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ウニ胚アリールスルファターゼの機能に関する研究

海胆胚芳基硫酸酯酶的功能研究

基本信息

批准号：
06680719
负责人：
赤坂甲治
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06680719/
关键词：
ウニ胚アリールスルファターゼ細胞外基質

项目摘要

バフンウニのアリールスルファターゼcDNAを用いて、大腸菌の系でタンパク質合成し、これを抗原としてウサギを免疫して、抗アリールスルファターゼ抗体を作成した。さらに、この抗体を用いてバフンウニ胚内のアリールスルファターゼの局材性を免疫組織化学により光学顕微鏡及び電子顕微鏡レベルで調べた。その結果、アリールスルファターゼは反口側外胚葉細胞のリソゾーム様構造の他、大部分はハイアリン層に局材していた。一方生化学的な研究からアリールスルファターゼはカルシュウムイオン存在下でハイアリン層のプロテオグリカンと結合しており、別の因子及びカルシュウムイオン存在下ではアリールスルファターゼの活性を失うことを見いだした。この事実は、リソゾーム様構造内では酵素活性を示し、ハイアリン層では活性を持たないという組織化学的観察の裏付けとなるものである。マウスの様々な組織の抗アリールスルファターゼ抗体に対する反応性を調べたところ、表皮組織に強い染色像がみられた。また、マウスのゲノムDNAをウニおArs・cDNAをプローブとしてサザン分析すると明瞭なバンドが検出され、マウスにも類似の遺伝子が存在することが示された。ただし哺乳類では表皮に強いアリールスルファターゼ活性はない。また、哺乳類とウニのアリールスルファターゼの塩基配列の類似性は低く、サザン分析では検出できないはずである。これらのことを考えあわせると、ウニのアリールスルファターゼはウニでは酵素活性を持つものの、構造タンパク質として機能している可能性が考えられる。また、多種でもこのタンパク質は保存されており、同様に構造タンパク質として機能していると考えられる。

The cDNA was made with antigens, antibodies and antibodies. The antibodies and antibodies were detected by immunohisto-chemical assay, optical microscopy and electron microscope. the results showed that the local material properties were detected by immunocytochemistry. The results showed that the ectoderm cells of ectoderm cells were used to make him, and most of them were caused by local materials. In the study of biochemistry in the first place, in the presence of a combination of biochemical factors, other factors, and the presence of biochemistry, the study of biochemistry in the study of biochemistry has been carried out in the presence of a combination of biochemistry and other factors. The enzyme activity is shown in the system, and the enzyme activity is detected in the tissue chemistry of tissue chemistry. The anti-tumor antibody was detected in the tissue and the staining image of the epidermis was detected in the epidermal tissue. It is clear that there is an error in the analysis of the data, which is similar to that of the child, it is clear that there is a problem in the DNA analysis. The epidermis of mammalian animals is very active. The similarity of the basic configuration is very low, and the analysis results show that there are significant differences between the two groups. The purpose of this study is to determine whether the activity of the enzyme is active, and that the possibility of mechanical testing is very important. Many kinds of medical equipment are used to save the equipment, and to make the same kind of equipment in the same way.