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植物の細胞内シグナル伝達系の遺伝子の分離と解析

植物细胞内信号转导系统基因的分离与分析

基本信息

批准号：
05780527
负责人：
宇佐美昭二
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

動物細胞や酵母における研究から、プロテインキナーゼC(PKC)などのリン酸化酵素によるリン酸化カスケイドが、細胞内シグナル伝達系を形成していること、このリン酸化カスケイドに関わる各々のリン酸化酵素が種々の生物種においてよく保存されていることが明らかにされている。我々は植物細胞においても類似したシグナル伝達系の存在を予想し、対応するリン酸化酵素遺伝子をクローニングすることを行ってきた。本年度は遺伝子クローニングのために、すでに出芽酵母において明らかにされているシグナル伝達系の種々の変異株を用い、その変異を機能的に相補する遺伝子をタバコ培養細胞のcDNAライブラリーから分離することを行った。その結果、十数種類の候補となるcDNAクローンを分離した。塩基配列を決定し、そこから予想されるアミノ酸配列を調べたところ、リン酸化酵素をコードしていると考えられるcDNAクローンは得られなかった。予想されたアミノ酸配列をもとにデーターベースによるホモロジーサーチを行ったところ、既知の遺伝子とホモロジーを示すものはなかったが、RNA結合活性示すドメインを含むもの、塩基性領域とジンクフィンガードメインと思われる領域を含むb-ZIP型の転写制御因子と考えられる遺伝子が分離されていることが明らかになった。これらの遺伝子産物が、実際に植物細胞内のシグナル伝達系に関与している可能性については現在のところ不明である。今回のスクリーニングに用いた一連の変異株は、いずれもその変異が不安定であり、変異の相補を見分けるのがかなり困難な株であったために、得られたcDNAクローンが必ずしも異変を相補しているとは言い難いものがあった。今後、別の変異株を用いることにより期待するリン酸化酵素遺伝子が分離できる可能性が残されている。

Research on animal cell yeast and yeast, PKC (PKC)どのリン acidifying enzyme によるリン acidifying カスケイドが, intracellular シグナル伝Da system Formation of していること, このリン acidifying enzymesがkind々のbiotic kindにおいてよくsaveされていることが明らかにされている. My plant cells are similar to the ones that exist in the plant cells, and I think about them.対応するリンacidifying enzyme 缝子をクローニングすることを行ってきた. This year's は弝子クローニングのために、すでにBudding yeastにおいて明らかにされているシグナル伝大线の species 々の変different strains The cDNA is isolated from the cultured cells using the complementary function of the different functions of the cDNA. As a result, more than ten types of candidates have been isolated from cDNA. The base arrangement is determined, the acid arrangement is determined, the acid arrangement is adjusted, and the リンAcidifying enzyme をコードしていると卡えられるcDNAクローンは得られなかった. I want to use acid to match the ingredients.ころ、Known の缝子とホモロジーを时すものはなかったが、RNA binding activity indicated すドメとジンクフィンガードメインと思われる Domain を containむb- ZIP type の転writes the control factor と考えられる伝子が出されていることが明らかになった. The relationship between the これらの缝子product and the のシグナル伝da in the plant cell and the possibility of しているについては are currently unknown. This time the のスクリーニングに uses いた一连の変different strains は, いずれもThe difference between the two is unstable It's difficult to get the best cDNA It must be different and complementary to each other. From now on, we are looking forward to the possibility of separating the acidifying enzyme from different strains and using it separately.