胎生期ラットにおける前駆破骨細胞の分化に関する研究

胚胎大鼠前体破骨细胞分化的研究

• 批准号: 05857199
• 负责人: 豊澤 悟
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05857199/
• 关键词: 前駆破骨細胞; 炭酸脱水酵素アイソザイムII; 酒石酸耐性酸性ホスファターゼ; 造血の場; 軟骨膜

高度に分化した多核巨細胞である破骨細胞の起源は造血幹細胞、中でも単球-マクロファージ系の前駆細胞に由来すると考えられている。しかし、その分化過程は明かではなく、その前駆細胞は単核細胞であるため、形態学的に同程することが非常に困難である。そこで、前駆破骨細胞のマーカーとして酒石酸耐性酸性ホスファターゼ(TRAP)、炭酸脱水酵素アイソザイムII(CAII)を用いて、胎生期ラットの造血の場(卵黄嚢→肝→脾)と骨原基において、前駆破骨細胞を同定すると共に、これらの酵素が分化のいつの段階(どの造血の場)に発現するかを検討した。なお、単球・マクロファージ・破骨細胞系の共通のマーカーとしてモノクローナル抗体(ED1)がより特異的であることがわかり、個体発生と共に分化する破骨細胞のマーカーとして用いた。また、ラットの炭酸脱水酵素アイソザイムII(CAII)は平成5年度科研費にて得られたモノクローナル抗体にて免疫組織化学的に、TRAPは酵素組織化学的に染色し、上記三種のマーカーで三重染色を行った。その結果、15日目の肝臓にEDI陽性細胞を認めたが、CAIIとTRAPは陰性であった。15日目の骨原器では、軟骨支柱(cartilage core)の周囲の軟骨膜(perichondrium)に血管侵入が見られるが、ED1、CAII、TRAP陽性細胞は見られなかった。16日目の肝臓ではED1陽性細胞がさらに増加したが、これらED1陽性細胞はCAIIとTRAPには陰性を示した。16日目の骨原器には、軟骨膜(perichondrium)の血管周囲にEDI、CAII、TRAP陽性単核細胞が出現し、17日目ではその数の増加が見られた。さらに骨原器内の骨様構造物に接して多核のED1、CAII、TRAP陽性細胞が認められ、これらは破骨細胞であると考えられた。なお、胎生期ラットの造血は脾臓でも行われるが、今回は未検索である。以上から、単球から前駆破骨細胞への分化は、脾臓を除くと、おそらく軟骨膜(perichondrium)内で起こると考えられるがさらに検討中である。

Highly に differentiation し た multinucleated giant cells で あ る osteoclast の origin は hematopoietic stem cells, the で も 単 ball - マ ク ロ フ ァ ー ジ system before の 駆 cells に origin す る と exam え ら れ て い る. し か し, そ の differentiation は Ming か で は な く, そ の 駆 cells before は 単 nuclear cells で あ る た め, morphological に with cheng す る こ と が very difficult に で あ る. そ こ で, former 駆 osteoclast の マ ー カ ー と し て tartaric acid tolerance of acid ホ ス フ ァ タ ー ゼ (TRAP), carbon acid dehydration enzyme ア イ ソ ザ イ ム II (CAII) を い て, TaiShengQi ラ ッ ト の hematopoietic の field (yolk 嚢 to liver, and spleen) と bone primordium に お い て, former 駆 osteoclast を with fixed す る と に, こ れ ら の enzyme が differentiation の い つ The に stage (<s:1> hematopoietic stage)に occurs する た を検 discusses <s:1> た. な お, 単 ball マ ク ロ フ ァ ー ジ, broken bone cell line の common の マ ー カ ー と し て モ ノ ク ロ ー ナ ル antibodies (ED1) が よ り specific で あ る こ と が わ か り, individuals born 発 と に differentiation す る osteoclast の マ ー カ ー と し て in い た. ま た, ラ ッ ト の carbon acid dehydration enzyme ア イ ソ ザ イ ム II (CAII) は pp.47-53 5 year KeYanFei に て have ら れ た モ ノ ク ロ ー ナ ル antibody に て immunohistochemical に, TRAP は に of enzyme histochemistry staining し, written three の マ ー カ ー で triple line dyeing を っ た. Youdaoplaceholder0 result, 15 days, positive liver にEDI cells を recognize めたが, CAIIとTRAP に negative であった. On the 15th day, the bone marrow is で で, the cartilage core is 囲, the perichondrium is に, vascular invasion is が as seen in られるが, ED1, CAII, and TRAP positive cells are られな as seen in られな られな った. 16 mesh の is crucial liver で は ED1 positive cells が さ ら に raised plus し た が, こ れ ら ED1 positive cells は CAII と TRAP に は negative を shown し た. On the 16th day, the number of 単 nuclear cells positive for 囲にEDI, CAII, and TRAP around the blood vessels of the perichondrium が showed 囲に, and on the 17th day, the number of で そ そ そ <s:1> increased が as seen in られた. さ ら に の bone others installations に answer within bone prototype し て multi-core の ED1, CAII, TRAP positive cells が め ら れ, こ れ ら は osteoclast で あ る と exam え ら れ た. Youdaoplaceholder0, during the fetal period ラット, hematopoiesis ラット, spleen で で, われるが, this time なお did not 検 である. Before the above か ら, 単 ball か ら 駆 osteoclast へ は の differentiation, splenic を except く と, お そ ら く perichondrium (perichondrium) で up こ る と exam え ら れ る が さ ら に 検 beg in で あ る.