NF複合体によるc-fos遺伝子のクロマチン修飾と発現制御

NF复合物对c-fos基因染色质修饰及表达调控

• 批准号: 17054037
• 负责人: 久武 幸司
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17054037/
• 关键词: 転写調節; ガン遺伝子; バキュロウイルス; 基本転写因子; 一本鎖RNA

当研究では、c-fos遺伝子の転写調節に関係すると考えられるNF複合体について主に生化学的手法を用いて解析を進めた。NF複合体はNF45、NF90又はNF45とNF110の複合体からなるが、組換え体NFタンパク質を用いてNF複合体のサブユニット構成をゲル濾過等で解析した結果、(NF45)_2(NF90)_2または(NF45)_2(NF110)_2とヘテロテトラマーを形成し、NF90とNF110は同一の複合体には存在しないことが明らかとなった。バキュロウイルスで発現させた組換え体の解析より、NF110,NF45/110はc-fos遺伝子の基本転写を活性化するのみで、NF90,NF45/90には非常に弱い転写活性化能しか認められなかった。そこで、NF45、NF90またはNF110にタグを付けた遺伝子をHeLa細胞に導入し、タグ付きのNF45、90及び110を含む複合体を精製した。その結果、NFタンパク質にはそれら以外に幾つかのペプチドが結合しより大きな複合体を形成していることが明らかとなった。この複合体は試験管内でc-fos遺伝子の転写を活性化することが観察され、転写活性化にはNF45、NF90、NF110以外の因子も関与していることが示唆された。NF複合体が転写活性化に関与することより、それぞれのNFタンパク質と他の転写因子との相互作用を検討した。その結果、NF複合体は、TFIIB,TFIID,TFIIHと結合することが分かった。さらにNF90,NF110,NF45/90,NF45/110RNAPIIとも弱く結合する。この転写活性化活性はpoly(I)-poly(C)で阻害される。以上より、NF因子は1)幾つかのペプチドと複合体を形成し、2)基本転写因子等と相互作用することによって転写を活性化し、3)この活性は一本鎖RNA等にて調節されていること、の3点が明らかとなった。

When we study the relationship between c-fos gene and NF complex, we will use biochemical methods to analyze it. NF complex NF45, NF90 and NF45 and NF110 complex NF90 and NF110 complex NF45 and NF110 complex NF90 and NF 110 complex NF90 complex NF45 and NF 110 complex NF110 complex NF90 complex NF45 and NF110 complex NF90 complex NF45 complex NF90 complex NF9 NF110,NF45/110, NF90,NF 45/90, NF 90,NF 91/92, NF 91/92, NF 91/93, NF 91/93, NF 91/94, NF 91/93, NF 91/93, NF 91/94, NF 91/93, NF 91/93, NF 91/94, NF 91/95/90,NF 91/93/94, NF 91/95/95/90,NF 91/95/90, NF 91/90/95/90, NF 90 NF45, NF90 and NF110 were introduced into HeLa cells, and NF45, NF90 and NF110 were purified. As a result, NF can be separated from other substances, and the complex can be formed. This complex is involved in the activation of c-fos genes in the test tube, and the activation of c-fos genes is related to factors other than NF45, NF90, and NF110. The interaction between NF complex and other factors is discussed. The results of NF complex, TFIIB,TFIID,TFIIH are different. NF90,NF110,NF45/90,NF45/110RNAPII and weak binding. The activation activity of this compound is poly(I)-poly(C). The NF factors mentioned above are: 1) the formation of complex; 2) the activation of the interaction of basic transcription factors; 3) the regulation of the activity of a native RNA; and 3) the activation of the interaction of basic transcription factors.

项目成果

基本転写因子とその関連疾患

基本转录因子与相关疾病

• 发表时间: 2005
• 期刊: Molecular Medicine 42・9
• 作者: Jun-Li Luo;Hideaki Kamata;Michael Karin.;久武幸司
• 通讯作者: 久武幸司

The fission yeast protein, Ker1p, is an ortholog of RNA polymerase I subunit A14 in Saccharomyces cerevisiae, and is required for stable association of Rrn3p and RPA21 in Pol I.

裂殖酵母蛋白 Ker1p 是酿酒酵母中 RNA 聚合酶 I 亚基 A14 的直系同源物，是 Pol I 中 Rrn3p 和 RPA21 稳定结合所必需的。

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Biol.Chem. 280・12
• 作者: Imazawa Y;Hisatake K;Mitsuzawa H;Matsumoto M;Tsukui T;Nakagawa K;Nakadai T;Shimada M;Ishihama A;Nogi Y
• 通讯作者: Nogi Y