成人T細胞白血病(ATL)母子感染モデルラットを用いたHTLV-I感染経路の解明

使用成年T细胞白血病（ATL）母婴感染模型大鼠阐明HTLV-I感染途径

• 批准号: 05780634
• 负责人: 大杉 剛生
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05780634/
• 关键词: HTLV-I; Rat; Animal model; PCR; 母子感染; in situ hybridization

1.投与細胞株:投与細胞株の特性を知る目的でSCIDマウスにMT-2細胞を投与したところ腫瘍形成が確認された。HTLV-IトランスフォームヒトT細胞株はSCIDマウスで増殖しないと報告されていたが、HTLV-I感染ヒト新鮮T細胞の5から10倍の細胞数で腫瘍形成が可能であり、この両細胞の特性の差の検討は動物モデル作成上でも重要かもしれない。2.検出系:本研究ではHTLV-Iの移行経路を特定することが主要なテーマであるのでその検出系の確立は重要な意義を持つ。MT-2細胞を試料としてPCR法を検討したところ約100細胞に1コピーのHTLV-Iプロウイルスが存在すると検出可能であり、さらにサザンブロットを併用することにより1000細胞に1コピーまで検出感度を上げることが可能であった。しかし、組織標本中のHTLV-Iの局在を知ることのできるin situ hybridizationのMT-2細胞塗抹標本を試料とした検討では非常に感度が低く今後の検討課題となった。3.ラットモデル:F344ラット4週令メスおよびオス3匹づつに1×10^7個のMT-2細胞を尾静脈より投与した。さらに投与後1ヵ月目に同様にMT-2細胞を投与した。HTLV-Iの抗体価をゼラチン凝集法(富士レビオ社)で測定したところ、MT-2細胞投与前はすべて陰性であり、1回目の投与後1カ月で640倍、2回目の投与後1カ月で2,560倍から10,240倍まで上昇した。さらに血液よりPCR法によってプロウイルスの検出を試みた。MT-2細胞投与前および投与後1ヵ月ではHTLV-I特異的シークエンスは検出されなかったが、2回目投与後1ヵ月でこれらシークエンスが検出され感染が確認された。現在交配中であり、産児を得次第PCR法により移行経路を検討する予定である。

1. Cell line: To identify the characteristics of the cell line, SCID cells were injected into MT-2 cells and the formation of tumor was confirmed. HTLV-I-infected T cell lines are able to proliferate in SCID, and HTLV-I-infected T cells are 5-or 10-fold more numerous than fresh T cells, making tumor formation possible. 2. Detection system: This study is of great significance to the establishment of HTLV-I transition mechanism. MT-2 cells were tested by PCR and the results showed that there was a possibility of using 1 cell of HTLV-I in the test. HTLV-I in tissue hybridization was detected in situ hybridization and MT-2 cell smearing. 3. F344 F344 The MT-2 cells were injected in the same way as the MT-2 cells. HTLV-I antibody levels were measured by agglutination assay (Fuji). MT-2 cells were negative before and 1 month after administration, 640-fold and 2, 560-fold higher than MT-2 cells 1 month after administration. The blood PCR method is used to detect the presence of the virus. MT-2 cells were injected with HTLV-I-specific antibodies one month before and after injection, and then injected with HTLV-I-specific antibodies one month after injection. Now mating, birth order PCR method, migration pathway, pre-determined

项目成果

Ohsugi,T.: "Isolation of acinetobacter calcoaceticus from the gastrointestinal tracts of SCID mice." Laboratory Animals. 27. 226-228 (1993)

Ohsugi,T.：“从 SCID 小鼠胃肠道中分离醋酸钙不动杆菌。”

Ohsugi,T.: "Experimental transmission of HTLV‐I into C3H/HeJ mice" Kurume Medical Journal. 40. 89-91 (1993)

Ohsugi, T.：“HTLV-I 向 C3H/HeJ 小鼠的实验传播”Kurume Medical Journal 40. 89-91 (1993)。

Ohsugi,T.: "Engraftment of HTLV‐I‐transformed human T‐cell line into SCID mice with NK cell function" The Journal of Veterinary Medical Science. (in press).

Ohsugi, T.：“将 HTLV-I 转化的人类 T 细胞系移植到具有 NK 细胞功能的 SCID 小鼠中”《兽医医学科学杂志》（正在出版）。