乳歯歯髄幹細胞による延髄孤束核の再生について

乳牙牙髓干细胞再生延髓孤核的探讨

• 批准号: 21659476
• 负责人: 三留 雅人
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659476/
• 关键词: 歯髄; 乳歯; 歯髄幹細胞; 脳・中枢; 移植; 再生医療

間葉系幹細胞である脱落乳歯歯髄幹細胞(stem cells from human exfoliated teeth、SHED)が高率に外胚葉系の神経細胞へと分化転換することを明らかにするとともに、SHEDのマウス中枢神経系への移植法を検討し、移植後のSHEDの分化動態を調べることで、神経再生医療への応用の可能性を検討した。乳歯歯髄から採取したSHEDは、神経誘導培養することによってneurosphere様浮遊細胞塊を形成した。この細胞塊を神経幹細胞マーカーであるNestinの抗体にて蛍光免疫染色したところ、多くの細胞がNestin陽性を示した。また、この細胞塊を血清培地にて分化誘導を行ったところ、ニューロンおよびアストロサイトへの今化を認めた。このことから、脱落乳歯歯髄細胞中に含まれるSHEDが神経幹細胞もしくは神経前駆細胞に分化したことが示唆された。次に、in vitroにおける分化を検討するため、新生仔マウス小脳延髄槽にSHEDを移植した。神経誘導培養したSHEDは移植2週間後、延髄孤束核に生着し、一部がニューロンおよびアストロサイトへと分化した。さらに、脱落乳歯歯髄細胞中に含まれるSHEDを高率に採取するために、MACS【○!R】を用いて、間葉系幹細胞のマーカーであるSTRO-1陽性細胞を選別した。神経誘導培養したSTRO-1陽性SHEDは、in vitroにおいて神経細胞への分化を認めた。中枢神経系に特異的なmRNAを調べると、STRO-1陽性SHEDは神経誘導培養によりNestinの発現が増加した。以上よりSTRO-1陽性SHEDが、神経誘導培養により神経幹細胞または神経前駆細胞へと分化誘導されたことが示唆された。今後は,神経誘導培養したSTRO-1陽性SHEDを延髄孤束核に移植し,分化動態を確認することを検討中である。

Mesenchymal stem cells である exfoliated 歯歯 marrow stem cells (stem cells from human exfoliated Teeth, SHED) が high rate に germ layer department の god 経 cells へ と differentiated planning in す る こ と を Ming ら か に す る と と も に, SHED の マ ウ ス central god 経 department へ の grafting を beg し 検, after transplantation の SHED の differentiation dynamic を adjustable べ る こ と で, god 経 regeneration medical へ の 応 possibility with の を beg し 検 た. Milk 歯 歯 marrow か ら take し た SHED は, god 経 induction training す る こ と に よ っ て neurosphere others block を planktonic cells forming し た. こ の block を god 経 stem cell マ ー カ ー で あ る Nestin の antibody に て 蛍 light immune dyeing し た と こ ろ, multiple く の cells が Nestin positive を shown し た. ま た, こ の cell block を serum petty に induced を line っ て differentiation た と こ ろ, ニ ュ ー ロ ン お よ び ア ス ト ロ サ イ ト へ の today the を recognize め た. こ の こ と か ら, fall off milk 歯 歯 に marrow cells contain ま れ る SHED が god 経 stem cells も し く は before god 経 駆 cells に し た こ と が in stopping さ れ た. に, the in vitro に お け る differentiation を beg す 検 る た め, newborn larvae マ ウ ス small 脳 delay marrow slot に SHED を transplantation し た. God 経 induction training し た SHED は transplantation after 2 weeks, delay marrow nuclear に し were made, and a solitary が ニ ュ ー ロ ン お よ び ア ス ト ロ サ イ ト へ と differentiation し た. さ ら に, fall off milk 歯 歯 に marrow cells contain ま れ る SHED を high rate に take す る た め に, MACS を "! R 】 【 い て, mesenchymal stem cells の マ ー カ ー で あ る STRO を choose 1 positive cells don't し た. Neuro-induced culture of <s:1> た tro-1 positive SHED にお, in vitroにお て て neuro-induced cells へ <s:1> differentiation を recognition めた. Central nervous system に specific なmRNAを regulation べると, ros-1 positive SHED <s:1> nervous induction culture によ <s:1> Nestin <s:1> showed が increased た. Positive SHED more than よ り STRO - 1 が, god 経 induction training に よ り god 経 stem cells ま た は 駆 cells before god 経 へ と induction さ れ た こ と が in stopping さ れ た. Future は, god 経 induction training し た STRO - 1 positive SHED を delay marrow solitary nucleus し に transplantation, differentiation dynamic を confirm す る こ と を 検 beg in で あ る.