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中心体に局在するセリン・スレオニンキナーゼLD1分子の機能

中心体定位丝氨酸/苏氨酸激酶 LD1 分子的功能

基本信息

批准号：
06680682
负责人：
國貞隆弘
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞分裂の調節に関与するタンパク質リン酸化酵素の遺伝子を探索し新しいセリンスレオニンキナーゼLD1のcDNAを得た。まず、この遺伝子産物がセリン・スレオニンキナーゼであるあことをin vitro translation法、免疫沈降法により得られた産物のヒストンリン酸化能により確認した。昨年度の本研究で作成した抗LD1モノクローナル抗体を用いて免疫組織染色の条件を検討し、LD1は細胞質と中心体に局在すること、特に細胞質ではチューブリンに似た繊維状の分布を示した。さらに、キナーゼドメイン以外の配列の重要性を調べるため挿入突然変異を導入したところ、N末の構造がキナーゼの活性に重要であることが示唆された。LD1は我々が独自にクローン化し一連の解析を進めてきた分子であるが全く同じ遺伝子をクローニングしたとの報告が海外の3グループからあいついだ。我々は信頼性のある複数の抗体、細胞内の局在に関する慎重な検討、精製した酵素標品によるキナーゼ活性の確認をめざしていたので残念ながら発見の第一報を掲載する機会は失った。しかしながら活性を保持したリコンビナントLD1の精製、細胞内局在性という点でこの分子の機能の解析では一歩進んだ成果を上げていると考えており、近く成果の一部を出版する予定である。

The regulation of cell division is related to the discovery of the new cDNA of LD1 in the regulation of cell division. In vitro Translation method and immunoprecipitation method can be used to confirm the acidification of the product. In this study last year, the anti-LD1 モノクローナル antibody was produced and the conditions for immunohistostaining were used and the L D1's cytoplasm and centrosome are localized and the specific cytoplasm and centrosome are distributed in a dimensional-like manner.さらに、キナーゼドメインのalignmentの Importanceを Adjustmentべるためinsert sudden changeをguide Enter the structure of the N end and the activity of the N end is important. LD1 は我々が一　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ifies 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　since deduce by the LD1 Same as じ缝子をクローニングしたとのreportがOverseasの3グループからあいついだ. I believe in the complex nature of the antibody, the intracellular localization in the body, the careful discussion, and the refined enzyme standard product.るキナーゼACTIVITY のCONFIRMATION をめざしていたので稟ながら発见のFirst report を掲 contained するOpportunity はった.しかしながらActivity をKeep したリコンビナントLD1 のRefined, intracellular localization というPoint でこのmolecule machine The results of the analysis can be determined step by step, and the results can be published in detail.