乳歯歯髄幹細胞による延髄孤束核の再生について

乳牙牙髓干细胞再生延髓孤核的探讨

• 批准号: 21659476
• 负责人: 三留 雅人
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659476/
• 关键词: 歯髄; 乳歯; 歯髄幹細胞; 脳・中枢; 移植; 再生医療

間葉系幹細胞である脱落乳歯歯髄幹細胞(stem cells from human exfoliated teeth、SHED)が高率に外胚葉系の神経細胞へと分化転換することを明らかにするとともに、SHEDのマウス中枢神経系への移植法を検討し、移植後のSHEDの分化動態を調べることで、神経再生医療への応用の可能性を検討した。乳歯歯髄から採取したSHEDは、神経誘導培養することによってneurosphere様浮遊細胞塊を形成した。この細胞塊を神経幹細胞マーカーであるNestinの抗体にて蛍光免疫染色したところ、多くの細胞がNestin陽性を示した。また、この細胞塊を血清培地にて分化誘導を行ったところ、ニューロンおよびアストロサイトへの今化を認めた。このことから、脱落乳歯歯髄細胞中に含まれるSHEDが神経幹細胞もしくは神経前駆細胞に分化したことが示唆された。次に、in vitroにおける分化を検討するため、新生仔マウス小脳延髄槽にSHEDを移植した。神経誘導培養したSHEDは移植2週間後、延髄孤束核に生着し、一部がニューロンおよびアストロサイトへと分化した。さらに、脱落乳歯歯髄細胞中に含まれるSHEDを高率に採取するために、MACS【○!R】を用いて、間葉系幹細胞のマーカーであるSTRO-1陽性細胞を選別した。神経誘導培養したSTRO-1陽性SHEDは、in vitroにおいて神経細胞への分化を認めた。中枢神経系に特異的なmRNAを調べると、STRO-1陽性SHEDは神経誘導培養によりNestinの発現が増加した。以上よりSTRO-1陽性SHEDが、神経誘導培養により神経幹細胞または神経前駆細胞へと分化誘導されたことが示唆された。今後は,神経誘導培養したSTRO-1陽性SHEDを延髄孤束核に移植し,分化動態を確認することを検討中である。

The high rate of ectoderm cells (stem cells from human exfoliated teeth, SHED) exfoliated milk cells (Epidermal growth Factor), differentiation, differentiation, differentiation and differentiation after transplantation. The SHED is collected from the milk, and the god is instructed to make sure that the neurosphere floats are formed. The Nestin antibody was detected by light immunostaining, and the Nestin was detected by polyclonal antibody. Cell culture, serum culture, differentiation and differentiation were used to make sure that the cells were divided into two groups. In the cells of exfoliated milk and exfoliated milk, there is a sign of instigation in the cell that contains the SHED, the cell, the cell. Secondary, in vitro, differentiation, newborn baby, small delay slot, SHED transplantation. After 2 years of SHED transplantation, the nucleus of the solitary tract was born, and a movie was produced. The concentration of SHED in the cells of the exfoliated milk and the exfoliated milk was higher than that of the control group. The cells of the exfoliated and exfoliated milk were selected for the first time, the cells of the MACS [0R] were used, and the cells of the cells were selected for the first time. God leads to the cultivation of STRO-1 sexual SHED, and the differentiation of the cells of in vitro cells. The central god is the special mRNA, the STRO-1, the sexual SHED, the god, the Nestin, the baby, the baby. The above methods of STRO-1 sexual SHED and divine guidance indicate the instigation of the cell differentiation and differentiation of the cell. In the future, God will guide the development of STRO-1 sexual SHED to postpone the transplantation of nucleus tractus solitarius, and to make sure that the disease is in progress.