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スライスパッチクランプ記録法による虚血性神経細胞死のメカニズムに関する研究

切片膜片钳记录法研究缺血性神经元死亡机制

基本信息

批准号：
06780679
负责人：
坪川宏
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は以下の2項目について研究を行い、成果を発表した。1.虚血負荷後の海馬CA1錘体細胞で記録されるグルタミン酸受容体電流の特性について虚血後のスナネズミ海馬スライス標本を用いてCA1錘体細胞よりホールセルおよびアウトサイド・アウトパッチクランプ記録を行ない、グルタミン酸受容体の各サブタイプのアゴニストを投与して惹起される電流について定量的に解析し健常細胞と比較した。その結果虚血負荷後の錘体細胞では非NMDA型受容体を介する電流のコンダクタンスは健常細胞より大きく、NMDA型受容体を介する電流のコンダクタンスは小さいことが解り、昨年報告したシナプス後電流の特性の違いはシナプス後膜のグルタミン酸受容体の性質の違いに起因することが示唆された。さらにアウトサイド・アウトパッチクランプ記録からグルタミン酸受容体各サブタイプの単一チャネル・コンダクタンスも健常細胞と異なっていることが明らかになり、受容体タンパクのサブ・ユニット構成の違いが示唆された。2.海馬CA1錘体細胞で記録されるグルタミン酸受容体電流に及ぼすクモ毒投与の効果スナネズミ海馬スライス標本を用いて、CA1錘体細胞よりホールセル記録および単一チャネル記録を行なって興奮性シナプス後電流(EPSC)およびグルタミン酸受容体の各サブタイプのアゴニストを投与して惹起される電流を記録し、それらに対するクモ毒(JSTXとそのアナログ)の投与の効果を検討した。その結果JSTXアナログは非NMDA型受容体チャネルを流れる電流の一部を濃度依存性かつ可逆的にブロックすることが解った。虚血負荷後の海馬CA1錘体細胞で記録されるグルタミン酸受容体電流に対して同様の実験を行ったところ、非NMDA型受容体チャネルを流れる電流をより低濃度でブロックした。これらの結果から非NMDA型受容体にはJSTXアナログによりブロックされる型とされない型があり、虚血負荷後の海馬CA1錘体細胞では前者の割合が大きいことが示唆された。

This year, the following 2 items are listed in the table of research and results. 1. After the deficiency of blood, the CA1 cell records of sea fish were recorded, the current characteristics of acid capacitors, the characteristics of current, the characteristics of current, the characteristics of The concentration of acid in each recipient is much higher than that of the acceptor. it is necessary to analyze the quantitative analysis of normal cells. The results showed that after deficiency of blood load, the cell cycle of non-NMDA type capacitor was not the same as that of non-NMDA type capacitor, the normal cell of non-NMDA type capacitor, the normal cell of non-NMDA type capacitor, the current response of microcell after last year's report, and the characteristics of current after last year's report. it was reported last year that the characteristics of current were not caused by the presence of acid in the back of the membrane. Please tell me that each of the acid recipients is suffering from an acid receptacle. The normal cells are not affected. two。 The marine CA1 cell records do not affect the concentration of acid, the current and the toxicity of the capacitive body. In the CA1 system, there is a significant increase in the number of cold waves (EPSC). Each recipient has a negative impact on the current record and the result of JSTX exposure. The results show that the JSTX system is a non-NMDA type of capacitor, and the current system is a temperature-dependent and reversible system. After the deficiency of blood, the CA1 cells of the sea were recorded. The current of the capacitor was the same as that of the recipient. The current of the non-NMDA type of the recipient was current of low temperature. The results of this study showed that the patients with non-NMDA type of receptacles were not JSTX recipients, and the cells of sea CA1 cells after deficiency of blood showed that the former was instigated.