胎生期ラットにおける前駆破骨細胞の分化に関する研究

胚胎大鼠前体破骨细胞分化的研究

• 批准号: 06771585
• 负责人: 豊澤 悟
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771585/
• 关键词: 前駆破骨細胞; 炭酸脱水酵素アイソザイムII(CAII); 酒石酸耐性酸性ホスファターゼ(TRAP); ED1; CAIIのRNAプローブ; in situ hybridization; 胎生期造血臓器; 軟骨膜

破骨細胞の起源は造血幹細胞、中でも単球・マクロファージ系の前駆細胞であると考えられているが、その分化過程はいまだ明らかではない。我々は、生体内での分化過程を胎生期ラットの造血の場(卵黄嚢→肝)と軟骨内骨化を起こす長幹骨の骨原基において調べてきた。その結果、単球・マクロファージ系細胞と破骨細胞に共通のマーカーであるED1陽性単核細胞が肝造血期の肝臓に認められたが、成熟破骨細胞の有する炭酸脱水酵素アイソザイムII(CAII)と酒石酸耐性酸性ホスファターゼ(TRAP)に反応を示すものはなかった。一方、骨髄造血の起こる直前の胎生16日の骨原基の軟骨膜(perichondrium)にもED1陽性単核細胞が出現した。これらのED1陽性単核細胞はCAII、TRAPともに陽性を示し、胎生17日ではこれら陽性細胞の一部が軟骨膜を破って肥大軟骨内に侵入し、多核のものも認められた。これより、軟骨膜のED1陽性細胞は前駆破骨細胞と考えられた。平成6年度科研費にてCAIIのcDNAから、RT-PCR法にてRNAプローブを作成し、造血の場(卵黄嚢→肝)と骨原基におけるCAII合成をin situ hybridizationにて調べた。その結果、胎生9-10の卵黄嚢造血細胞、胎生14-17日の肝造血細胞にはCAIImRNAの発現は見られなかったが、胎生16日の骨原基の軟骨膜にCAIImRNA発現の見られる単核細胞を認めた。胎生17日では軟骨膜を破って肥大軟骨内にもCAIImRNA発現細胞を認め、その一部は 多核細胞であった。なお、胎生期ラットの造血は脾臓でも行われるが、現在検討中である。以上から、前駆破骨細胞は、CAIIの合成を軟骨膜の段階で盛んに合成しており、脾臓を除くと軟骨膜が破骨細胞への分化・誘導に重要な造血微細環境(hematopoietic micro-environment)を提供すると考えられるが続けて検討中である。

The origin of osteoclasts is hematopoietic stem cells, hematopoietic stem cells, progenitor cells, and differentiation processes. The differentiation process in vivo is regulated by the hematopoietic field (vitelline → liver) and endochondral ossification. The results showed that the EDI-positive mononuclear cells in the hematopoietic phase of liver were identified by the common enzyme of the cell line and osteoclast, and the mature osteoclast cells had the enzyme of carbonic acid dehydratase II(CAII) and tartaric acid resistant enzyme (TRAP). ED1-positive mononuclear cells were found in the perichondrium of the bone primordium on the 16th day of birth before the onset of bone hematopoiesis. In addition, some of the ED1-positive cells were found to be CAII, TRAP, and CAII positive cells. On the 17th day of birth, some of the ED1-positive cells were found to be hypertrophic, and some of them were found to be polynuclear. The ED1 positive cells in the cartilage membrane are the osteoclasts. Research expenses in 2006 include CAII cDNA synthesis, RNA synthesis by RT-PCR, regulation of CAII synthesis in situ hybridization in hematopoietic field (vitelline → liver), and bone primordium. CAII mRNA expression in vitelline hematopoietic cells at 9-10 days of gestation, in liver hematopoietic cells at 14-17 days of gestation, and in cartilage membranes at 16 days of gestation. On the 17th day of birth, the cartilage membrane was broken and the CAII mRNA was expressed in some cells. The birth period of the fetus is different from that of the spleen. The synthesis of CAII by osteoclasts and osteoclasts is an important step in the synthesis and differentiation of osteoclasts.

项目成果

Toyosawa,S.: "Restricted expression of carbonic anhydrose isozymeII in rat growth-plate cartilage during chondrosyte msturction." International symposium on cartilage metabolism.125-127 (1994)

Toyosawa,S.：“软骨系统发育过程中大鼠生长板软骨中碳酸酐同工酶 II 的限制表达。”

豊澤 悟: "LPS投与後のラット辺縁歯周組織における単球・マクロファージ系細胞の同定(II)" 日本歯周病学会会誌. 36. 86- (1994)

Satoru Toyosawa：“LPS给药后大鼠边缘牙周组织中单核细胞/巨噬细胞的鉴定（II）”日本牙周病学会杂志36. 86-（1994）。