ウニ胚転写調節因子の精製とin vitro転写系による転写調節機構の解析
海胆胚胎转录调控因子的纯化及体外转录系统分析转录调控机制
基本信息
- 批准号:07780658
- 负责人:
- 金额:$ 0.64万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1995
- 资助国家:日本
- 起止时间:1995 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
ウニ胚アリールスルファターゼ(Ars)遺伝子の転写調節領域に結合する2種類の因子に着目し、研究を行った。1.Orthodenticle-related(Otx)配列認識因子・・・・・Arsの第1イントロン内のエンハンサー活性を担う229bpの領域の転写活性化機構を解析した。ゲルシフトにより、3本の特異的なシフトバンド(I、II、III)が検出された。バンドIは孵化前胞胚期より検出され、徐々に減少し、原腸胚期に消失した。バンドII、IIIは孵化後胞胚期より検出され、原腸胚期まで徐々に増加し、Ars遺伝子の発現変化とよく一致していた。deletion-mutantを用いた結果、229bp内のOtxの認識配列(GGATTA)が2回反復した領域への結合が示され、更に北米産ウニのOtx認識タンパク質に対する抗体は、これらのバンドをスーパーシフトさせた。deletion-mutantとレポーター遺伝子との融合タンパク質を受精卵に導入して求めたエンハンサー活性は、Otx認識配列を消失させると大幅に減少した。単一コピー遺伝子よりalternative splicingにより生じるバフンウニOtx cDNAを2種類クローニングした。以上より、Ars遺伝子の転写活性化には少なくとも2種類のOtx認識タンパク質のOtx配列への結合の切替が必要であることが示された。現在、in vitro転写系による再構成実験により、上記の結果を検証している。2.Gストリング配列認識因子・・・・・転写開始点上流に点在し、発生過程を通して多量に存在するGストリング配列認識因子の精製を行った。併せてサウスウェスタン法により、合成poly(dG)(dC)をプローブとして胞胚期のcDNAライブラリーより4種類のcDNAをクローニングし、塩基配列を決定した。いずれも、酸性・塩基性アミノ酸の繰り返しが存在し、既知のタンパク質との相同性はなく、新しいDNA結合因子である可能性が高い。このうちの一つはreticulocyte lysateで合成したタンパク質が、poly(dG)(dC)アフィニティーカラムに特異的に結合した。
Ars ウニアリールスルファターゼ(Ars) 缝子の転WRits the adjustment field and combines the 2 types of factors and researches. 1. Orthodenticle-related (Otx) alignment recognition factor・・・・・Arsの一号イントロン内のエンハンサーActivityを Danう229bpの区の転WRITE ACTIVATION MechanismをANALYSISた.ゲルシフトにより, 3 special なシフトバンド (I, II, III) が検出された. The バンドIは より検出され before hatching, the 々に decreases し, and the gastrulation stage に disappears した.バンドII, III, the post-hatched blastocyst stage, より検出され, the gastrula stage, まで Xu, にincrease and し, Ars 缝子の発 appear to have changed, and the とよく coincides with していた. Deletion-mutant いた result, 229bp のOtx のcognitive arrangement (GGATTA) 2 times repeated した field The combination of へのshows され, and the ウニのOtx made in northern rice knows the quality of タンパクに対するAb は、これらのバンドをスーパーシフトさせた. deletion-mutant Introduce してquest めたエンハンサーActivity は, Otx recognition arrangement をdisappear させるとsignificantly reduce した.単一コピー弝子よりalternative splicingにより生じるバフンウニOtx cDNAを2 species クローニングした. The above より, Ars 伝子の転WRITE activated には小なくとも2 types of OTx recognition It is necessary to know the タンパク性のOtx arrangement and the combination of the のcut and the necessary であることがshow された. Now, the in vitro 転书による reconstructs the 実験により, and the above-mentioned result を検证している. 2. Gストリングcognition factor・・・・・The starting point of the upper stream is the point in the point, and the development process is the same as the large amount of existence. Combined poly(dG)(dC) poly(dG)(dC) poly(dC) poly(dC) poly(dC) poly(dG)(dC) poly(dG)(dC)) There are four types of cDNA reagents in the period, and the base alignment is determined. The existence of acidic and alkaline acidic acid, the existence of known homogeneity, and the possibility of new DNA-binding factors are high.このうちの一つはreticulocyte lysateでSYNTHETIC しタンパク性が、poly(dG)(dC)アフィニティーカラムにSpecific にcombinationした.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ patent.updateTime }}
中坪 敬子其他文献
中坪 敬子的其他文献
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
相似海外基金
Analysis of the construction of extracellular environment and regulation of morphogenesis by extracellular arylsulfatase
胞外芳基硫酸酯酶胞外环境的构建及形态发生的调控分析
- 批准号:
25440156 - 财政年份:2013
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Analysis of the tissue-specific molecular structure and the regulatory mechanism in morphogenesis by extracellular arylsulfatase
胞外芳基硫酸酯酶组织特异性分子结构及形态发生调控机制分析
- 批准号:
22570067 - 财政年份:2010
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
細胞外基質としてのアリールスルファターゼ機能の解析
芳基硫酸酯酶作为细胞外基质的功能分析
- 批准号:
14658239 - 财政年份:2002
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Exploratory Research
Cascade of transcription factors in sea urchin early embryos
海胆早期胚胎中转录因子的级联
- 批准号:
09480205 - 财政年份:1997
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
ウニ・アリールスルファターゼ遺伝子の反口側外胚葉特異的発現を司る分子機構
海胆芳基硫酸酯酶基因未分化外胚层特异性表达的分子机制
- 批准号:
08680795 - 财政年份:1996
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
原腸形成の分子機構
原肠胚形成的分子机制
- 批准号:
08254212 - 财政年份:1996
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
原腸形成の分子機構
原肠胚形成的分子机制
- 批准号:
07262211 - 财政年份:1995
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
ウニ胚アリールスルファターゼの機能に関する研究
海胆胚芳基硫酸酯酶的功能研究
- 批准号:
06680719 - 财政年份:1994
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
原腸形成の分子機構
原肠胚形成的分子机制
- 批准号:
06270213 - 财政年份:1994
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Requlation of gene expression in sea urchin embryo
海胆胚胎基因表达调控
- 批准号:
05454653 - 财政年份:1993
- 资助金额:
$ 0.64万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)