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単一細胞ゲル電気泳動法による悪性脳腫瘍の科学療法剤及び、放射線感受性試験の開発

恶性脑肿瘤化学治疗剂的开发及单细胞凝胶电泳放射敏感性测试

基本信息

批准号：
05771017
负责人：
原明
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至 1994
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771017/
关键词：
DNA damage DNA repair single cell gel electrophoresis ghoma 放射線感受性試験

项目摘要

悪性gliomaの放射線感受性を知るため、放射線による個々の細胞のDNA damageを電気泳動し蛍光顕微鏡で定量する方法(SCG法)をヒトglioma細胞に対して行い治療効果との相関を検討した。対象;肉眼的全摘出手術が行われた10例の悪性glioma(G3-G4:21-74歳の男8例女2例)の手術摘出標本を初代培養した。方法;(1)glima初代培養細胞をtrypsin処理し、irradiationの後、細胞をlow melting agarose gelに浮遊させslide glassの上で固化。アルカリ処理の後、25V、20min.電気泳動を行いethidium bromideにて発色し、蛍光顕微鏡にて核外にDNAが泳動された細胞をDNAdamage陽性とし、その数を計測した。(2)DNA repairを知るために、irradiation後37℃にて2時間incubation後、同様にSCG法を行った。(3)さらに放射線照射終了から腫瘍再発までの期間をfollpw upし、SCG法によるDNA damage陽性率と腫瘍再発との相関を検討した。結果;(1)6Gy照射直後のSCG法では、すべての症例で80%以上の細胞がDNA damage陽性であった。(2)6Gy照射後37℃にて2時間incubation後のSCG法ではDNA damage陽性率が10.5%-37.2%であった。(3)37℃にて2時間incubation後のSCG法でDNA damage陽性率が14.5%以下の3例は全例3カ月以内に局所再発が認められたが、17.3%以上の7例は6カ月以上再発が認められなかった。結論;SCG法はgliomaの放射線感受性の予測およびDNA damageの程度を知る上で有用であると考えられた。

To investigate the relationship between the radiosensitivity of glioma and the effect of radiation therapy on glioma cells, DNA damage, electromigration and microscopical quantification (SCG method). 10 cases of malignant glioma(G3-G4: 8 males and 2 females aged 21-74 years) were surgically extracted. Methods: (1)Glima primary culture cells were treated with trypsin, irradiated, and then solidified on slide glass by low melting agar gel. After the treatment, 25V, 20 min., the number of ethidiumbromide positive cells and DNA damage positive cells was measured by electron microscopy. (2)DNA repair is performed at 37℃ for 2 hours after incubation and at the same time by SCG method. (3)The correlation between DNA damage positive rate and tumor recurrence was studied by SCG method. Results: (1) More than 80% of the cells were DNA damage positive by SCG after 6Gy irradiation. (2) The positive rate of DNA damage was 10.5%-37.2% by SCG method after incubation at 37℃ for 2 hours after 6Gy irradiation. (3)37 The positive rate of DNA damage by SCG method after incubation at 2 ℃ was less than 14.5% in 3 cases, more than 17.3% in 7 cases and more than 6 months in 3 cases. Conclusion: SCG method is useful for predicting the radiation sensitivity of glioma and DNA damage.