Development of a Screening System Using Mouse-model for Chemical Modifiers of Radiation Response

使用小鼠模型开发辐射响应化学修饰剂筛选系统

• 批准号: 19K08130
• 负责人: 笹井 啓資
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K08130/
• 关键词: エダラボン; 放射線防護剤; 活性酸素; in vivo-in vitro assay; 細胞増殖試験; グルタチオン; 放射線防護; ラジカル; 小腸陰窩; 放射線感受性; 放射線増感剤; スクリーニングシステム; マウスモデル

Edaravoneの放射線防護効果のin vitroからin vivoまでのアッセイを通して、薬剤による放射線修飾効果測定システムを確立することを目的とし、本年度は情報収集、論文作成に集中した。in vitroでは正常細胞モデルとしてC3Hマウス由来線維芽細胞2種類を用いた。A9(JCRB供与)はコロニー形成能を有し、一方C3H/10T1/2-clone 8（clone 8　JCRB供与）はコロニー形成試験不能であった。腫瘍細胞はC3Hマウス由来SCCVII腫瘍を用いた。A9およびSCCVIIによるコロニー形成試験では0.1mM 4時間暴露後の放射線防護効果は認めなかった。 次にAssayキットを用いた細胞増殖能試験では0.1mM4時間暴露はSCCVII、A9には放射線防護効果は認めないが、clone 8では照射５日目および７日目で防護効果を認めた。また同細胞に対して0.02mM以上で防護効果が認められた。clone 8およびSCCVIIに対するGSH、SOD様活性に対する影響をそれぞれAssayキットを用いて求めた。GSHは同一細胞数ではSCCVII細胞がclone 8に対して有意に活性が高かったが、0.1mM4時間暴露では効果を認めなかった。またSOD様活性でも0.1mM4時間暴露による効果は認めなかった。in vivoではedaravone100 mg/kgを照射30分前に8週齢C3H雌マウスに腹腔内投与した。照射後3.5日で安楽死させた後、空腸を摘出し組織学的変化を評価した。照射後の平均生存陰窩数は投与群0.29 (SE:0.021)とコントロール0.036 (0.035)に対して有意に多かった。Cleaved caspase 3 免疫染色によるアポトーシス細胞評価はで、コントロール6.9% (SE:0.88)に対して投与群1.2% (0.38)と有意に少なかった。

Edaravone の radiological protection services fruit の in vitro か ら in vivo ま で の ア ッ セ イ を tong し て, 薬 tonic に よ る radiation modification sharper determination of fruit シ ス テ ム を establish す る こ と を purpose と し, this year's は intelligence into に 収 set, thesis し た. in vitroで で normal cells モデ と と て てC3H ウス ウス derived from two types of wireous germ cells を used for た た. A9(provided by JCRB) コロニ コロニ formation can を have を, while one side C3H/10T1/2-clone 8 (clone 8, provided by JCRB) コロニ コロニ formation experiment cannot であった. Abscess cells を C3H ウス origin SCCVII abscess を use ウス た. A9 お よ び SCCVII に よ る コ ロ ニ ー formation test で は の after exposure to radiation protection services 0.1 mM 4 time fruit は recognize め な か っ た. Time に Assay キ ッ ト を with い た cells raised colonization can test で は 0.1 mM4 exposure は SCCVII, A9 に は radiological protection services fruit は recognize め な い が, clone 8 で は irradiation 5 orders お よ び 7 orders で protective services fruit を recognize め た. The protective effect of また and に on <s:1> て0.02mM and above で is が recognized められた. Clone 8 お よ び SCCVII に す seaborne る GSH and SOD activity others に す seaborne る influence を そ れ ぞ れ Assay キ ッ ト を with い て o め た. GSH は the same cell number で は が SCCVII cell clone 8 に し seaborne て intentionally に high active が か っ た が, 0.1 mM4 exposure で は unseen fruit を recognize め な か っ た. Youdaoplaceholder0 sod-like activity で また 0.1mM4 time exposure による effect で recognition めな った った. in vivoで で edaravone100 mg/kgを irradiation 30 minutes before に8 weeks 齢C3H female <s:1> ウスに intraperitoneally administered with た た. 3.5 days after irradiation, で after Anraku 's death させた, the histological changes of the jejunum を were extracted を evaluation 価 た た. の average survival after irradiation Yin nest は cast with group of 0.29 (SE: 0.021) と コ ン ト ロ ー ル 0.036 (0.035) に し seaborne て intend に much か っ た. Cleaved caspase 3 immune dyeing に よ る ア ポ ト ー シ ス cell evaluation 価 は で, コ ン ト ロ ー ル 6.9% (SE: 0.88) に し seaborne て cast with the group of 1.2% (0.38) less と intentionally に な か っ た.