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血液細胞・生殖細胞に発現する新しいセリン・スレオニンキナーゼLDI分子の機能

血细胞和生殖细胞中表达的新丝氨酸/苏氨酸激酶 LDI 分子的功能

基本信息

批准号：
05770231
负责人：
國貞隆弘
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

新たに単離されたセリン・スレオニンキナーゼLD1はショウジョウバエの細胞周期調節因子と予想されるpolo遺伝子産物のホモローグであることを見いだした。最初血液細胞株からクローン化されたこの遺伝子は胎仔期にはすべての組織で発現され、成熟するにつれ分裂している細胞の多い血液組織や精巣にその発現が限局されるようになる。さらに線維芽細胞ではその発現はS-G2期で最大になり、低血清下で増殖を抑制されたG0期の細胞では発現が全く見られないことがわかり、高等動物でも細胞周期調節因子として働く可能性を示した。続いて、LD1の組み替えタンパクを大腸菌で作成することを試みた。全長の発現にはいくつかの発現システムについて検討したが成功せず、カルボキシル側の、他のキナーゼとのホモロジーがない部分について組み替えタンパクを得、これを用いて抗LDlポリクロナール抗体を兎で、モノクローナル抗体をラットで作成した。いずれもウエスタンブロッテイングでcDNAの構造から予想されるサイズに対応するタンパクとハイブリダイズし、両者で免疫染色したところ培養細胞、正常組織ともに中心体が強く染まった。以上のことから、LD1遺伝子産物は主に中心体に局在することが示された。また、LD1mRNAが全く検出されない成熟固体でも中心体は増殖している細胞と同程度に染色されることから、このタンパクの寿命が非常に長いことが予想される。われわれが抗体をもちいて研究を進めていたとき、cDNAの構造についてはplk(polo like kinase)として外国のグループにより報告された。現在、生物学的にはより重要である抗体を用いた結果を中心にして投稿準備中である。

The new cell cycle regulator, LD1, is expected to be a polo gene product. The initial blood cell lines are transformed into embryos, and the development of embryonic tissues and mature cells is limited in many blood tissues and sperm. The expression of cell cycle regulators in S-G2 phase was inhibited by low serum levels, and the expression of cell cycle regulators in G0 phase was inhibited by low serum levels. In addition, the LD1 group was prepared by using Escherichia coli. The full-length discovery of LDL is a successful discovery, and a successful discovery of LDL antibodies. The structure of the cDNA was changed to that of cultured cells and normal tissues. The above mentioned LD1 gene products are mainly centroids. The LD1 mRNA is completely expressed in mature solids, centrosome is propagated in cells, and the life span of cells is very long. The study of antibody and cDNA structure is reported in this paper. Now, biology is important. Antibody is used. Results are prepared.