アクチビンレセプターによるシグナル伝達機構の解析

激活素受体信号转导机制分析

• 批准号: 05780547
• 负责人: 村松 正明
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05780547/
• 关键词: アクチビン; TGF-beta; プロティンキナーゼ; レセプター; 胚幹細胞

近年アクチビンレセプター(ActRII)、TGFbetaレセプター(TGFbetaRII)がクローン化され、受容体型セリン-スレオニンキナーゼ(RSK)であることが明らかになった。このようにTGFbetaリガンドスーパーファミリーの機能的レセプターはRSKであることが明らかになりつつある。我々は新規のRSKを単離する目的でActRII、TGFbetaRIIのキナーゼ領域間で共通に保存されている配列に対するdegeneratePCRプライマーを合成し、マウス胚幹(ES)細胞にどのようなRSKが発現しているか検討をした。マウスES細胞totalRNAを鋳型としてRT-PCRを行なった結果、すでに報告されているActRIIa,IIb,TGFbetaRII以外に、ESK2,11,20,86の4個の新規のRSKクローンの断片が得られた。ESK2の全翻訳領域を含むcDNAを解析した結果、ESK2はヒトALK5(Miyazono等)のマウスホモログであることが明らかになった。ESK2はTGFbetaRタイプIIの共存化にTGFbetaと結合し、マウスのTGFbetaRタイプIであることが示された。ESK2の細胞外ドメインは4アミノ酸残基が挿入されたタイプ(ESK2)およびこれが欠失しているタイプ(ESK2-2)の二種類のクローンが得られている。ESK2およびESK2-2がスプライシングの違いによるものかどうか、またES分化段階および各組織における発現様式、機能上の相違につき現在検討中である。

Recent ア ク チ ビ ン レ セ プ タ ー (ActRII), TGFbeta レ セ プ タ ー (TGFbetaRII) が ク ロ ー ン change さ れ, let body セ リ ン - ス レ オ ニ ン キ ナ ー ゼ (RSK) で あ る こ と が Ming ら か に な っ た. こ の よ う に TGFbeta リ ガ ン ド ス ー パ ー フ ァ ミ リ ー の functionary レ セ プ タ ー は RSK で あ る こ と が Ming ら か に な り つ つ あ る. I 々 は new rules の RSK を 単 from す る purpose で ActRII, TGFbetaRII の キ ナ ー ゼ areas between common で に save さ れ て い る match column に す seaborne る degeneratePCR プ ラ イ マ ー を synthetic し, マ ウ ス embryonic stem (ES) cells に ど の よ う な RSK が 発 now し て い る か beg を 検 し た. Type マ ウ ス ES cells totalRNA を where と し て rt-pcr を line な っ た results, す で に report さ れ て い る ActRIIa, IIb, TGFbetaRII に, ESK2, 11,20,86 の four の new rules の RSK ク ロ ー ン の が fragment must ら れ た. ESK2 の を full turn 訳 field containing む cDNA を parsing し た results, ESK2 は ヒ ト ALK5 (Miyazono etc) の マ ウ ス ホ モ ロ グ で あ る こ と が Ming ら か に な っ た. ESK2 は TGFbetaR タ イ プ II の coexistence change に TGFbeta と し, マ ウ ス の TGFbetaR タ イ プ I で あ る こ と が shown さ れ た. ESK2 の extracellular ド メ イ ン は 4 ア ミ ノ acid residues が scions into さ れ た タ イ プ (ESK2) お よ び こ れ が owe lost し て い る タ イ プ (ESK2-2) の two kinds の ク ロ ー ン が have ら れ て い る. ESK2 お よ び ESK2-2 が ス プ ラ イ シ ン グ の violations い に よ る も の か ど う か, ま た ES differentiation Duan Jie お よ び organizations に お け る 発 presently others type, functionally の conceives に つ き now beg in 検 で あ る.

项目成果

Muramatsu M.: "Protein kinase and Signal transdaction:Studies with mutant protein kinades" The mechamism and new approach on drng neaistance of concercells Excerpta Medica,Elsevier. 185-192 (1993)

Muramatsu M.：“蛋白质激酶和信号转导：突变蛋白激酶的研究”Concercells 医学摘录的机制和新方法，Elsevier。

Muramatsu M.: "Overexpression of the cutalyticsubunit of cAMP-dependeut protein kinude abrogates cAMP and activated cAMP-dependent gened" Life Science. (in press). (1994)

Muramatsu M.：“cAMP 依赖性蛋白激酶的切割亚基的过度表达会消除 cAMP 并激活 cAMP 依赖性基因”生命科学。

Tomoda T.: "Mutations of ^<170>Glu,a subctrate vecognieion site of the catalytic subinut of cAMP-dependent protein kinase generatl engopncs with altred subsuateuffinity and biologidactisies" Biochem.Biophys.Actu. 1175. 333-342 (1993)

Tomoda T.：“^<170>Glu 的突变，cAMP 依赖性蛋白激酶基因工程的催化亚基点的亚基 vecognieion 位点，具有改变的 subsuateuffinity 和生物活性”Biochem.Biophys.Actu。

Tsuboi A.: "Culcineurin a ctivates transcription from the GMCSF promoter in synergy with protein kinase C or NF-kB/AP-1 in Tcells" Biothem Biophy,Res.Comm.(in press). (1994)

Tsuboi A.：“Culcineurin a 与 T 细胞中的蛋白激酶 C 或 NF-kB/AP-1 协同激活 GMCSF 启动子的转录”Biothem Biophy，Res.Comm.（出版中）。