マウス膵島アミロイド蛋白ゲノム遺伝子の構造解析とその転写調節に関する研究

小鼠胰岛淀粉样蛋白基因组基因结构分析及其转录调控研究

• 批准号: 06770811
• 负责人: 西 理宏
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770811/
• 关键词: 膵島アミロイド蛋白; 遺伝子構造; 転写調節; 膵B細胞

(1)マウス膵島アミロイド蛋白(IAPP)ゲノム遺伝子のクローニグマウスIAPPcDNAをプローブとして、マウスゲノムライブラリーよりマウスIAPPゲノム遺伝子のクローニングを行った。マウスIAPP遺伝子は全長約5.8kbであり、ヒトおよびラットと同様3エクソンより構成されていた。転写開始部位はTATA-boxより33bp下流のGであった。-32〜-26bpにラット同様CCAAT-boxが認められ、ヒトでは認められないことより、ヒトと齧歯類で発現調節機構が異なっている可能性も示唆される。また、-140〜-120bp付近にはインスリン遺伝子の転写調節エレメントであるE-boxあるいはP1領域類似の塩基配列が認められた。(2)CAT assayによるマウスIAPP遺伝子転写調節領域の解析マウスIAPP遺伝子5'上流部(-2.5kb〜+423bp)の種々の長さのDNA断片を導入したIAPP-CAT reporter gene constructを作成し、マウス・インスリノーマ細胞株(β-TC3)へ導入し、CAT活性を指標に各constructのプロモーター活性を検討した。その結果、-171〜-87bpの部位が転写調節に関与しており、なかでも-143〜-111bpの領域が重要と考えられた。同部位にはE-boxやP1領域類似の塩基配列が存在するため、それぞれに変異を導入し検討したところ、両者とも転写調節に関与しているが、特にP1類似のTAAT配列が重要と考えられた。また、イントロン1の欠失により転写活性が低下するため、イントロン1にもエンハンサーの存在する可能性が示唆された。

(1) マ ウ ス Cui island ア ミ ロ イ ド protein (IAPP) ゲ ノ ム posthumous son 伝 の ク ロ ー ニ グ マ ウ ス IAPPcDNA を プ ロ ー ブ と し て, マ ウ ス ゲ ノ ム ラ イ ブ ラ リ ー よ り マ ウ ス IAPP ゲ ノ ム heritage 伝 son の ク ロ ー ニ ン グ を line っ た. マ ウ ス IAPP posthumous son 伝 は stretches approximately 5.8 KB で あ り, ヒ ト お よ び ラ ッ ト と with others in 3 エ ク ソ ン よ り constitute さ れ て い た. Youdaoplaceholder0 write the beginning part of 転 TATA-boxよ 転 33bp downstream 転 Gであった. - 32 ~ 26 - bp に ラ ッ ト with others CCAAT box - が recognize め ら れ, ヒ ト で は recognize め ら れ な い こ と よ り, ヒ ト gritting と 歯 class で 発 different showing adjusting mechanism が な っ て い も る possibility in stopping さ れ る. ま た, - 140 - - 120 bp pay nearly に は イ ン ス リ ン posthumous son 伝 の planning write adjust エ レ メ ン ト で あ る E - box あ る い は P1 areas similar の salt base with column が recognize め ら れ た. (2) the CAT assay に よ る マ ウ ス IAPP heritage 伝 son planning, regulating field analytical マ の ウ ス IAPP heritage 伝 son 5 'upper part (2.5 KB ~ + 423 bp) の kind 々 の long さ の DNA fragment を import し た IAPP - CAT reporter gene The construct を し, consummate マ ウ ス · イ ン ス リ ノ ー マ cell lines (beta TC3) へ import し index, CAT activity を に various construct の プ ロ モ ー タ ー active を beg し 検 た. そ の results and - 171 - - 87 bp の が planning write adjust に masato and し て お り, な か で も - 143 - - 111 bp が important と の field test え ら れ た. With parts に は E - box や P1 areas similar の salt base with column が exist す る た め, そ れ ぞ れ に - different を import し beg し 検 た と こ ろ, struck と も planning write adjust に masato and し て い る が, に P1 similar の TAAT match column が important と exam え ら れ た. ま た, イ ン ト ロ ン lost 1 の owe に よ り planning write low active が す る た め, イ ン ト ロ ン 1 に も エ ン ハ ン サ ー の is す が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

江川 公浩 他: "マウス膵島アミロイド蛋白(IAPP)遺伝子のクローニング" 関西鍼灸短期大学与報. 8. 44-47 (1992)

Kimihiro Ekawa等人：“小鼠胰岛淀粉样蛋白(IAPP)基因的克隆”关西针灸学院Yoho。

西 理宏 他: "マウス膵島アミロイド蛋白(IAPP)遺伝子のクローニング" インスリン研究1992(年報 vol.14). 14. 101-104 (1993)

Tomohiro Nishi 等人：“小鼠胰岛淀粉样蛋白 (IAPP) 基因的克隆”Insulin Research 1992（年度报告第 14 卷）（1993 年）。

江川 公浩 他: "マウス膵島アミロイド蛋白遺伝子のクローニングとその転写調節領域の解析" 分子糖尿病学. 6(予定). (1995)

Kimihiro Ekawa 等人：“小鼠胰岛淀粉样蛋白基因的克隆及其转录调控区域的分析”《分子糖尿病学》6（计划）。