胎生期ラットにおける前駆破骨細胞の分化に関する研究

胚胎大鼠前体破骨细胞分化的研究

• 批准号: 05857199
• 负责人: 豊澤 悟
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05857199/
• 关键词: 前駆破骨細胞; 炭酸脱水酵素アイソザイムII; 酒石酸耐性酸性ホスファターゼ; 造血の場; 軟骨膜

高度に分化した多核巨細胞である破骨細胞の起源は造血幹細胞、中でも単球-マクロファージ系の前駆細胞に由来すると考えられている。しかし、その分化過程は明かではなく、その前駆細胞は単核細胞であるため、形態学的に同程することが非常に困難である。そこで、前駆破骨細胞のマーカーとして酒石酸耐性酸性ホスファターゼ(TRAP)、炭酸脱水酵素アイソザイムII(CAII)を用いて、胎生期ラットの造血の場(卵黄嚢→肝→脾)と骨原基において、前駆破骨細胞を同定すると共に、これらの酵素が分化のいつの段階(どの造血の場)に発現するかを検討した。なお、単球・マクロファージ・破骨細胞系の共通のマーカーとしてモノクローナル抗体(ED1)がより特異的であることがわかり、個体発生と共に分化する破骨細胞のマーカーとして用いた。また、ラットの炭酸脱水酵素アイソザイムII(CAII)は平成5年度科研費にて得られたモノクローナル抗体にて免疫組織化学的に、TRAPは酵素組織化学的に染色し、上記三種のマーカーで三重染色を行った。その結果、15日目の肝臓にEDI陽性細胞を認めたが、CAIIとTRAPは陰性であった。15日目の骨原器では、軟骨支柱(cartilage core)の周囲の軟骨膜(perichondrium)に血管侵入が見られるが、ED1、CAII、TRAP陽性細胞は見られなかった。16日目の肝臓ではED1陽性細胞がさらに増加したが、これらED1陽性細胞はCAIIとTRAPには陰性を示した。16日目の骨原器には、軟骨膜(perichondrium)の血管周囲にEDI、CAII、TRAP陽性単核細胞が出現し、17日目ではその数の増加が見られた。さらに骨原器内の骨様構造物に接して多核のED1、CAII、TRAP陽性細胞が認められ、これらは破骨細胞であると考えられた。なお、胎生期ラットの造血は脾臓でも行われるが、今回は未検索である。以上から、単球から前駆破骨細胞への分化は、脾臓を除くと、おそらく軟骨膜(perichondrium)内で起こると考えられるがさらに検討中である。

骨细胞的起源是高度分化的多核巨细胞，被认为是源自造血干细胞的，尤其是单核细胞巨噬细胞系统的前体细胞。但是，分化过程尚不清楚，并且由于祖细胞是单核细胞，因此在形态上很难相当。因此，使用耐二酸酸性磷酸酶（TRAP）和碳赤铁酶同工酶II（CAII）作为前体骨细胞的标记，我们确定了血肿的前体破骨细胞的骨质成骨细胞（yolk sac→yolk sac→spleen→liver→liver→liver→liver→liver→liver→liver→liver→liver→liver）。造血部位）。发现单克隆抗体（ED1）更具体地是单核细胞，巨噬细胞和破骨细胞的共同标记，并用作与发作不同的破骨细胞标记。此外，大鼠碳酸酐酶同工酶II（CAII）在1993财年科学技术研究中获得的单克隆抗体对免疫组织化学染色，并且TRAP用上述三种标记物进行免疫组织化学染色，并用上述三种标记染色。结果，在第15天的肝脏中发现了EDI阳性细胞，但CAII和TRAP为阴性。在第15天，在软骨芯周围的peri骨中观察到血管侵袭，但没有发现ED1，CAII或陷阱阳性细胞。第16天的肝脏看到ED1阳性细胞的增加增加，但这些ED1阳性细胞对CAII和TRAP呈阴性。 On day 16, EDI, CAII, and TRAP-positive mononuclear cells appeared around the blood vessels of the perichondrium, and an increase in the number was observed on day 17. Furthermore, multinuclear ED1, CAII, and TRAP-positive cells were found in contact with the osteogenic structure, and these were thought to be osteoclasts.胎儿的造血症也在脾脏中进行，但这一次尚未搜查。从上面可以看出，除了脾脏以外，从单核细胞到前体骨细胞的分化可能会发生在perichondrium中，但正在进行进一步的研究。