転写因子AP1の活性化に関与するプロテインキナーゼCの基質の同定

鉴定参与转录因子 AP1 激活的蛋白激酶 C 底物

• 批准号: 06780559
• 负责人: 平井 秀一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780559/
• 关键词: AP1; Jun; PKC; Ras; TRE; 転写制御; シグナル伝達

マウス繊維芽細胞、NIH3T3を材料としたこれまでの実験より、PKCδがAP1/Junを効率よく活性化すること、さらに、Rasのdominant negative 変異体を用いた実験によりこれにはRasの活性が必要なことを明らかにしてきた。ただし、TRE-tk-CATの発現を指標としたAP1/Junの活性化に対する活性型Rasの効果は、活性型PKCδのものと比べて10分の1程度と低く、Rasを介したシグナル伝達経路のみならずPKCδに特異的なシグナル伝達経路がAP1/Junの活性化に必要であることが予測された。さらに、キナーゼ活性を失わせたPKCδの変異体が、活性型PKCδにより引き起こされるAP1/Junの活性化に対してdominant negativeに作用することから、PKCδはその下流のシグナル伝達を媒介する蛋白質と、かなり安定した複合体を形成するのではないかと考えた。この蛋白質を同定するため、PKCδをプローブとし、NIH3T3細胞のmRNAをもとに作製したcDNA発現ライブラリーをスクリーニングした結果、複数のcDNAを、PKCδ結合蛋白質をコードするものとして分離することに成功した。現在これらの生理活性について検討中であるが、あるものは、細胞を飢餓状態に置くことにより発現が誘導されることで知られる遺伝子産物と高い相同性を示した。このことは、活性型PKCδが、AP1/Junを活性化するにもかかわらず細胞増殖に対しては抑制作用を示すという以前の知見を説明する上で有力な手がかりとなる可能性がある。今後、AP1/Junの活性化に大きく影響を及ぼすERK、JNKの活性を指標に加え、AP1/Jun活性をコントロールするシグナル伝達経路を解析していきたい。

The activity of Ras is essential for the development of cell, NIH 3T3 and PKCδ. The expression of TRE-tk-CAT is an indicator of the activation of AP1/Jun, the effect of active Ras, the activity of PKCδ is 1 minute lower than that of active PKCδ, and the expression of TRE-tk-CAT is an indicator of the activation of AP1/Jun, the activity of PKC δ is 1 minute lower than that of active PKC δ. In addition, PKC δ activity loss, PKC activity loss, PKC δ activity, PKC activity loss, PKC activity, PKC activity loss, PKC activity loss, PKC activity, PKC activity loss, PK The expression of PKC delta mRNA in NIH 3T3 cells was successfully isolated. Now, the physiological activity of the gene is detected in the cell, and the gene product is highly identical. This is the first time that PKCδ and AP1/Jun have been activated. It is possible that PKC δ and AP1/Jun can inhibit cell proliferation. In the future, AP1/Jun activity is greatly affected by ERK and JNK activity, and AP1/Jun activity is greatly affected by ERK and JNK activity.

项目成果

S.-i.Hirai et al.: "Ras-dependent signal transduction is indispensable but not sufficient for the activation of AP1/Jun by PKCδ." EMBO J.13. 2331-2340 (1994)

S.-i.Hirai 等人：“Ras 依赖性信号转导对于 PKCδ 激活 AP1/Jun 是必不可少的，但还不够。” 2331-2340 (1994)。

M.Hirano et al.: "A protein kinase C isozyme,nPKCε,is involved in the activation of NF-κB by 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate(TPA) in rat 3Y1 fibroblasts." Biochem.Biophys.Res.Comm.206. 429-436 (1995)

M.Hirano 等人：“蛋白激酶 C 同工酶 nPKCε 参与大鼠 3Y1 成纤维细胞中 12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯 (TPA) 的 NF-κB 激活。”通讯206。429-436（1995）

S.Ohno et al.: "Activation of novel protein kinase Cδ and Cε upon mitogenic stimulation of quiescent rat 3Y1 fibroblasts." J.Biol.Chem.269. 17495-17501 (1994)

S.Ohno 等人：“对静止大鼠 3Y1 成纤维细胞进行有丝分裂刺激时新型蛋白激酶 Cδ 和 Cε 的激活”，J.Biol.Chem.269（1994）。

A.Fujise et al.: "Specificity of the high affinity interaction of protein kinase C with a physiological substrate,myristoylated alanine-rich protein kinase C substrate." J.Biol.Chem.269. 31642-31648 (1994)

A.Fujise 等人：“蛋白激酶 C 与生理底物（肉豆蔻酰化富含丙氨酸的蛋白激酶 C 底物）高亲和力相互作用的特异性。”

K.Mizuno et al.: "UCN-01,an anti-tumor drug,is a selective inhibitor of the conventional PKC subfamily." FEBS Lett.359. 259-261 (1995)

K.Mizuno等人：“UCN-01是一种抗肿瘤药物，是传统PKC亚家族的选择性抑制剂。”