c-fos遺伝子の発現と歯周病の病態の関わりに関する基礎的研究

c-fos基因表达与牙周病病理关系的基础研究

• 批准号: 06771744
• 负责人: 塩野目 学
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771744/
• 关键词: 歯周病; c-fos遺伝子; プロコラゲナーゼ遺伝子; インターロイキン-1β

我々はc-fos遺伝子発現と歯周病の病態との関係を明確にすることを目的として実験を行い、以下に示す結果を得た。(1)炎症歯肉組織中におけるc-fos遺伝子発現の確認:5人の増殖性歯肉炎患者および5人の重度歯周炎患者から歯肉を採取し、通法に従い切片を作製後in situ hybridization法によりc-fos遺伝子の発現を確認することを試みたが、いずれの歯肉標本においても、c-fos遺伝子の発現は確認できなかった。現在、歯周病の急性炎症罹患部歯肉組織中のc-fos遺伝子発現の確認を行っている。(2)ヒト歯肉線維芽細胞(HGF_S)の増殖およびmatrix metalloproteinase(MMP)-1、3産生におよぼすrhIL-1βの効果:HGF_SをrhIL-1βで刺激後、細胞増殖能をMTT比色定量法にて、MMP-1、3産生能をEIA法にて測定したところ、rhIL-1βはHGF_Sの細胞増殖能および、MMP-1、3産生能を濃度依存的に促進させた。(3)HGF_Sのc-fos遺伝子およびprocollagenase(proC)遺伝子発現におよぼすrhIL-1βの影響:無血清培地で培養しているHGF_Sを0.25ng/mlのrhIL-1βで刺激すると、短時間でc-fos m-RNAおよびproC m-RNAの発現が認められた。c-fos m-RNAの発現量はrhIL-1βで刺激後1時間で最大となり、6時間後まで認められた。proC m-RNAの発現はそれよりも遅く、刺激開始2時間後から認められ、その発現量は24時間後まで経時的に増加した。また10μg/mlのcycloheximideの添加によりproC m-RNAの発現は抑制されたのに対し、c-fos m-RNAの発現は逆に促進された。このことは、rhIL-1β刺激によるc-fos遺伝子の転写誘導はタンパク合成を介していないことを示している。以上の結果から、rhIL-1β刺激によるc-fos遺伝子の発現は、その後のporC遺伝子の発現誘導に関与している可能性が明らかとなった。現在、HGF_Sへのc-fos遺伝子の導入を試みている。

We aim to clarify the relationship between the development of c-fos genes and the pathology of periodontal disease, and we have implemented this goal. The results shown below are achieved. (1)Identification of c-fos gene expression in inflammatory dental tissue:5 patients with reproductive dentitis and 5 patients with severe periodontitis were examined for c-fos gene expression in situ hybridization after dental tissue biopsy. Now, the identification of c-fos gene expression in dental pulp tissue of patients with acute inflammation of periodontal disease has been carried out. (2)Effect of rhIL-1 β on proliferation and matrix metalloproteinase(MMP)-1,3 production of human embryonic cells (HGF_S): After stimulation of HGF_S with rhIL-1 β, cell proliferation was measured by MTT colorimetry, MMP-1,3 production was measured by EIA, and rhIL-1β promoted cell proliferation and MMP-1,3 production in a concentration-dependent manner. (3) The effects of HGF_S and procollagenase(proC) on rhIL-1β expression: HGF_S and rhIL-1 β 0.25ng/ml were stimulated in serum-free culture, and the expression of c-fos m-RNA and proC m-RNA was detected in short time. c-fos m-RNA production reached its maximum at 1 time post rhIL-1β stimulation, and reached its maximum at 6 time post rhIL-1 β stimulation. ProC m-RNA was detected 2 hours after stimulation and increased 24 hours after stimulation. The addition of 10μg/ml cycloheximide inhibited the production of proC m-RNA and promoted the production of c-fos m-RNA. rhIL-1β stimulation induces the synthesis of c-fos genes. These results indicate that rhIL-1β stimulation is associated with the development and induction of c-fos gene. Now, HGF_S and c-fos genes are introduced into the system.