プラスミノーゲンアクチベータ-インヒビター1の活性に基づいた肺転移形成と抑制

基于纤溶酶原激活剂抑制剂 1 活性的肺转移形成和抑制

• 批准号: 06771123
• 负责人: 土屋 弘行
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771123/
• 关键词: プラスミノーゲンアクチベータ-インヒビター1; 肺転移能; 線維肉腫細胞; トランスクエクション

【方法および効果】ヒト線維肉腫細胞のcell line(HT-1080)はheterogeneityを有している。Fidlerの方法に準じてin vivo selectionを行い10倍肺転移能の高いHT-1080のsubpopulationを得た。このsubpopulationは親株に比べてPAI-1の発現(ELISA)は3倍に増加していた。また限界希釈法を用いてHT-1080からPAI-1の発現が極めて少ないクローン(1-3C)と、それの多いクローン(26-6)を確立した。1-3CのPAI-1の発現量は親株HT-1080のわずか5%であり、肺転移形成能も低い。26-6のPAI-1の発現量は親株の約2倍で肺転移形成能は10倍以上であった。PAI-1の発現が少ない1-3CにPAI-1のcDNAを発現クローニングベクター(pcDNA1neo)に組み込み、リン酸カルシウム法、Lipofection法を用いてtransfectionを行った。neomycinによる選別を行いPAI-1がtransfectionされたcell line 1-3C(PAI)を得た。1-3C(PAI)は1-3Cの3倍以上のPAI-1の発現がみられた。また肺転移能に関しては、1-3Cはほとんど肺転移を形成しないにもかかわらず、1-3C(PAI)は高頻度に肺転移を形成した。【結論】PAI-1の発現が低いHT-1080のクローン(1-3C)にPAI-1のcDNAをtransfectionすることによりPAI-1の発現が増加し、さらに肺転移能の増加がみられた。PAI-1が肺転移を増加させる重要な因子の1つであることが直接的に証明された。

The cell line(HT-1080) of the tumor cells is heterogeneity. Fidler's method is accurate in vivo selection and 10 times higher in HT-1080 subpopulation. The subpopulation was 3-fold higher than that of the parent plant in PAI-1 expression (ELISA). The detection of PAI-1 in HT-1080 and PAI-1 in HT-1080 was established by the method of "limit detection"(1-3C). 1-3C and PAI-1 production was 5% lower than that of HT-1080, and lung migration was lower. PAI-1 production of 26-6 was about 2 times higher than that of its parent plant, and its lung migration ability was 10 times higher than that of its parent plant. PAI-1 cDNA expression was detected by PCR (pcDNA1 neo), PCR and Lipofection. Neomycin is selected from cell lines 1-3C(PAI). 1-3C(PAI) is expected to be more than 3 times PAI-1 of 1-3C. 1 - 3C(PAI) high frequency lung migration [Conclusion] The expression of PAI-1 is lower than that of HT-1080, and PAI-1 cDNA transfection is increasing. PAI-1 is an important factor in the increase of lung function.