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未成熟染色体凝集法を用いたヒト悪性腫瘍の放射線感受性予測法の研究

未成熟染色体聚集法对人类恶性肿瘤放射敏感性预测方法的研究

基本信息

批准号：
05770682
负责人：
笹井啓資
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770682/
关键词：
未成熟染色体凝集蛍光in situ hybridization 放射線感受性予測法

项目摘要

おもにin vitroで本法の有用性を検討した。使用した細胞は、正常ヒト線維芽球細胞AG1522およびN3、Ataxia Telangiectasia 患者由来ヒト線維芽細胞AT5BIおよびAT2052、ヒト悪性黒色腫細胞Melanoma903、ヒト線維肉腫細胞HT1080の放射線感受性の異なる6種の細胞である。これらの細胞とM期Hela細胞を細胞融合させ未成熟染色体凝集を誘導した。ヒト第4染色体に特異的なDNAプローブを用い蛍光in situ hybridizationを行い、ヒト第4染色体のみがfluoresceinによる黄色の蛍光を発し、他の染色体はpropidium iodideにより赤色の蛍光を発するよう二重染色し、容易に第4染色体異常が観察可能となった。まず、放射線照射後24時間後の細胞を用いて、それぞれの細胞の放射線感受性をコロニー法にて求めた。次に、それぞれの細胞系の放射線照射直後の第4染色体切片数と放射線線量との関係を求めた。放射線照射直後の第4染色体異常の頻度は、照射線量に比例し、同一の照射線量では放射線感受性の異なる細胞でも等しかった。一方、放射線照射24時間後の第4染色体切片数と放射線線量との関係を求めると、それぞれの細胞系で、染色体切片数は放射線照射直後に比較して減少し、さらに染色体切片数は放射線線量の増加にともない増加した。同一の放射線線量では、放射線感受性の高い細胞ほど第4染色体切片数が多かった。また、細胞の放射線感受性と無関係に、放射線照射24時間後の第4染色体切片数から細胞生存率が推定できた。手術組織を用いた研究は、現在進行中で、症例数が少なく結論はでていない。今後、症例を増やし本法の臨床応用への可能性を検討し、放射線感受性予測法としての確立をめざす。

The usefulness of this method is discussed in vitro. The use of cells, normal cells AG1522 N3, Ataxia Telangiectasia patient origin cells AT5 BI AT2052, black cells Melanoma903, HT1080 cells and radiation sensitivity of different 6 kinds of cells. Hela cells in M phase were fused and immature chromosomes were induced. Chromosome 4 specific DNA fragments were detected by situ hybridization, chromosome 4 fluorescence was detected by yellow fluorescence, chromosome 4 fluorescence was detected by red fluorescence, and chromosome 4 abnormality was detected by double staining. The radiosensitivity of the cells was determined by the radiosensitivity method 24 hours after irradiation. The relationship between the number of chromosome 4 sections and the amount of radiation was determined after radiation exposure of the cell lines. The frequency of chromosome 4 abnormalities after radiation exposure was proportional to the dose of radiation, and the frequency of radiosensitive cells was proportional to the dose of radiation. The relationship between the number of chromosome sections and the radiation dose after 24 hours of radiation exposure was calculated. The number of chromosome sections decreased after 24 hours of radiation exposure, and the radiation dose increased after 24 hours of radiation exposure. The number of cells with high radiation sensitivity and chromosome 4 sections of the same radiation dose increased significantly. The number of chromosome 4 sections after 24 hours of radiation exposure was estimated. The surgical tissue is used in the study, and the number of cases is small. The clinical application of this method will be discussed in the future, and the radiosensitivity prediction method will be established.