トポイソメラーゼI阻害剤による放射線効果増強のメカニズムに関する研究

拓扑异构酶I抑制剂增强放疗效果的机制研究

• 批准号: 08671021
• 负责人: 笹井 啓資
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08671021/
• 关键词: p53; トポイソメラーゼI阻害剤; CPT-11; SN-38; コメットアッセイ

細胞におけるP53ステ-タスの放射線とトポイソメラーゼI阻害剤CPT-11の活性代謝産物SN-38との併用効果に対する影響について検討した。細胞はp53ノックアウトマウス由来線維芽細胞およびこれにwild type p53導入した細胞を用いた。対数増殖期の細胞を200nMのSN-38に照射前30分、照射中および照射後2時間暴露し、その後コロニー法で生存細胞数を求め、薬剤溶解液(DMSO)のみを暴露したものと比較検討した。p53ノックアウトマウス由来の線維芽細胞ではSN38および放射線の併用効果はわずかしか認められなかったが、wild type p53を導入した細胞では著明な併用効果が認められ、p53のステ-タスが併用効果に影響することが分かった。次にComet Assay法を用いて個々の細胞のDNA障害の程度を求めた。放射線照射後の上記の細胞をアガロースゲル内に包埋後細胞を溶解し電気泳動した。障害を受けたDNAが泳動され、一方未障害のDNAは泳動されないためDNAを蛍光色素で発色させるとあたかも彗星のような形態が個々の細胞に対応して観察された。SN38と放射線の併用症例では彗星の尾部モーメントが明らかに増大し、DNAの障害が増加していることが明らかになった。これは、微小核形成試験を用いて得られた染色体レベルの障害の増加を支持するデータである。動物実験は、昨年度の研究でin vitro試験でCPT-11と放射線の併用効果が僅かに認められたマウス可植EMT6腫瘍を用いin vivo-in vitroコロニー形成試験を用いて行った。しかし、1回投与(40mg/kg)1回照射(10-20Gy)、および3回投与(40mg/kg X 3回)3回照射(6Gy X 3回)いずれの場合にも明らかな併用効果が認められなかった。結論 1)SN-38による放射線増感効果はwild type p53を有する細胞で認められるが、wild type p53を有さない細胞では僅かであった。2)SN38の放射線増感効果はDNAの障害の増加が原因と考えられた。

Study on the effect of combination of P53-S and SN-38, the active metabolite of CPT-11, on the radiation and metabolism of cells Cell p53 is introduced into the cell from the line. The number of viable cells was calculated by the method of cell proliferation at 200nM SN-38 for 30 minutes before irradiation, during irradiation and 2 hours after irradiation, and the number of viable cells was calculated by the method of solvent dissolution (DMSO) and exposure. p53 is introduced into the cells of the line-derived cell, SN38 is introduced into the cells of the wild type, and the effects of the combination of SN 38 and radiation are observed. The Comet Assay was used to determine the extent of DNA damage in each cell. After radiation exposure, the cells in the upper part of the body were dissolved and the cells in the lower part of the body were dissolved. The DNA of the victim was found to be moving, and the DNA of the victim was found to be moving. SN38 and radiation combined symptoms: comet tail increased, DNA damage increased This is the first time that we've seen this. In animal studies, CPT-11 and radiation were used in vivo in vitro in vivo. In the case of 1 dose and (40mg/kg)1 dose (10-20Gy), 3 doses and (40mg/kg X 3 doses)3 doses (6Gy X 3 doses), the effect of the combination is recognized. Conclusion 1)SN-38 is sensitive to radiation and has wild type p53. 2)SN38's radiation sensitivity increased due to DNA damage.

项目成果

Oya,N.Nagata,Y.et al.: "FDG-PET evaluation of therapeutic effects on VX2 liver tumor" J.Nucl.Med.37(2). 296-302 (1996)

Oya，N.Nagata，Y.et al.：“FDG-PET 评价 VX2 肝肿瘤的治疗效果”J.Nucl.Med.37(2)。

Sasai,K et al.: "Non-Hodgkin's lynphome of the thyroid A clinical study of twenty-two case" Acta Oncol. 35(4). 457-412 (1996)

Sasai,K 等人：“甲状腺非霍奇金淋巴瘤二十二例临床研究”Acta Oncol。

Shibata,T.,Shibamoto,Y.,Sasai K,et al.: "Comparison of in vivo efficacy of hypoxic cytotoxin trvapazamine and hypoic cell radiosensitizer KU-2285 in Combination with Single and tractionated irradiation" Jpn.J.Cancer.Res.87(1). 98-104 (1996)

Shibata,T.,Shibamoto,Y.,Sasai K,et al.：“低氧细胞毒素曲帕扎明和低氧细胞放射增敏剂 KU-2285 联合单次和牵引照射的体内功效比较”Jpn.J.Cancer.Res。

Murata,R.,Shibamoto,Y.Sasai K.et al.: "Reoxygenation after single irradiation in rodent tumors of differs types and sizos" Int.J.Radiat Oncol.Biol.Phys.34(4). 859-65 (1996)

Murata,R.,Shibamoto,Y.Sasai K.等人：“不同类型和大小的啮齿动物肿瘤单次照射后的再氧合”Int.J.Radiat Oncol.Biol.Phys.34(4)。

Murata,R.,Shibamoto,Y.Sasai K.et al.: "The combined antitumour effect of a new 5.Huorouracil devivatine,BOF.A2,and radiation in vivo" British.J.Cancer. 74(suppl 17). S114-116 (1996)

Murata,R.,Shibamoto,Y.Sasai K.等人：“新型 5.Huorouracil devivatine、BOF.A2 和体内放射的联合抗肿瘤作用”British.J.Cancer。