マウス3T3-L1細胞の分化におけるインスリンの情報伝達系の解析

小鼠3T3-L1细胞分化过程中胰岛素信号转导系统分析

• 批准号: 08772073
• 负责人: 上原 孝
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08772073/
• 关键词: 3T3-L1細胞; 脂肪細胞分化; インスリン; 3量体G蛋白質; PI 3-kinase; Ras; MAP kinase; wortmannin

3T3-L1線維芽細胞はインスリン・デキサメサゾン・IBMXの同時添加によって白色脂肪細胞へと分化することが報告されているものの、細胞分化を誘導する情報伝達系については不明な点が多く残されている。私たちは3T3-L1細胞の脂肪細胞への分化が3量体GTP結合蛋白質の機能を消失させる百日咳毒素(PTX)の前処理によって抑制されることを見い出した。さらには、インスリンによって活性化されるphosphatidylinositol 3-kinase (PI 3-キナーゼ)の特異的阻害薬であるwortmanninの前処理によっても脂肪細胞への分化が抑制されることを明らかにしてきた。このことから、PTXとwortmaninは細胞分化を誘導する情報伝達系を解析する上で、有用なプローブであることが予想された。そこで、脂肪細胞分化へのkey factorであるインスリンの情報伝達系を調べた。PTX、wortmanminは共にインスリン刺激に伴うRasの活性化とMAPキナーゼ活性やMAPキナーゼの活性化に必須なチロシン残基のリン酸化を抑制した。この時、インスリンと同様に受容体チロシンキナーゼを活性化させるepidermal growth factor(EGF)刺激に伴うRasおよびMAPキナーゼの活性化に対しては抑制作用を示さなかった。受容体自己チロシンリン酸化反応、基質蛋白質(IRS-1)のチロシンリン酸化とPI 3-キナーゼとの結合に対しては影響を及ぼさなかった。しかしながら、PTXはインスリン刺激に伴うPI 3-キナーゼ活性を50%抑制した。このことから、インスリンのPI 3-キナーゼ活性化機構には異なる2つの経路が存在し、1つは受容体キナーゼ→IRS-1→PI 3-キナーゼ、他方は受容体→PTX感受性蛋白質、おそらく3量体G蛋白質→PI 3-キナーゼを介するものであることが示唆された。したがって、PTXはインスリンによるPI 3-キナーゼ活性を抑制することで、その下流に存在するカスケードを抑制する結果、脂肪細胞への分化を抑制していることが推定された。

3T3-L1 line dimensional sprout cells are differentiated by adding white adipocytes at the same time.することがreport されているものの, cell differentiation をinduced するinformation 伝达组 についてはUnknown なPoint が多く residual されている. The differentiation of adipocytes in 3T3-L1 cells has disappeared and the function of GTP-binding protein has disappeared.さらには、インスリンによってactivated phosphatidylinositol 3-kinase (PI 3-キナーゼ)のspecific inhibition of 薬であるwortmanninのpretreatmentによってもadipocyte differentiationへのinhibitionされることを明らかにしてきた.このことから, PTX とwortmanin はcell differentiation をinduced するInformation 伝达 Department をanalysis する上で, useful なプローブであることが yu want された.そこで、Adipocyte differentiation へのkey factor であるインスリンのInformation 伝达式を Adjustment べた. PTX, wortmanmin はにインスリン stimulating にband う Ras activating MAP The activation of the MAP MAP must be inhibited by the acidification of the MAP residue.この时、インスリンと同様にReceiver チロシンキナーゼをActivationさせるepidermal growth Factor (EGF) stimulates and activates Ras MAP and inhibits it. Receptor self-reactive receptor, matrix protein (IRS-1) acidified PI 3-キナーゼとの combines the influence of に対しては and ぼさなかった.しかしながら, PTX はインスリン stimulates the PI 3-キナーゼactive を50% inhibits the した.このことから、インスリンのPI 3-キナーゼactivation mechanismにはdifferentなる2つの経路がexistentし、1つはacceptorキナーゼ→IRS-1→PI 3-キナーゼ, other side acceptor → PTX sensitive protein, おそらく 3-dimensional G protein → PI 3-キナーゼを解するものであることが时攆された.したがって、PTXはインスリンによるPI 3-キナーゼActivity をSuppression することで、そのdegradation にExistence するカスケードThe result of inhibition is the result, and the differentiation of adipocytes is inhibited. It is presumed that the differentiation is inhibited.

项目成果

Takashi Uehara: "Possible involvement of phosphatidylinositol-specific phospholipase C related to pertussis toxin-sensitive GTP- binding proteins during adipocyte differentiation of 3T3-L1 fibroblasts" Biochimica et Biophysica Acta. 1224. 302-310 (1994)

Takashi Uehara：“在 3T3-L1 成纤维细胞的脂肪细胞分化过程中，磷脂酰肌醇特异性磷脂酶 C 可能参与与百日咳毒素敏感的 GTP 结合蛋白相关”Biochimica et Biophysicala Acta。

Yasuhiro Itano: "Regulation of Bcl-2 protein expression in human neuroblastoma SHSY-5Y cells : positive and negative effects of protein kinase C and A, respectively." Journal of Neurochemistry. 67. 131-137 (1996)

Yasuhiro Itano：“人神经母细胞瘤 SHSY-5Y 细胞中 Bcl-2 蛋白表达的调节：分别是蛋白激酶 C 和 A 的正面和负面影响。”

Yasuyuki Nomura: "Neuronal apoptosis by glial NO : Involvement of inhibition of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase." Human Cell. 9. 205-214 (1996)

Yasuyuki Nomura：“神经胶质细胞 NO 导致的神经细胞凋亡：涉及 3-磷酸甘油醛脱氢酶的抑制。”

Takashi Uehara: "Wortmannin inhibits insulin-induced Ras and mitogen-activated protein kinase activation related to adipocyte differentiation in 3T3-L1 fibroblasts" Biochemical and Biophysical Research Communications. 210. 574-580 (1995)

Takashi Uehara：“渥曼青霉素抑制与 3T3-L1 成纤维细胞中脂肪细胞分化相关的胰岛素诱导的 Ras 和丝裂原激活蛋白激酶激活”生物化学和生物物理研究通讯。

Takashi Uehara: "Possible involvement of protein kinase C and low molecular weight GTP-binding proteins in thrombin-induced histamine secretion in human platelets" Biochemical and Biophysical Research Communications. 206. 492-496 (1995)

Takashi Uehara：“蛋白激酶 C 和低分子量 GTP 结合蛋白可能参与凝血酶诱导的人血小板组胺分泌”生物化学和生物物理研究通讯。