単一細胞ゲル電気泳動法による悪性脳腫瘍の科学療法剤及び、放射線感受性試験の開発

恶性脑肿瘤化学治疗剂的开发及单细胞凝胶电泳放射敏感性测试

基本信息

批准号：
05771017
负责人：
原明
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至 1994
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771017/
关键词：
DNA damage DNA repair single cell gel electrophoresis ghoma 放射線感受性試験

项目摘要

悪性gliomaの放射線感受性を知るため、放射線による個々の細胞のDNA damageを電気泳動し蛍光顕微鏡で定量する方法(SCG法)をヒトglioma細胞に対して行い治療効果との相関を検討した。対象;肉眼的全摘出手術が行われた10例の悪性glioma(G3-G4:21-74歳の男8例女2例)の手術摘出標本を初代培養した。方法;(1)glima初代培養細胞をtrypsin処理し、irradiationの後、細胞をlow melting agarose gelに浮遊させslide glassの上で固化。アルカリ処理の後、25V、20min.電気泳動を行いethidium bromideにて発色し、蛍光顕微鏡にて核外にDNAが泳動された細胞をDNAdamage陽性とし、その数を計測した。(2)DNA repairを知るために、irradiation後37℃にて2時間incubation後、同様にSCG法を行った。(3)さらに放射線照射終了から腫瘍再発までの期間をfollpw upし、SCG法によるDNA damage陽性率と腫瘍再発との相関を検討した。結果;(1)6Gy照射直後のSCG法では、すべての症例で80%以上の細胞がDNA damage陽性であった。(2)6Gy照射後37℃にて2時間incubation後のSCG法ではDNA damage陽性率が10.5%-37.2%であった。(3)37℃にて2時間incubation後のSCG法でDNA damage陽性率が14.5%以下の3例は全例3カ月以内に局所再発が認められたが、17.3%以上の7例は6カ月以上再発が認められなかった。結論;SCG法はgliomaの放射線感受性の予測およびDNA damageの程度を知る上で有用であると考えられた。

为了找出恶性神经胶质瘤的辐射敏感性，我们通过辐射使用辐射和使用荧光显微镜（SCG方法）对人神经胶质瘤细胞进行量化的DNA损伤的电泳方法来研究与治疗效应的相关性。受试者：10种恶性神经胶质瘤（G3-G4：21-74岁的男性和2名妇女）接受了全部全部清除手术的培养。方法：（1）对Glima原代培养的细胞进行尝试，并在辐照后，将细胞悬浮在低熔融琼脂糖凝胶中，并在玻璃玻璃上固化。碱性处理后，将细胞在20分钟时在25V下电泳。使用溴化乙锭进行颜色发育，并使用荧光显微镜在核外运行DNA，以确定DNADAMAGE阳性数量的细胞。（2）要知道DNA修复，在37℃下孵育2小时，然后以相同的方式进行SCG方法。（3）此外，从辐射结束到肿瘤复发的周期通过FOLLPW增加，并且通过SCG方法检查了DNA损伤阳性率与肿瘤复发之间的相关性。结果：（1）在6GY辐射后立即使用SCG方法，在所有情况下，超过80％的细胞为DNA损伤呈阳性。（2）在37°C下在6gy辐照2小时后的SCG方法，DNA损伤阳性速率为10.5％-37.2％。（3）在37°C孵育2小时后的SCG方法中，在所有病例的3个月内，在3例DNA损伤阳性率为14.5％或更少的情况下观察到局部复发，但在7例17.3％或以上的病例中，没有观察到6个月以上的复发。结论：SCG方法被认为可用于预测神经胶质瘤辐射敏感性和了解DNA损伤程度。