光合成系II酸素発生膜蛋白質複合体の三次元結晶化

光合系统II释氧膜蛋白复合物的三维结晶

• 批准号: 07780587
• 负责人: 沈 建仁
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780587/
• 关键词: 結晶化; 光化学系II; 酸素発生; 膜蛋白質; 界表活性剤; X線構造解析

本研究の目的は、申請者がこれまでに得た、光化学系II膜蛋白質複合体の低分解能三次元結晶を、種々の結晶化条件を詳細に検討することにより改良し、X線構造解析ができるような高分解能結晶を作製することである。今年度には次のような研究を行い、結果を得た。温度--4℃から30℃の間で結晶化を行い、10℃-30℃で結晶を得たが、15℃において一番よい結晶ができた。標品の純度と均一性--従来のイネ光化学系II標品を再度ドデシルマルトシドで可溶化し、ゲル濾過により精製し、結晶化を行ったが、結晶性の向上は見られなかった。また、同様な方法を用いてホウレンソウとえんどう豆からも系II複合体を精製し、結晶を得たが、分解能はイネの結晶より低かった。界面活性剤--各種界面活性剤を検討した結果、従来のドデシルマルトシドとヘプチルチオグルコシド以外に、デシルマルトシドとMega-9が同様な結晶を与えた。以上により、結晶の分解能が著しく向上したことは見られなかったが、これは、結晶をハンゲングドロップからX線回折用キャピラリーチューブに装填する時の溶媒組成や温度の変化による可能性もあるので、今後、このような変化を軽減するよう工夫し、高分解能の構造解析を目指したい。

The purpose of this study is to obtain the low resolution energy three-dimensional crystallization and seed crystallization conditions of the photochemical system II membrane protein complex from the applicant. This year's research has been conducted and the results have been obtained. Temperature-4 ℃ to 30℃ crystallization, 10℃-30℃ crystallization, 15℃ crystallization Purity and homogeneity of the standard-- The same method is used to refine, crystallize and decompose the II complex. Interfacial active agents-Various interfacial active agents were investigated, and the results were similar to those of Mega-9. The solvent composition and temperature change during loading are indicated by the structural analysis of the high decomposition energy.