プラスミノーゲンアクチベータ-インヒビター1の活性に基づいた肺転移形成と抑制

基于纤溶酶原激活剂抑制剂 1 活性的肺转移形成和抑制

基本信息

  • 批准号:
    06771123
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.58万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1994
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1994 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

【方法および効果】ヒト線維肉腫細胞のcell line(HT-1080)はheterogeneityを有している。Fidlerの方法に準じてin vivo selectionを行い10倍肺転移能の高いHT-1080のsubpopulationを得た。このsubpopulationは親株に比べてPAI-1の発現(ELISA)は3倍に増加していた。また限界希釈法を用いてHT-1080からPAI-1の発現が極めて少ないクローン(1-3C)と、それの多いクローン(26-6)を確立した。1-3CのPAI-1の発現量は親株HT-1080のわずか5%であり、肺転移形成能も低い。26-6のPAI-1の発現量は親株の約2倍で肺転移形成能は10倍以上であった。PAI-1の発現が少ない1-3CにPAI-1のcDNAを発現クローニングベクター(pcDNA1neo)に組み込み、リン酸カルシウム法、Lipofection法を用いてtransfectionを行った。neomycinによる選別を行いPAI-1がtransfectionされたcell line 1-3C(PAI)を得た。1-3C(PAI)は1-3Cの3倍以上のPAI-1の発現がみられた。また肺転移能に関しては、1-3Cはほとんど肺転移を形成しないにもかかわらず、1-3C(PAI)は高頻度に肺転移を形成した。【結論】PAI-1の発現が低いHT-1080のクローン(1-3C)にPAI-1のcDNAをtransfectionすることによりPAI-1の発現が増加し、さらに肺転移能の増加がみられた。PAI-1が肺転移を増加させる重要な因子の1つであることが直接的に証明された。
【 Method および effect 】ヒト line vesiculoma cells <s:1> cell line(HT-1080) および heterogeneityを has <s:1> て る る る. The Fidler <s:1> method に quasi-じ てin vivo selectionを row <s:1> 10 times lung 転 migration energy <s:1> high <s:1> HT-1080 <s:1> subpopulationを gives た. The <s:1> <s:1> parent strain of the <s:1> <s:1> subpopulation に is に three times more に than the べてPAI-1 ELISA. Youdaoplaceholder3 た た た た. ま た を limit when 釈 method with い て HT - 1080 か ら PAI - 1 の 発 が now extremely め て less な い ク ロ ー ン (1-3 c) と, そ れ の more い ク ロ ー ン (26-6) を establish し た. The occurrence amount of 1-3C <s:1> PAI-1 わず parent strain HT-1080 わず 5%であ and lung 転 migration energy であ low わず. The occurrence amount of 26-6 <s:1> PAI-1 <s:1> is about twice that of the <s:1> parent strain で, and the lung 転 migration ability is <s:1> more than ten times であった. PAI - 1 の 発 が now less な い 1-3 c に PAI - 1 の cDNA を 発 now ク ロ ー ニ ン グ ベ ク タ ー (pcDNA1neo) に group み 込 み, リ ン acid カ ル シ ウ ム, Lipofection を with い て transfection を line っ た. neomycinによる select を line を pai-1 がtransfectionされたcell line 1-3C(PAI)を to た. 1-3C(PAI) がみられた more than three times the <s:1> of 1-3C, the occurrence of <s:1> pai-1 がみられた. ま た lung planning can move に masato し て は, 1-3 c は ほ と ん ど lung planning move を し な い に も か か わ ら ず, 1-3 c (PAI) は high frequency に lung planning move を し た. 【 conclusion 】 PAI - 1 の 発 が low い HT - 1080 now の ク ロ ー ン (1-3 c) に PAI - 1 の cDNA を transfection す る こ と に よ り PAI - 1 の 発 now が raised し, さ ら に lung planning can move の raised plus が み ら れ た. PAI - 1 が lung planning move を raised plus さ せ る important な factor の 1 つ で あ る こ と が directly に prove さ れ た.

项目成果

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