光合成系II酸素発生膜蛋白質複合体の三次元結晶化

光合系统II释氧膜蛋白复合物的三维结晶

• 批准号: 07780587
• 负责人: 沈 建仁
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780587/
• 关键词: 結晶化; 光化学系II; 酸素発生; 膜蛋白質; 界表活性剤; X線構造解析

本研究の目的は、申請者がこれまでに得た、光化学系II膜蛋白質複合体の低分解能三次元結晶を、種々の結晶化条件を詳細に検討することにより改良し、X線構造解析ができるような高分解能結晶を作製することである。今年度には次のような研究を行い、結果を得た。温度--4℃から30℃の間で結晶化を行い、10℃-30℃で結晶を得たが、15℃において一番よい結晶ができた。標品の純度と均一性--従来のイネ光化学系II標品を再度ドデシルマルトシドで可溶化し、ゲル濾過により精製し、結晶化を行ったが、結晶性の向上は見られなかった。また、同様な方法を用いてホウレンソウとえんどう豆からも系II複合体を精製し、結晶を得たが、分解能はイネの結晶より低かった。界面活性剤--各種界面活性剤を検討した結果、従来のドデシルマルトシドとヘプチルチオグルコシド以外に、デシルマルトシドとMega-9が同様な結晶を与えた。以上により、結晶の分解能が著しく向上したことは見られなかったが、これは、結晶をハンゲングドロップからX線回折用キャピラリーチューブに装填する時の溶媒組成や温度の変化による可能性もあるので、今後、このような変化を軽減するよう工夫し、高分解能の構造解析を目指したい。

In this study, the objectives of this study, the successful results of the applicant, the low decomposition energy of the complex of photochemical II membrane proteins, the crystallization conditions of the three-dimensional crystallization and the X-ray analysis of the high decomposition energy of the membrane protein complex of the photochemical system were studied. This year, we have conducted a series of studies and the results are satisfactory. Temperature-4 ℃, temperature 30 ℃, temperature 10 ℃-30 ℃, temperature 15 ℃, temperature 10 ℃-30 ℃, temperature 15 ℃. The quality of the standard is uniform-- the II standard of the Department of Photochemistry is tested again to determine the solubility, the solubility, the crystallization, the crystallization and the crystallization. By using the same method, the II complex was isolated, the results were obtained, and the decomposition energy was determined by the method of low temperature. Interfacial activity test results for all kinds of interfacial activity test results, test results for all kinds of interfacial activity, temperature profiles, temperature profiles, temperature, temperature The above temperature, crystal decomposition can be used to determine the temperature change of the solvent group at the time of loading, and the results show that in the future, the temperature of the solvent group is high in the temperature range, and in the future, the temperature of the solvent group is higher than that of the control group.