胎生期ラットにおける前駆破骨細胞の分化に関する研究

胚胎大鼠前体破骨细胞分化的研究

• 批准号: 06771585
• 负责人: 豊澤 悟
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771585/
• 关键词: 前駆破骨細胞; 炭酸脱水酵素アイソザイムII(CAII); 酒石酸耐性酸性ホスファターゼ(TRAP); ED1; CAIIのRNAプローブ; in situ hybridization; 胎生期造血臓器; 軟骨膜

破骨細胞の起源は造血幹細胞、中でも単球・マクロファージ系の前駆細胞であると考えられているが、その分化過程はいまだ明らかではない。我々は、生体内での分化過程を胎生期ラットの造血の場(卵黄嚢→肝)と軟骨内骨化を起こす長幹骨の骨原基において調べてきた。その結果、単球・マクロファージ系細胞と破骨細胞に共通のマーカーであるED1陽性単核細胞が肝造血期の肝臓に認められたが、成熟破骨細胞の有する炭酸脱水酵素アイソザイムII(CAII)と酒石酸耐性酸性ホスファターゼ(TRAP)に反応を示すものはなかった。一方、骨髄造血の起こる直前の胎生16日の骨原基の軟骨膜(perichondrium)にもED1陽性単核細胞が出現した。これらのED1陽性単核細胞はCAII、TRAPともに陽性を示し、胎生17日ではこれら陽性細胞の一部が軟骨膜を破って肥大軟骨内に侵入し、多核のものも認められた。これより、軟骨膜のED1陽性細胞は前駆破骨細胞と考えられた。平成6年度科研費にてCAIIのcDNAから、RT-PCR法にてRNAプローブを作成し、造血の場(卵黄嚢→肝)と骨原基におけるCAII合成をin situ hybridizationにて調べた。その結果、胎生9-10の卵黄嚢造血細胞、胎生14-17日の肝造血細胞にはCAIImRNAの発現は見られなかったが、胎生16日の骨原基の軟骨膜にCAIImRNA発現の見られる単核細胞を認めた。胎生17日では軟骨膜を破って肥大軟骨内にもCAIImRNA発現細胞を認め、その一部は 多核細胞であった。なお、胎生期ラットの造血は脾臓でも行われるが、現在検討中である。以上から、前駆破骨細胞は、CAIIの合成を軟骨膜の段階で盛んに合成しており、脾臓を除くと軟骨膜が破骨細胞への分化・誘導に重要な造血微細環境(hematopoietic micro-environment)を提供すると考えられるが続けて検討中である。

骨细胞被认为起源于造血干细胞，尤其是单核细胞巨噬细胞系统的干细胞，但其分化过程尚不清楚。我们已经研究了造血部位（蛋黄囊→肝）在胚胎大鼠和长茎骨的骨原发性中的体内分化过程，这会导致内软骨骨化。结果，在肝脏阶段，在肝脏中发现了ED1阳性单核细胞，是单核细胞和巨噬细胞和骨细胞的标记，但均未含有碳酸酐II（CAII）和二酸酸酸磷脂酶（trap）含有含有含量的碳酸盐酶II（CAII）和含有含量的。同时，ED1阳性的单核细胞在胚胎出生的第16天，就在骨髓骨气虫虫素之前的16天。这些ED1阳性的单核细胞均为CAII和TRAP阳性，在胚胎生命的第17天，其中一些阳性细胞穿过骨膜，并入侵了肥大的软骨，还观察到多核细胞。这表明骨膜类似的ED1阳性细胞是前体骨细胞。在1994年的科学技术研究中，使用RT-PCR方法从CAII cDNA制备了RNA探针，并通过原位杂交研究了造血部位（蛋黄囊→肝脏）中的CAII合成（蛋黄囊→肝脏）和骨骼原始。结果，在胚胎生命的造血细胞的体内9-10中的蛋黄囊的造血细胞中未观察到CAII mRNA的表达，但骨基源性16天的骨骨骨膜骨膜骨膜细胞在骨骼生物上的骨膜骨膜骨膜骨膜上的骨膜骨膜骨膜上的骨膜上是骨骼pririen骨的骨膜骨膜上的骨膜上均在骨中的骨骼骨骼上的骨骼中，但在骨骨膜上是骨骼上的骨膜。在胚胎生命的17日，发现细胞在肥厚的软骨中表达，其中一些是多核细胞。胎儿大鼠的造血剂也在脾脏中进行，但目前正在研究中。从上面可以看出，祖细胞骨细胞在骨膜阶段合成CAII，当排除脾脏时，骨折提供了造血微环境，这对于分化和诱导到骨质骨质中很重要，但是它正在持续进行研究。

项目成果

Toyosawa,S.: "Restricted expression of carbonic anhydrose isozymeII in rat growth-plate cartilage during chondrosyte msturction." International symposium on cartilage metabolism.125-127 (1994)

Toyosawa,S.：“软骨系统发育过程中大鼠生长板软骨中碳酸酐同工酶 II 的限制表达。”

豊澤 悟: "LPS投与後のラット辺縁歯周組織における単球・マクロファージ系細胞の同定(II)" 日本歯周病学会会誌. 36. 86- (1994)

Satoru Toyosawa：“LPS给药后大鼠边缘牙周组织中单核细胞/巨噬细胞的鉴定（II）”日本牙周病学会杂志36. 86-（1994）。