急性骨髄性白血病(AML)細胞における顆粒球コロニー刺激因子受容体(G-CSFR)構造異常の解析

急性髓系白血病 (AML) 细胞粒细胞集落刺激因子受体 (G-CSFR) 结构异常的分析

• 批准号: 06770839
• 负责人: 高橋 聡
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770839/
• 关键词: G-CSF受容体; 受容体異常疾患; 遺伝子構造異常; 急性骨髄性白血病(AML); RT-PCR法

これまで我々はG-CSFRcDNAをプローブに用いたサザン解析によってAML細胞の一部でG-CSFR遺伝子構造異常の存在を示唆する結果を得ており、これらの研究結果に基きAMLが受容体異常疾患であるか否かを解明する目的で、AML細胞におけるG-CSFR遺伝子の細胞内領域の塩基配列について構造異常の有無を各AML症例について検討を試みた。方法としては、G-CSFR細胞内領域に対応する合成オリゴマーを作成し、各患者のAML芽球から、グアニジン塩酸法、またはAcid Guanidinium Thiocyanate-Phenol-Chloroform(AGPC)法により全RNAを分離したAML30症例の全RNAおよび上記のプライマーを用いてreverse transcriptase-polymerase chain reaction(RT-PCR)法を行なった。現在、自動シーケンサー機を用いてRT-PCR法によって合成されたcDNAからAML細胞のG-CSFR細胞内領域に対応する塩基配列について調べている。今後、異常塩基配列が発見された場合は、クローン化した異常G-CSFR遺伝子をマウスIL-3依存性細胞株であるFDCP-1に導入し異常G-CSFR遺伝子を発現させ、上記細胞についてG-CSFによる増殖反応とミエロペルオキシダーゼ(MPO)およびリューコサイトエステラーゼ(LE)を指標とした成熟骨髄系細胞への分化誘導について検討を加え、本遺伝子異常が細胞増殖ならびに分化のどちらの異常をもたらしているかについて検討を加える予定である。

こ れ ま で I 々 は G - CSFRcDNA を プ ロ ー ブ に with い た サ ザ ン parsing に よ っ て AML cells の a で G - CSFR heritage 伝 sub structure exist abnormal の を in stopping す る results て を お り, こ れ ら の results に base き AML が by abnormal should the body disease で あ る か no か を interpret す る purpose で, AML cells に お け る G -CSFR 伝 subzyme <s:1> intracellular domain <s:1> base coordination に 伝 <s:1> て て て structural abnormalities <s:1> whether there are を cases of various AML, に みた て検 て検 て検 to explore を みた. Method と し て は, G - CSFR intracellular に 応 seaborne す る synthetic オ リ ゴ マ ー を make し, each patient の AML gemmule か ら, グ ア ニ ジ ン salt Acid method, ま た は Acid Guanidinium The Thiocyanate-Phenol-Chloroform(AGPC) method was used to isolate the <s:1> <s:1> whole RNAを of the <s:1> AML30 case. The および was noted that the <s:1> プラ and <s:1> were separated by を using the てreverse transcriptase-polymerase chain reaction(RT-PCR) method を lines なった. Now, automatic シ ー ケ ン サ ー machine を with い て rt-pcr method に よ っ て synthetic さ れ た cDNA か ら の G - CSFR AML cells within the field に 応 seaborne す る salt base with column に つ い て adjustable べ て い る. See in the future, abnormal salt base with column が 発 さ れ た は, ク ロ ー ン change し た abnormal traces of G - CSFR 伝 son を マ ウ ス IL - 3 dependency cell lines で あ る に import し abnormal FDCP - 1 G - CSFR heritage 伝 son を 発 now さ せ, written cell に つ い て g-csf に よ る raised yield anti 応 と ミ エ ロ ペ ル オ キ シ ダ ー ゼ (MPO) お よ び リ ュ ー コ サ イ ト エ ス テ ラ ー ゼ を index (LE) と し た mature bone marrow cell へ の induction に つ い て beg を 検 え, this legacy 伝 abnormal が cells raised colonization な ら び に differentiation の ど ち ら の abnormal を も た ら し て い る か に つ い て を 検 please add え る designated で あ る.

项目成果

Shimane, M.,et al.: "Molecular cloning and Characterization of G-CSF induced gene cDNA." Biochem.Biophis.Res.Commun.199. 26-32 (1994)

Shimane, M.,et al.：“G-CSF 诱导基因 cDNA 的分子克隆和表征”。

Takahashi, S.,et al.: "The Mechanism and New Approach Drug Resistance of Cancer Cells" Elsevier Science Publishers B.V., 335 (1993)

Takahashi, S.,et al.：“癌细胞耐药性的机制和新方法”Elsevier Science Publishers B.V.，335 (1993)

Takahashi, S.,et al.: "Recomobinant human glycosylate co lony-stimulating factor CRLG-CSF-conbined regimen for aplastic BMT for refractory AML." Bone Marrow Transplant. 13. 239-245 (1994)

Takahashi, S.,et al.：“重组人糖基化集落刺激因子 CRLG-CSF 联合方案用于治疗难治性 AML 的再生障碍性 BMT。”

Suzukawa, K.,Tani, K.,et al.: "Identification of breakpoint cluster region 3'of the ribophorin I gene at 3q21 associated with the transcriptional activation of the EVI1 gene in acute myelogenous leukemias with 1nv(3)(q21q26)." Blood. 84. 2681-2688 (1994)

Suzukawa, K.,Tani, K.,et al.：“核糖蛋白 I 基因 3 断点簇区域 3q21 的鉴定与 1nv(3)(q21q26) 急性髓性白血病中 EVI1 基因的转录激活相关

Aoki,Y.,Tani,K.,et al.: "Regulation of recombinant human granulocyte colony-stimulating factr pruduction using herpes simplex virus 1 thymidine gene." Biochem.Biophis.Res.Commun.200. 1245-1251 (1994)

Aoki,Y.,Tani,K.,et al.：“使用单纯疱疹病毒 1 胸苷基因调节重组人粒细胞集落刺激因子的产生。”