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プラナリアPOU遺伝子の発現と脳の再生に関する研究

涡虫POU基因表达与脑再生的研究

基本信息

批准号：
05780552
负责人：
織井秀文
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Himeji Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

POUドメインと呼ばれる配列(一次構造)は細胞分化に関わる一群の遺伝子にコードされているタンパク質に見出された共通の構造でありDNAとの結合に関与していると考えられている。近年、このPOUドメイン遺伝子は様々な生物から単離され、そのうちのいくつかのものは神経系の発生・分化に深く関与していることが明らかになってきた。一方、扁形動物プラナリアは、はしご状神経系をもち、進化学的に、中枢神経系の発達したもっとも下等な動物である。しかも、この動物は体のどの部分からでも神経系を含めて完全な個体を再生することができるというユニークな特性をもつ。本研究では、私が昨年度に単離し、全一次構造を決定したDjPOU1(プラナリアPOU遺伝子1)に加えて、新たなPOU遺伝子DjPOU3の単離に成功し、その全一次配列を決定した。さらに、これら2つのPOU遺伝子の発現について調べることを試みた。DjPOU3はアミノ酸600残基からなるタンパク質と推定され、POUドメインは中央からC末端側に見い出された。またPOUドメインのC末端側に連続したアスパラギンの配列がみられた。DNAデータベース中でDjPOU3と類似の遺伝子の検索を行ったところ、つい最近報告されたラットBrn5、マウスEmb、ゼブラフィッシュPOU[C]のPOUドメイン遺伝子と極めて高い類似性を示した。しかし、その類似性はPOUドメインに限定されていた。DjPOU3の発現をノザンブロット法により調べたところDjPOU1に比べ体の前方でのより限定された発現がみられた。このことは発生の時期にもよるがBrn5、Emb、POU[C]がいずれも神経系で発現していることを考えあわせると、DjPOU3もプラナリアの神経系、とりわけ脳でつよく発現していることを示唆している。そこでより詳しく発現領域を調べるためin situハイブリダイゼーション法を試みたが、現在までのところ明確なシグナルは得られていない。(DjPOU1についても同様)そこで遺伝子産物に対する抗体により、発現領域を調べることにした。その第一段階として、PCR法を用いてDjPOU1と3の各々をマルトース結合タンパク質に融合したタンパク質を大腸菌中で大量につくることを試み最近それに成功した。今後は、これらの融合タンパク質に対する抗体を作製し、DjPOU1及び3発現領域を明らかにするとともにプラナリアの脳の再生現象をPOUドメイン遺伝子に発現という点から調べていく予定である。

POU is a group of genes associated with cell differentiation. POU is a group of genes associated with cell differentiation. In recent years, the development and differentiation of the brain system have been deeply related to the development and differentiation of the brain system. A square, flat animal, reverse, reverse, chemical, central nervous system, development of the animal. The animal's body is partially intact, and its nervous system is completely regenerated. In this study, we determined the single-phase and single-phase structure of DjPOU 1 (P1POU gene 1) and the single-phase and single-phase structure of DjPOU 3 (P1POU gene 1). The first two days of the month, the first two days of the month, the second day of the month, the third day of the month, the fourth day of the month, the month, the fourth day of the month. DjPOU3 is composed of 600 residues of amino acid and is putative, and the POU DE MEINING is found from the center to the C-terminal side. The POU is connected to the C-terminal side of the POU. The most recent report of DNA sequence analysis shows that DjPOU 3 and POU 3 have high similarity to each other. The similarity between the two is limited by the POU. DjPOU 3 's development is limited to the front of the DjPOU 1 The period of development of the brain system is determined by Brn 5, Emb, POU [C], DjPOU 3, and the brain system is determined by Brn 5, Emb, POU [C]. In this case, it is necessary to make sure that all the information in the field is correct. (DjPOU1) The protein product is related to the antibody and the discovery domain. The first stage of PCR was successfully used in combination with DjPOU1 and DjPOU3. In the future, the fusion protein will be used to control the antibody production, DjPOU 1 and DjPOU 3 discovery fields.