培養骨芽細胞の石灰化とALP活性に対するコラーゲンの架橋形成阻害剤の効果

胶原交联形成抑制剂对培养成骨细胞矿化和碱性磷酸酶活性的影响

• 批准号: 06771651
• 负责人: 関 九美子
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Aichi Gakuin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771651/
• 关键词: 骨芽細胞; アルカリホスファターゼ; 亜鉛; HEBP; カルシウムイオノファー

骨芽細胞のマーカー酵素とみなされているアルカリホスファターゼ(ALP)はPIをアンカーとしたectoenzymeとして存在しており、硬組織石灰化に極めて重要な役割を果たしている。骨組織の石灰化とALP活性との関連について検討するため、培養骨芽細胞を用いて、物理化学的にミネラル沈着を抑制するHEBPおよび亜鉛処理による石灰化抑制時のALP活性を解析した。HEBP(0.1mM)および亜鉛(0.1mM)処理はいずれもMC3T3-E1の石灰化を抑制すると同時にALPの培養液中への遊離を促進した。EctoenzymeとしてのALP量も有意に増加していたが、ALPのectoenzymeとしての存在比率(90%以上)はこれら薬物により変動しなかった。また、RT-PCR法によりALPのmRNAの増加も確認された。また、これら薬物は石灰化を抑制しない低濃度でもALP活性を増加させたので、ALP合成系に対する促進効果であると考えられた。また骨コラーゲン、非コラーゲン蛋白の産生抑制を惹起するカルシウムイオノファーA23187処理により細胞内カルシウムを増加させたところ、MC3T3-E1、ROSI7/2.8、SaOS等の骨芽細胞様細胞において、いずれもALPの培養液中への遊離の増加が認められた。このA23187の効果は培養液中の血清濃度に依存せず、処理時間に依存していた。また、A23187による遊離ALPの増加はML-7処理によって抑制されたが、TPA、スタウロスポリンにより影響を受けなかった。このことからA23187によるALP遊離量の増加は細胞内カルシウム上昇に基づき、カルモジュリンを介した機構に関連している可能性が高い。石灰化/コラーゲン形成とALP動態との関連についてさらに検討を加えている。

Bone bud cells の マ ー カ ー enzyme と み な さ れ て い る ア ル カ リ ホ ス フ ァ タ ー ゼ (ALP) は PI を ア ン カ ー と し た ectoenzyme と し て exist し て お り, hard tissue calcification に extremely め て important な "を cut fruit た し て い る. Bone tissue の calcification と ALP activity と の masato even に つ い て beg す 検 る た め, cultivating を bud cells with bone い て, physical and chemical に ミ ネ ラ ル shen the を inhibit す る HEBP お よ び 亜 lead 処 Richard に よ る calcification inhibition の ALP activity を parsing し た. HEBP (0.1 mM) お よ び 亜 lead (0.1 mM) 処 Richard は い ず れ も MC3T3 E1 - の calcification を inhibit す る と simultaneously に ALP の medium, へ の free を promote し た. Ectoenzyme と し て の ALP in も intentionally に raised add し て い た が, ALP の Ectoenzyme と し て の exist ratio (above 90%) は こ れ ら 薬 content に よ り - move し な か っ た. Youdaoplaceholder0, RT-PCR によ によ ALP <s:1> mRNA <s:1> increase confirm された. ま た, こ れ ら 薬 content は calcification を inhibit し な い low concentration で も を raised and ALP activity さ せ た の で, ALP GeChengXi に す seaborne る promote unseen fruit で あ る と exam え ら れ た. ま た bone コ ラ ー ゲ ン, non コ ラ ー ゲ ン protein の suppressing を provoked す る カ ル シ ウ ム イ オ ノ フ ァ ー A23187 処 Richard に よ り intracellular カ ル シ ウ ム を raised plus さ せ た と こ ろ, MC3T3 E1, ROSI7/2.8, SaOS の bone bud cells others に お い て, い ず れ も ALP の medium, へ の free Youdaoplaceholder1 add が recognize められた. The <s:1> serum concentration in the <s:1> culture medium of <s:1> て A23187 is に dependent on せず, and the treatment time is に dependent on <s:1> て た た た た た. ま た, A23187 に よ る free ALP の raised は ML - 7 処 requirement by Richard に よ っ て inhibit さ れ た が, TPA, ス タ ウ ロ ス ポ リ ン に よ り を by け な か っ た. こ の こ と か ら A23187 に よ る ALP free volume の raised は requirement by intracellular カ ル シ ウ ム increase に base づ き, カ ル モ ジ ュ リ ン を interface し た institutions に masato even し て い が high い る possibilities. Calcification / コ ラ ー ゲ ン form と ALP dynamic と の masato even に つ い て さ ら に を 検 please add え て い る.

项目成果

A.Togari: "The release of alkaline phosphatase from osteoblastic cells stimulated by calcium jonophore A23187" The Japanese Journal of Pharmacology. 67(suppl). 241 (1995)

A.Togari：“钙 jonophore A23187 刺激的成骨细胞释放碱性磷酸酶”《日本药理学杂志》。