マウス3T3-L1細胞の分化におけるインスリンの情報伝達系の解析

小鼠3T3-L1细胞分化过程中胰岛素信号转导系统分析

• 批准号: 07772147
• 负责人: 上原 孝
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07772147/
• 关键词: インスリン; 細胞分化; 3量体G蛋白質; Ras; MAP kinase; PI3-kinasse; wortmannin; 3T3-L1細胞

3T3-L1線維芽細胞はインスリン・デキサメサゾン・IBMXの同時添加によって白色脂肪細胞へと分化する。しかしながら、細胞分化を誘導する情報伝達系については不明である、そこで、3T3-L1細胞の分化にはインスリンがkey roleを担っていることから、インスリンの情報伝達系を解析することで、脂肪細胞分化の誘導機構を調べた。インスリンをコンフルエントの3T3-L1線維芽細胞に添加すると、インスリン受容体チロシンキナーゼの自己リン酸化が速やかに起こった。さらに、細胞の増殖や分化に関与していると考えられている低分子量G蛋白質のRasとRasの下流に存在するmitogen-activated protein kinase(MAPキナーゼ)の活性化が起こった。また、インスリンによる糖取り込み作用に関与していることが示唆されているphosphatidylinositol 3-kinase(PI3-キナーゼ)も活性化することが分かった。一方、PI3-キナーゼの特異的阻害薬であるwortmanninは3T3-L1線維芽細胞の脂肪細胞への分化を濃度依存的に抑制することが分かった。さらには、wortmanninはインスリン刺激に伴うRasの活性化とMAPキナーゼ活性やMAPキナーゼの活性化に必須なチロシン残基のリン酸化を抑制した。この時、インスリンと同様に受容体チロシンキナーゼを活性化させるepidermal growth factor(EGF)刺激に伴うRasおよびMAPキナーゼの活性化に対してwortmanninは抑制作用を示さなかった。このことから、3T3-L1細胞においてインスリンとEGFの情報伝達系は異なっており、脂肪細胞分化を引き起こすインスリンの情報伝達系はPI3-キナーゼ→Ras→MAPキナーゼというカスケードを経ていることが推定された。

3 t3 L1 line - d bud cells は イ ン ス リ ン · デ キ サ メ サ ゾ ン, IBMX の also add に よ っ て white fat cells へ と differentiation す る. し か し な が ら, induced differentiation を す る intelligence 伝 da system に つ い て は unknown で あ る, そ こ で の, 3 t3 L1 cell differentiation に は イ ン ス リ ン が key role を bear っ て い る こ と か ら, イ ン ス リ ン の intelligence 伝 da system を parsing す る こ と で, adipose cell differentiation induced institution を の べ た. イ ン ス リ ン を コ ン フ ル エ ン ト の 3 t3 L1 line - d bud cells に add す る と, イ ン ス リ ン by let body チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ の himself リ ン acidification が speed や か に up こ っ た. さ ら に や differentiation, cell の raised colonization に masato and し て い る と exam え ら れ て い る low molecular weight G protein の Ras と Ras の obscene に exist す る mitogen - activated protein kinase (MAP キ ナ ー ゼ) の activeness が up こ っ た. ま た, イ ン ス リ ン に よ る sugar take り 込 み role に masato and し て い る こ と が in stopping さ れ て い る phosphatidylinositol 3 - kinase (PI3 - キ ナ ー ゼ) も activeness す る こ と が points か っ た. One party, the PI3 - キ ナ ー ゼ の specific resistance against 薬 で あ る wortmannin は 3 t3 L1 line - d の fat bud cells へ の differentiation を concentration dependent に inhibiting す る こ と が points か っ た. さ ら に は, wortmannin は イ ン ス リ ン stimulus に with う Ras の activeness と MAP キ ナ ー ゼ active や MAP キ ナ ー ゼ の activeness に must な チ ロ シ ン residues の リ ン acidification を inhibit し た. こ の, イ ン ス リ ン と with others に by let body チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ を activeness さ せ る epidermal growth factor (EGF) stimulation に with う Ras お よ び MAP キ ナ ー ゼ の activeness に し seaborne て wortmannin は を inhibition role さ な か っ た. こ の こ と か ら, 3 t3 cells - L1 に お い て イ ン ス リ ン と EGF の intelligence 伝 da system は different な っ て お り, fat cells differentiation を lead き こ す イ ン ス リ ン の intelligence 伝 da system は PI3 - キ ナ ー ゼ - Ras - MAP キ ナ ー ゼ と い う カ ス ケ ー ド を 経 て い る こ と が presumption さ れ た.

项目成果

Takashi Uehara: "Possible involvement of phosphatidylinositol-specific phospholipase C related to pertussis toxin-sensitive GTP- binding proteins during adipocyte differentiation of 3T3-L1 fibroblasts" Biochimica et Biophysica Acta. 1224. 302-310 (1994)

Takashi Uehara：“在 3T3-L1 成纤维细胞的脂肪细胞分化过程中，磷脂酰肌醇特异性磷脂酶 C 可能参与与百日咳毒素敏感的 GTP 结合蛋白相关”Biochimica et Biophysicala Acta。

Tadashi Nishiya: "Herbimycin A suppresses NF-κB activation and tyrosine phosphorylation of JAK2 and the subsequent induction of nitric oxide synthase in C6 glioma cells" FEBS Letters. 371. 333-336 (1995)

Tadashi Nishiya：“Herbimycin A 抑制 NF-κB 激活和 JAK2 酪氨酸磷酸化，以及随后在 C6 神经胶质瘤细胞中诱导一氧化氮合酶” FEBS Letters 371. 333-336 (1995)。

Takashi Uehara: "Possible involvement of pertussis toxin-sensitive GTP-binding protein(s)in c-fos expression during differentiation of 3T3-L1 fibroblasts to adipocytes" Biochimica et Biophysica Acta. 1088. 41-46 (1991)

Takashi Uehara：“百日咳毒素敏感的 GTP 结合蛋白可能参与 3T3-L1 成纤维细胞分化为脂肪细胞过程中 c-fos 的表达”Biochimica et Biophysicala Acta。

Takashi Uehara: "Possible involvement of protein kinase C and low molecular weight GTP-binding proteins in thrombin-induced histamine secretion in human platelets" Biochemical and Biophysical Research Communications. 206. 492-496 (1995)

Takashi Uehara：“蛋白激酶 C 和低分子量 GTP 结合蛋白可能参与凝血酶诱导的人血小板组胺分泌”生物化学和生物物理研究通讯。

Takashi Uehara: "Wortmannin inhibits insulin-induced Ras and mitogen-activated protein kinase activation related to adipocyte differentiation in 3T3-L1 fibroblasts" Biochemical and Biophysical Research Communications. 210. 574-580 (1995)

Takashi Uehara：“渥曼青霉素抑制与 3T3-L1 成纤维细胞中脂肪细胞分化相关的胰岛素诱导的 Ras 和丝裂原激活蛋白激酶激活”生物化学和生物物理研究通讯。