DNAマーカーを用いた北方林構成樹種の遺伝構造の解明

利用 DNA 标记阐明北方森林树种的遗传结构

• 批准号: 06760140
• 负责人: 木佐貫 博光
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06760140/
• 关键词: カラマツ属; DNAマーカー; RAPD; RFLP; 遺伝

当科学研究費により、当演習林で植物のDNAの抽出および分析を行う設備として不足していた、フリーザ-および電気泳動装置一式を購入した。このため、RAPD法(ランダム増幅DNA多型)を行うにあたって一通り必要最低限の設備が揃った。外部機関(京都大学)にて行ったRFLP(制限酵素断片長多型)によるカラマツ属樹木のDNA分析について、ひととおりの分析が終了し、その結果を日本林学会誌に投稿し掲載された。RFLPのレベルでカラマツ属樹木の類縁関係が大筋解明された。この結果を土台にして、今後より感度の良い手法を用い詳細な類縁関係を解明したい。一方、北海道演習林では、カラマツおよびグイマツ並びにカラマツとグイマツの雑種について、種内変異および両親から雑種へのDNAマーカーの遺伝様式に関する解析を行い、親子関係の推定方法の開発を目指している。材料にはニホンカラマツ2個体および樺太系グイマツ2個体を両親種とする相互交雑家系を選定した。6月から8月にかけて採集した約200個体の生葉からゲノムDNAに抽出を行った。表現型を把握するために1年生枝について有毛性および枝色の測定を、球果を持つものについては大きさおよび種鱗数を測定した。得られたDNAについて秋から冬にかけてRAPD分析を行った。すなわち、DNAを,PCR増幅器を用い10塩基のDNA鋳型(プライマー)と合致する部分の増幅を行った。このPCR増幅産物について電気泳動し、DNAの長さに応じて分離させた。この共通のDNAの数によって遺伝的近縁度を求めるのであるが、このためにはさらに数多くのプライマーを用いたPCR増幅が必要で今後の課題である。

When scientific research is conducted, plant DNA extraction and analysis equipment is insufficient, and electric swimming equipment is purchased. The RAPD method (RAPD-amplified DNA polymorphism) was used to determine the minimum necessary amount of DNA. An external organization (Kyoto University) conducted RFLP(restriction enzyme fragment length polymorphism) analysis of DNA in genus trees. The results were published in Journal of Japanese Forestry Society. RFLP analysis revealed that there was a strong relationship between the species of trees belonging to this genus. The results of this study are as follows: One side, Hokkaido exercise forest, 2 individuals, 2 parents, 3 families, 3 families, 4 families, 4 families, 5 families, 6 families, 7 families, 8 families, 9 families, 9 families, 10 families, 10 families, 10 About 200 individuals were collected in June and August. Phenotype determination of the number of hairy branches and branch colors, seed cones and seed scales RAPD analysis was performed in the autumn and winter. The PCR amplitude-amplifier is used to amplify the DNA sequence of the 10-mer DNA sequence. The PCR amplification products were isolated by electroporation and DNA sequencing. The number of common DNA fragments is increasing rapidly.

项目成果

木佐貫 博光: "カラマツとグイマツの雑種F_1の一年生枝の有毛性と枝色の遺伝" 日本林学会論文集. 105. 329-330 (1994)

Hiromitsu Kisanuki：“日本落叶松和日本松杂交F_1的一年生枝条的毛羽和枝条颜色的遗传”日本林业学会汇刊105。329-330（1994）。

H.Kisanuki: "Interspecific relationship of the genus Larix inferred from the RFLPs of chloroplast DNA" 日本林学会誌. 77(1). 83-85 (1995)

H. Kisanuki：“从叶绿体 DNA 的 RFLP 推断落叶松属的种间关系”，日本林业学会杂志 77(1) (1995)。