大理石骨病の病態モデルにおける破骨細胞の骨吸収機能と分化に関する研究

石骨病病理模型中骨吸收功能及破骨细胞分化的研究

• 批准号: 07771605
• 负责人: 豊澤 悟
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771605/
• 关键词: 大理石骨病; OC; OCマウス; C-SrC; 炭酸脱水酵素アイソザイムII; proton pump; anion exchanger; 骨吸収; in situ hybridization

大理石骨病は破骨細胞の増殖・分化、あるいは機能の異常により骨の改造現象が阻止され、骨変形や骨髄腔の狭小化などを伴う遺伝疾患である。本病態モデル中のoc/ocマウスは破骨細胞形成は行われるが、波状縁がなく骨吸収能を欠いており、破骨細胞の機能に欠陥があるとされている。我々はこのoc/ocマウスの破骨細胞の骨吸収能について、電顕形態学的に、または免疫組織学的に、様々な点から異常を検索してきた。最近、遺伝子遺伝子ターゲッティングにより細胞内情報伝達チロシンキナーゼをコードするc-src遺伝子を完全に欠失させると破骨細胞の波上縁がなく骨吸収能を欠くという報告があり、oc/ocマウスで同様の異常が起こっている可能性が考えられ、c-src遺伝子関連蛋白質であるpp60c-srcの発現の有無を免疫染色にて検討したが、異常は見られなかった。また、正常骨組織では、破骨細胞は炭酸脱水酵素アイソザイムII(CAII)の触媒作用により、H_2OとCO_2から、H^+とHCO_3が産生される。HCO_3は破骨細胞のbasolateral membraneからANION EXCHANGERによって放出され、Hは波状縁上のH^+-ATPaseによってハウシップ吸収窩に分泌され、脱灰が行われるが、これら因子のどれが欠けても上記化学平衡が乱れ、ハウシップ吸収窩へのH供給が停止する。そこで、まずマウスCAIIに対する抗体を作り免疫染色により破骨細胞を同定してみた。その結果、oc/ocマウスの破骨細胞にもCAII陽性反応が見られた。また、CAIIのmRNAに対するin situ hybridizationでも破骨細胞にシグナルの発現を認めた。さらに平成7年度科学研究費補助金にてANION EXCHANGER、およびH-ATPaseに対する抗体を作成し、免疫染色を行ったところ、oc/ocマウスの破骨細胞の細胞膜にも陽性反応を認め(未発表)、現在、各抗体の細胞膜局在を電顕レベルで検討中である。以上の如く、oc/ocマウスの破骨細胞はハウシップ吸収窩へのH供給、すなわち骨脱灰能を有していると思われる。

整骨病是一种遗传疾病，其中由于破骨细胞增殖和分化或异常功能而预防骨骼修饰，并发生骨修饰，从而导致骨骼变形和骨髓腔的变窄。尽管这种病理模型中的OC/OC小鼠会产生破骨细胞，但它们没有波浪边缘，缺乏骨吸收能力，并且据说具有缺陷的破骨细胞功能。我们已经以各种方式搜索异常，从形态或免疫组织化学上电子显微镜，以了解这种OC/OC小鼠骨吸收能力的破骨细胞。最近，有报道说，如果编码细胞内信号传导酪氨酸激酶的C-SRC基因被基因基因靶向完全删除，则没有破骨细胞的波边缘，并且缺乏骨吸收能力，并且可能在OC/OC小鼠中发生相似的异常。我们通过免疫染色调查了PP60C-SRC（一种C-SRC基因相关蛋白）的表达，但没有发现异常。此外，在正常的骨组织中，破骨细胞是由H_2O产生的，而CO_2通过碳酸酐酶同工酶II（CAII）催化。 HCO_3是由阴离子交换器从破骨细胞的基底外侧膜中释放出来的，H被分泌到波浪边缘和脱钙上的H^+ATPase吸收的Howship吸收FOSS中，但这些因素中的任何一个因素都破坏了化学平衡，并阻止了H供应H供应吸收量吸收量。因此，我们首先创建了针对小鼠CAII的抗体，并通过免疫染色鉴定了破骨细胞。结果，在OC/OC小鼠的破骨细胞中也观察到CAII阳性反应。另外，在破骨细胞中观察到信号表达的原位杂交。此外，针对阴离子交流剂和HATPase的抗体在1995年制备了科学研究的补助金并进行了免疫染色，并且还发现了阳性反应在OC/OC小鼠的破骨细胞膜上（未发表）（未发表），并且每种抗体的细胞膜定位当前在电子元中进行了测试。如上所述，据信来自OC/OC小鼠的破骨细胞具有为Howship Resorpting Fossa提供H的能力，即脱矿物化的骨头。

项目成果

豊澤 悟: "大理石骨症マウス(oc/oc)における骨吸収異常について" 日本病理学会会誌. 第85巻. (1996)

Satoru Toyosawa：“骨质疏松小鼠骨吸收异常（OC/OC）”，日本病理学会杂志，第 85 卷（1996 年）。