Gタンパク質結合型グルタミン酸受容体mGluR4,mGluR7の中枢神経系内分布

G蛋白偶联谷氨酸受体mGluR4和mGluR7在中枢神经系统中的分布

• 批准号: 06780633
• 负责人: 大石 仁
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780633/
• 关键词: グルタミン酸受容体; 中枢神経; ラット; in situ hybridization; 抗体

Gタンパク質結合型グルタミン酸受容体mGluR1〜mGluR7のうちmGluR4/mGluR6/mGluR7は、L-AP4(L-2-amino-4-phosphonobutyrate)に感受性があり、L-AP4を用いた電気生理学的研究により、少なくともその一部がシナプス前膜に存在しシナプス前抑制に関与していることが示唆されている。しかしながら、mGluR4/mGluR6/mGluR7の詳細な形態学的解析はいまだなされておらず、細胞レベルの局在は明らかでない。本研究課題ではmGluR4/mGluR6/mGluR7のうち中枢神経系に広く分布すると予想されるmGluR4/mGluR7について、まず、in situ hybridization法による組織レベルの局在解析を中枢神経系全体にわたって行なった。さらに、光学・電子顕微鏡下に細胞レベルの局在を精査するべく、mGluR4/mGluR7の特異抗体の作製を試みた。その結果、in situ hybridizatin法では、mGluR4mRNAとmGluR7mRNAの分布は著しく異ることがわかった。mGluR4mRNAとmGluR7mRNAはいずれも神経細胞だけに発現したが、mGluR7mRNAはmGluR4mRNAに比べてより広い範囲に分布し、一部の部位ではmGluR4とmGluR7の両方のmRNAが発現を示した。L-AP4によるシナプス前抑制が報告されている部位には、mGluR4とmGluR7のいずれか一方または両方が発現し、mGluR4/mGluR7のシナプス前抑制への関与が示唆された。一方、特異的な抗体の作製では、合成ペプチド・大腸菌融合タンパク質を抗原としたウサギ・モルモットへの免疫を繰返し、得られた血清の精製と分析を行なっている。

The sensitivity of L-AP4 (L-2-amino-4-phosphobutyrate) to G-2-gluten-bound acid receptors mGluR1-mGluR7 and mGluR4/mGluR6/mGluR7 was investigated. The electrophysiological study of L-AP4 was carried out. The detailed morphological analysis of mGluR4/mGluR6/mGluR7 and mGluR6/mGluR7 was carried out. This research topic is to analyze the distribution of mGluR4/mGluR6/mGluR7 in the central nervous system as a whole. In addition, the preparation of mGluR4/mGluR7 specific antibodies was tested under optical and electronic microscopes. Results: mGluR4 mRNA and mGluR7 mRNA were distributed in situ hybridization method. mGluR4 mRNA and mGluR7 mRNA were found in neurons, mGluR7 mRNA was found in neurons, mGluR4 mRNA was found in neurons, mGluR7 mRNA was found in neurons, and mGluR4 mRNA and mGluR7 mRNA were found in some parts of neurons. L-AP4 and mGluR4/mGluR7 were detected in the presence of a single inhibitor, and the relationship between mGluR4 and mGluR7 and the presence of a single inhibitor was discussed. Preparation of specific antibodies, synthesis of E. coli fusion proteins, antigen, immune response, purification and analysis of serum

项目成果

Akazawa et al.: "Expression of mRNAs of L-AP4-sensitive metabotropic glutamate receptors (mGluR4,mGluR6,mGluR7)in the rat retina." Neuroscience Letters. 171. 52-54 (1994)

Akazawa 等人：“大鼠视网膜中 L-AP4 敏感代谢型谷氨酸受体（mGluR4、mGluR6、mGluR7）的 mRNA 表达。”