタミン酸伝達物質; Cーfos発現蛋白質; 免疫組織化学

グルタミン酸伝達物質ならびに、神経シナプス興奮時に多シナプス的に発現される癌遺伝子の1つである、Cーfos発現蛋白質を免疫組織化学的に染色することにより圧受容器反射脳内機構の検討を行った。まず対照実験として、無麻酔ラット腹腔内ホルマリン液適用による疼痛刺激1時間後の脊髄切片において、Cーfos発現蛋白質が脊髄後角内に多数発現していることを認めた。これは即に報告されている結果と一致し、本実験方法の妥当性を証明している。次にラットを麻酔下に左側大動脈神経を電気刺激(50Hz、0.1msec、10分間)したのち1時間後のラット延髄切片を染色し、Cーfos発現蛋白質が弱いながら同側の孤束核に、ごくうすク延髄腹外側部に発現していることを認めた。Cーfos発現蛋白質の過剰によって吸着した後の抗Cーfos発現蛋白質抗体を使用した場合には全ったく染色ニュ-ロンの存在を認めなかった。無処置ラット延髄切片におけるグルタミン酸染色を行い、孤束核ならびに延髄腹外側部にグルタミン酸含有ニュ-ロンが密に存在することを認めた。ついでCーfos発現蛋白質とグルタミン酸の二重染色を試みた。グルタミン酸の染色には、Cーfos発現蛋白質の発色(褐色)と区別するためにジアミノベンチジンのかわりに4ークロロ-ノ-ナフト-ル(青色に発色)を使用した。しかし、この二重染色は現在のところ成功するに至っていない。これは、グルタミン酸とCーfos発現蛋白質の固定条件が異なることならびに、グルタミン酸染色自体のむずかしさに起因しており、さらに検討中である。以上、孤束核ニュ-ロンならびに延髄腹外側部ニュ-ロンがたしかに圧受容器反射に関与していること、両部位にはグルタミン酸ニュ-ロンが密に分布していることを明らかにした。この結果は、先の生理学的実験結果にもとずく推論をニュ-ロンレベルにおいて実証したこととなる。

In this study, the results showed that the expression of protein in immunocytochemistry was detected by immunohisto-chemical staining, the staining of protein was detected by immunohisto-chemical staining, the staining of protein was detected by immunohisto-chemical staining, and the reflection of the container was detected. After stimulation with epidural pain for 1 hour, most of the spinal sections were detected in the posterior corner of the spinal cord, and most of them were found in the posterior corner of the spinal cord after stimulation with epidural pain. In other words, the results of the report are consistent, and the method of this report indicates that it is appropriate. After 50Hz, 0.1msec, 10 minutes, after 1 minute, the whole body was stained and C-fos showed that the weak protein level was the same as that of the solitary tract nucleus, and the abdominal part of the abdomen was scanned after stimulation. Anti-C-fos antibody was detected by C-band fos antibody after absorption. The presence of anti-C-protein antibody was detected by whole-band staining. In this section, the acid staining line, the nucleus of the solitary tract, the extraventral part of the nucleus of the solitary tract, the presence of acid in the abdominal part of the nucleus tractus solitarius, the presence of acid in the abdominal part of the nucleus of the solitary tract and the presence of acid in the outer part of the abdomen. The protein was detected by fos and the acid double staining test was performed. The color of protein (brown) was detected by acid staining and the color of protein (brown) was detected by acid staining. The color of protein (brown) was detected by acid staining and fos. Double staining and double staining is now successful. The protein was immobilized under the conditions of fixation, acid staining, autologous acid staining, autologous acid staining, and so on. The above, the nucleus of the solitary tract, the external part of the abdomen, the reflection of the container and the part of the nucleus tractus solitarius, the nucleus of the solitary tract, the external part of the nucleus of the solitary tract, the part of the nucleus of the solitary tract. The results, the results of physiology, the results of physiology and the results of physiology.