神経細胞の分化と機能維持におけるsrc遺伝子の役割

src基因在神经元分化和功能维持中的作用

• 批准号: 05858099
• 负责人: 佐藤 仁彦
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Gifu Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05858099/
• 关键词: src; メタロチオネインプロモーター; 神経細胞; PC12; NGF; RT-PCR

1.重金属でsrc遺伝子の誘導可能な細胞株の作製まず、トリ由来のv-src遺伝子をセンスならびにアンチセンス方向にして、ヒトメタロチオネインプロモーターの下流に組み込んだプラスミドを作製した。次に、このプラスミドをpSV2neo(G418耐性遺伝子を含む)と一緒に、神経細胞分化のモデル系であるラット褐色細胞腫PC12細胞に導入し、G418存在下で培養を続け数十のクローンを得た。これらのクローンについて、重金属添加によるv-src遺伝子の発現変化をRNAベルで観察したところ、重金属の有無によりv-src mRNAの発現量が変化する細胞株がいくつか存在し、実験目的に適いそうな細胞株を得ることができた。2.RT-PCR法によるNGF mRNAの発現変化の解析PC12細胞においてNGF刺激によるNGF遺伝子の発現をRT-PCR法により解析した結果、(1)mRNAレベルでは常にNGFの発現が見られること(2)NGF刺激により特異的な形のNGF mRNAが発現することが明らかになった。現在、src可誘導細胞株を用いて、src遺伝子の発現促進または抑制によるNGF遺伝子の発現変化や形態変化などについて解析を行うと共に、NGFのpromoter領域を単離しNGFの発現調節機構について解析を進めているところであり、NGFとの関連性を含めたsrcの生理的役割についてより深く理解していく予定である。

1. The induction of heavy metal src gene may be controlled by the downstream component of v-src gene. In the second place, the gene expression vector pSV2neo (G418 resistant gene included) and the gene expression vector pSV2neo (G418 resistant gene included) were introduced into PC12 cells and cultured in the presence of G418. The expression of v-src mRNA in cell lines increased due to the presence or absence of heavy metals and the presence or absence of heavy metals. 2. Analysis of NGF mRNA Expression by RT-PCR in PC12 Cells under NGF Stimulation: (1) mRNA Expression in PC12 Cells Under NGF Stimulation: (2) NGF mRNA Expression in PC12 Cells Under NGF Stimulation: (3) NGF mRNA Expression in PC12 Cells Under NGF Stimulation: (4) NGF mRNA Expression in PC12 Cells Under NGF Stimulation: (5) NGF mRNA Expression in PC12 Cells Under NGF Stimulation: (6) NGF mRNA Expression in PC12 Cells Under NGF Stimulation: (7)NGF mRNA Expression in PC12 Cells Under NGF Stimulation: (8)NGF mRNA Expression in PC12 Cells Under NGF Stimulation: (9) NGF mRNA Expression: (9) NGF Now, src can induce cell lines to use src gene expression promotion, inhibition, NGF gene expression transformation, morphological transformation, analysis, common, NGF promoter domain separation, NGF expression regulation mechanism, analysis, analysis, correlation, including src physiological division, deep understanding, predetermined.

项目成果

Akira Hattori: "Tumor necrosis factor is markedly synergistic With interleukin 1 and interferon-gamma in stimulating the production of nerve growth tactor in fibroblasts." FEBS Lett.in press. (1994)

Akira Hattori：“肿瘤坏死因子与白细胞介素 1 和干扰素 γ 显着协同刺激成纤维细胞中神经生长因子的产生。”

佐藤仁彦: "廣川タンパク質化学 第2巻 受容体タンパク質II" 廣川書店, 6 (1993)

佐藤仁：《广川蛋白质化学第2卷受体蛋白质II》广川书店，6（1993）