鶏大腸菌症由来大腸菌の病原因子に関する研究

禽大肠杆菌病致病菌的研究

• 批准号: 05760234
• 负责人: 池 和憲
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kitasato Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760234/
• 关键词: Aerobactin; Chicken; Escherichia coli; Plasmid; Serum resistance; Virulence factor

私共は、鶏大腸菌症由来大腸菌に関し、血清型O2およびO78、またType 1もしくはFmsha線毛を保有するものが多い事、ならびにその病原因子としてはAerobactin系鉄取り込み能および血清抵抗性が重要である事を既に報告した。また野外で最も多く検出される血清型O2に属する分離株には100メガダルトン(Mdal)プラスミドが多く検出され、本プラスミドがAerobactin系鉄取り込み能および血清抵抗性をコードしている事も報告した。そこで平成5年度にはさらに以下の研究を行ったので報告する。1.鶏大腸菌症由来大腸菌S-20株(O2:K^+:NM:Fmsha^+)に存在する100Mdalプラスミドについてその制限酵素地図(BamHI)の作成を試みた。制限酵素地図は100Mdalプラスミドを制限酵素BamHIおよびSau3AIで部分消化後、コスミド(pHC79)との組換え体を作成し、その解析により行った。100MdalプラスミドのBamHI切断フラグメントの配列はB1(42kb)-B11(2.4kb)-B2(35kb)-B10(3.2kb)-B16(0.6kb)-B5(7.9kb)-B9(3.5kb)-B7(6.4kb)-B4(8.3kb)-B17(0.4kb)-B6(6.8kb)-B13(1.3kb)-B3(22kb)-B8(4.4kb)-B14(0.9kb)-B15(0.7kb)-B12(2.2kb)-B1(計17断片;約148kb)の順であった。種々のBamHI断片を含む組換え体の解析によりAerobactin系鉄取り込み能はB4-B17-B6-B13の断片内に、また血清抵抗性はB2の断片内にコードされている事が明らかとなった。2.B4-B17-B6-B13の断片を有するプラスミドをHindIIIで消化後、プラスミドベクター(pACYC184)でクローニングを試み、Aerobactin系鉄取り込み能の遺伝子を約15kb断片内にクローニングすることができた。3.B2の断片を有するプラスミドをBamHIおよびClaIで消化後、プラスミドベクター(pBR322およびpBluescriptIISK^+)にクローニングを試み、約3kb断片内に血清抵抗性遺伝子をクローニングすることができた。

The results showed that there were many factors related to the origin of coliform, serotype O2 and O78, Type 1 and Fmsha hair, and many pathogenic factors related to Aerobactin. In the wild, most isolates of serotype O2 were detected in the 100-cell (Mdal) population, and most of them were detected in the Aerobactin family. The following research reports were published in 2005: 1. The production of BamHI, a restriction enzyme, was tested in the presence of Escherichia coli strain S-20 (O2:K^+:NM:Fmsha^+), the source of coliform. After partial digestion of the restriction enzyme BamHI and Sau3AI, the protein (pHC79) and the protein were prepared and analyzed. 100Mdal file format: BamHI cut format: B1(42kb)-B11 (2.4kb)-B2(35kb)-B10 (3.2kb)-B16 (0.6kb)-B5 (7.9 kb)-B9 (3.5 kb)-B7(6.4 kb)-B4(8.3 kb)-B17(0.4 kb)-B6(6.8 kb)-B13(1.3 kb)-B3(22kb)-B8(4.4 kb)-B14(0.9 kb)-B15(0.7 kb)-B12(2.2 kb)-B1(17 fragments; about 148kb). The analysis of the BamHI fragment containing the fragment of Aerobactin showed that it could be detected in the fragment of B4-B17-B6-B13, and that it could be detected in the fragment of B2. 2. The fragment B4-B17-B6-B13 was digested in HindIII, and the fragment pACYC184 was digested in HindIII. Aerobactin was extracted from the fragment. 3. The B2 fragment contains a sequence of BamHI and ClaI fragments. After digestion, the sequence of BamHI and ClaI fragments (pBR322 and pBluescriptIISK^+) is detected. The serological resistance gene is detected within the 3kb fragment.