紅藻由来光化学系II複合体の結晶化と構造解析
红藻光系统 II 复合物的结晶和结构分析
基本信息
- 批准号:23657037
- 负责人:
- 金额:$ 2.5万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
- 财政年份:2011
- 资助国家:日本
- 起止时间:2011 至 2012
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究の目的は、好酸・好熱性紅藻Cyanidium caldariumから高い酸素発生能を持つ光化学系II複合体(PSII)を高純度に単離精製し、その結晶化を行い、X線結晶構造を解明することである。これまですでに同紅藻PSIIの結晶化に成功しており、SPring-8の放射光X線を用いて分解能3-5AのX線回折データを収集した。本研究では、結晶の質と分解能を向上させるため、結晶化条件の改善、結晶の抗凍結剤置換条件の改善、および結晶の脱水処理条件の最適化により、2.75A分解能を与える結晶の析出に成功し、SPring-8のX線を利用して同分解能でX線回折データを収集した。さらにさまざまな重原子化合物を用いて、重原子同型誘導体を作成し、X線回折データを収集した。得られたデータを解析した結果、3種類の重原子同型誘導体から位相情報を取得した。これらの位相情報を用いて、重原子同型置換法によって分析した結果、紅藻PSIIの初期電子密度図を得た。この電子密度図に基づき、初期のPSII構造を構築した。その結果、現在高分解能で構造が解析されている好熱性シアノバクテリアThermosynechococcus vulcaflus由来PSIIでは存在しない酸素発生系の表在性サブユニット、PsbQ'の結合部位を同定することができた。さらに膜貫通領域でもシアノバクテリアPSIIでは存在しない新たなヘリックスの存在が示唆され、紅藻PSIIの構造がシアノバクテリアPSIIの構造と明らかに異なる点があることが示唆された。現在紅藻PSII構造の精密化を行っているが、本申請者が他の科研費課題の実施に専念するため、本課題は本来の研究期間より短縮して終了することになった。
Purpose this study の は, good acid, hot red algae Cyanidium caldarium か ら tall い acid element 発 can を hold つ light chemistry II complex (PSII) を high-purity に 単 from refined し, そ の crystallization を い, X-ray crystal structure を interpret す る こ と で あ る. こ れ ま で す で に with red algae PSII の crystallization に successful し て お り, SPring - 8 の radiation light X-ray を using い て decomposition to 3-5 a の X-ray inflexion デ ー タ を 収 set し た. This study で は, crystallization の qualitative と decomposition can を upward さ せ る た の の め, crystallization conditions improve, crystallization freeze resistance improvement の tonic displacement condition, お よ び crystallization の dehydration 処 の bedding conditions optimization に よ り, 2.75 A decomposition can を with え る crystallization precipitation の に し success, SPring - 8 の X-ray を using し て with decomposition can で X-ray inflexion デ ー タ を 収 set Youdaoplaceholder0 た. Youdaoplaceholder0 heavy atom compounds を were prepared by て て and heavy atom isoinducers を, and X-ray refolding デ タを タを タを was collected by た た. The results of the られたデ られたデ タを タを analysis of the た results and the ら phase information of the three types of heavy atom homomorphic inductors を were obtained as た た. こ れ ら の phase intelligence を with い て type, heavy atoms with displacement method に よ っ て analysis し た results, red alga PSII の initial electron density 図 を た. The <s:1> <s:1> electron density graph に basis づ に, initial <s:1> PSII structure を construction <s:1> た. そ の result, high decomposition can now で tectonic analytical さ が れ て い る thermophilic シ ア ノ バ ク テ リ ア Thermosynechococcus vulcaflus origin PSII で は exist し な い 発 raw acid element is の table in the sexual サ ブ ユ ニ ッ ト, PsbQ 'の combining site を with fixed す る こ と が で き た. さ ら に transmembrane domain で も シ ア ノ バ ク テ リ ア PSII で は exist し な い new た な ヘ リ ッ ク ス の is が in stopping さ れ, red alga PSII の tectonic が シ ア ノ バ ク テ リ ア PSII の tectonic と Ming ら か に different な る point が あ る こ と が in stopping さ れ た. Now red algae PSII tectonic の line motors を っ て い る が, this applicant が の の KeYanFei subject be applied に 専 read す る た め, this topic は の originally study period よ り shortening し て end す る こ と に な っ た.
项目成果
期刊论文数量(12)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Distribution of the cationic state over the chlorophyll pair of photosystem II reaction center
光系统II反应中心叶绿素对上的阳离子态分布
- DOI:
- 发表时间:2011
- 期刊:
- 影响因子:15
- 作者:Saito K.;Ishida T.;Sugiura M.;Kawakami K.;Umena Y.;Kamiya N.;Shen J.-R.;Ishikita H.
- 通讯作者:Ishikita H.
Cationic state distribution over the chlorophyll d-containing P(D1)/P(D2) pair in photosystem II
光系统 II 中含叶绿素 d 的 P(D1)/P(D2) 对的阳离子态分布
- DOI:10.1016/j.bbabio.2011.12.003
- 发表时间:2012
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Saito K;Shen JR;Ishikita H
- 通讯作者:Ishikita H
S1-state model of the O2-evolving complex of photosystem II.
- DOI:10.1021/bi200681q
- 发表时间:2011-07-26
- 期刊:
- 影响因子:2.9
- 作者:Luber, Sandra;Rivalta, Ivan;Umena, Yasufumi;Kawakami, Keisuke;Shen, Jian-Ren;Kamiya, Nobuo;Brudvig, Gary W.;Batista, Victor S.
- 通讯作者:Batista, Victor S.
Proton-Coupled Electron- Transfer Processes in Photosystem II Probed by Highly Resolved g-Anisotropy of Redox-Active Tyrosine YZ
通过氧化还原活性酪氨酸 YZ 的高分辨率 g 各向异性探测光系统 II 中的质子耦合电子转移过程
- DOI:10.1021/ja2000566
- 发表时间:2011
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Matsuoka H.;Shen J.-R;Kawamori A.;Nishiyama K.;Ohba Y.;Yamauchi S
- 通讯作者:Yamauchi S
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- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
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沈 建仁
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